氟菌唑在人參和土壤中的殘留動態(tài)和殘留限量研究

崔麗麗，馮志偉，高潔，許允成，王春偉，

(1吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林長春 130118;2中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林長春 130112; 3延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林延吉 133002)

氟菌唑在人參和土壤中的殘留動態(tài)和殘留限量研究

崔麗麗1，2，馮志偉3，高潔1，許允成1，王春偉1，

(1吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林長春 130118;2中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林長春 130112; 3延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林延吉 133002)

【目的】對人參中氟菌唑殘留動態(tài)進(jìn)行研究，使其在人參上的使用合理化.【方法】通過田間試驗(yàn)和氣質(zhì)聯(lián)用方法檢測了質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%氟菌唑WP施藥后0、7、14、21、28和74 d(收獲期)在人參和土壤中的消解動態(tài)及最終殘留量.【結(jié)果和結(jié)論】施藥劑量為1 000 g·hm-2，施藥1次時，氟菌唑在人參和土壤中的原始沉積量分別為0.54和0.25 mg·kg-1;半衰期分別為19.9和25.4 d;收獲時鮮人參根中氟菌唑最終殘留量為0.04 mg·kg-1、干人參的殘留量為0.14 mg·kg-1;綜合多方面因素，建議我國鮮人參中氟菌唑的最大殘留限量值(MRL)暫定為0.05 mg·kg-1、干人參暫定為0.20 mg·kg-1;施藥量不高于1 000 g·hm-2，一個生長季節(jié)施藥1次.安全間隔期無法確定.

氟菌唑;人參殘留;土壤殘留;氣質(zhì)聯(lián)用色譜法(GC-MS)

氟菌唑(Triflumizole)是日本曹達(dá)公司于1979年開發(fā)的一種咪唑類低毒高效麥角甾醇脫甲基化抑制劑，是一種高效、低毒、低殘留的內(nèi)吸性殺菌劑，對白粉病、銹病等兼具預(yù)防和治療作用，廣泛用于防治麥類、蔬菜、瓜果的白粉病、銹病，茶樹炭疽等病害［1］，其制劑具有活性高，使植物不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)而受到普遍重視.其單劑和混劑主要用于防治人參的黑斑病、灰霉病、疫病、根腐病、立枯病、銹腐病等［2］.氟菌唑在蔬菜、水果及麥類上有檢測方法及殘留報道［3］，但未見在人參上的殘留報道.本文以氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法研究了氟菌唑在人參根及土壤中的殘留動態(tài).

1 材料與方法

1.1 材料

品種為5年生二馬牙人參.

儀器：Agilent 6890/Agilent 5973氣相色譜質(zhì)譜儀(美國安捷倫公司)、組織搗碎機(jī)(20 000 r/min)、勻漿機(jī)(德國IKA)、RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)、分析天平、固相萃取柱(Florisil?，1 000 mg，6 mL或相當(dāng)者)、常用玻璃器皿.

試劑：藥劑為氟菌唑WP(w為30%)，氟菌唑標(biāo)準(zhǔn)品(w為99.5%)由北京迪馬公司提供.正己烷、丙酮、乙腈等所用的有機(jī)試劑均為優(yōu)級純，水為二級蒸餾水［4］，氯化鈉(于140℃烘4 h后置于干燥器中備用).

1.2 方法

試驗(yàn)在吉林省撫松縣松江河鎮(zhèn)曙光林場人參地進(jìn)行，2010年7月2日采用背負(fù)式噴霧器噴霧打藥，小區(qū)面積為15 m2.

1.2.1 消解動態(tài)試驗(yàn)參照文獻(xiàn)［5-8］的方法人參生長期1次施藥，多次采樣.試驗(yàn)設(shè)高劑量1 000 g·hm-2和空白對照，3次重復(fù).在施藥后間隔為0 (在施藥后藥液基本風(fēng)干的2 h之內(nèi))、7、14、21、28、74 d(收獲期)分別采樣.每小區(qū)按對角線取5點(diǎn)，取土深度為0～10 cm，四分法留樣1.0 kg.同期采集空白樣品，標(biāo)簽標(biāo)記后在-20℃條件下保存.

1.2.2 最終殘留試驗(yàn)高低施藥劑量分別為1 000 g·hm-2和660 g·hm-2，3次重復(fù)，施藥1次.設(shè)空白對照，采樣時間為施藥后21、28、74 d(收獲期)，采樣和試樣保存的方法同消解動態(tài)試驗(yàn).

1.2.3 試樣的制備、提取和凈化室溫下解凍保存樣品，人參直接放入組織搗碎機(jī)中倒碎;土壤40℃烘干后過40目(380 μm)篩，各稱取1 kg密封標(biāo)記，于-20～-16℃條件下保存?zhèn)溆?分別精密稱取人參和土壤10.00 g于燒杯中，加入30 mL乙腈，勻漿機(jī)中高速勻漿2 min.分別將人參和土壤提取液在布氏漏斗(布氏漏斗放定量濾紙)中抽濾，加入20 mL乙腈分2次洗燒杯，洗液一并抽濾，濾液劇烈震蕩搖勻，室溫下靜置10～30 min，使乙腈相與水相充分分層.吸取10 mL上層有機(jī)相于圓底燒瓶中，在40℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中蒸發(fā)至近干，準(zhǔn)確加入5.0 mL丙酮溶解殘?jiān)?，供凈?預(yù)淋洗：將弗羅里硅柱安裝在固相萃取裝置上，加入5 mL丙酮-正己烷(體積比1∶9)，棄去流出液;再加入5 mL丙酮-正己烷，棄去流出液.凈化：弗羅里硅柱預(yù)淋洗后，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時，立即倒入上述待凈化溶液;用5 mL丙酮-正己烷(體積比1∶9)洗2次盛裝提取液的圓底燒瓶，洗液過柱，收集液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加2 mL正己烷定容，供檢測.

1.2.4 GC-MS測定及條件色譜柱：HP-5石英毛細(xì)管柱，30 m×0.25 mm(內(nèi)徑)×0.25 μm(膜厚);程序：初始柱溫120℃保持1 min，10℃/min升至260℃后保持10 min，自動調(diào)諧模式，進(jìn)樣口溫度250℃，檢測器溫度280℃，載氣為氦氣(φ≥99.999%)，流速1.0 mL/min;尾吹氣流量29 mL/min，進(jìn)樣體積為1 μL，進(jìn)樣方式為脈沖不分流進(jìn)樣，脈沖壓172 250 Pa，延時0.75 min后開閥.離子源為電子轟擊源(EI)，70 eV電離能量，溶劑延遲時間8 min.SIM選擇離子監(jiān)測模式，選擇離子為：m/z73、m/z278、m/z287，其中m/z73為定量離子.

1.3 殘留量計算

殘留量按下式計算：

式中：X為試樣中被測農(nóng)藥殘留量(mg·kg-1);Ai為樣品溶液中被測農(nóng)藥的峰面積(Hz);A0為標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中被測農(nóng)藥的峰面積(Hz);C0為標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中被測農(nóng)藥的質(zhì)量濃度(mg/L);V1為提取溶劑體積(mL);V2為樣品最終定容體積(mL);V3為移取樣液量(mL);M為稱取的樣品質(zhì)量(g).

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作和回收率的測定

將100 mg/L氟菌唑標(biāo)準(zhǔn)儲備液配制成0.01、0.05、0.50、1.00、5.00、10.00 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液，按選定的試驗(yàn)方法進(jìn)行試驗(yàn)，經(jīng)選擇離子定量掃描，以峰面積(y)為縱坐標(biāo)、以進(jìn)樣量(x)為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得氟菌唑的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù).

分別準(zhǔn)確稱取空白對照區(qū)的土壤10.00 g，人參10.00 g空白試樣，每份中準(zhǔn)確加入一定量的氟菌唑標(biāo)準(zhǔn)溶液，使添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.05、0.10、0.50 mg·kg-1，按上述所選擇的最優(yōu)條件進(jìn)行測定，每個添加試驗(yàn)設(shè)定3個平行和1個對照，計算加標(biāo)平均回收率和3次測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD).

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線和回收率

本試驗(yàn)氟菌唑的線性回歸方程為y=39 958x+ 1 913.9，R2=0.999 6，標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1，表明氟菌唑標(biāo)準(zhǔn)液在0.01～10 mg/L內(nèi)呈良好線性.本方法的最低檢出質(zhì)量濃度為0.002 mg/L.

圖1 氟菌唑標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve of triflumizole

從表1中可見，氟菌唑在0.05～0.50 mg·kg-1的添加水平下，平均回收率人參根和土壤中分別在80.1%～106.6%、82.0%～87.8%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為4.33%～5.77%、2.82%～5.77%.該方法對氟菌唑具有良好的分離效果，靈敏度和準(zhǔn)確度均符合農(nóng)藥殘留分析要求.

表1 氟菌唑在人參和土壤中的添加回收率Tab.1 Recoveries of triflumizole in ginseng and soil

2.2 降解動態(tài)和最終殘留試驗(yàn)

30 %氟菌唑WP在人參根及土壤中的消解動態(tài)試驗(yàn)結(jié)果經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換與回歸分析，得出降解動態(tài)方程，從表2中可以看出，氟菌唑在人參、土壤中降解動態(tài)符合一級反應(yīng)動力學(xué)方程Ct=C0e-kt，由此可求出原始沉積量C0和降解半衰期T1/2=ln2k-1.氟菌唑人參和土壤半衰期分別為19.9和25.4 d，均屬于易降解農(nóng)藥(T1/2＜30 d)(表2).

質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%氟菌唑WP在人參根及土壤中的最終殘留試驗(yàn)結(jié)果表明：在人參生長期施用1次質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%氟菌唑WP，收獲期推薦使用劑量(660 g·hm-2)和高劑量(1 000 g·hm-2)根中殘留量分別為未檢出和0.04 mg·kg-1，土壤殘留量為0.014和0.028 mg·kg-1(表3).

表2 氟菌唑在人參根及土壤中的消解動態(tài)1)Tab.2 Residual dynamics of triflumizole in ginseng and soil

表3 氟菌唑在人參根及土壤中的最終殘留量1)Tab.3 Final residues of triflumizole in ginseng and soil mg·kg-1

3 討論與結(jié)論

按高劑量1 000 g·hm-2施藥1次，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%氟菌唑WP在人參根及土壤中的降解半衰期分別為19.9和25.4 d，小于30 d，屬于易降解農(nóng)藥.其在人參上的最終殘留量為0.04 mg·kg-1，如果按照3.5 kg鮮人參可制成1 kg干人參計算，不考慮人參加工過程中氟菌唑的降解，推測出干人參中氟菌唑的最終殘留量為0.14 mg·kg-1，因此，建議質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%氟菌唑WP在人參鮮根中的最大殘留限量值(MRL)可暫定為0.05 mg·kg-1，干參中的MRL可暫定為0.2 mg·kg-1，在人參生長期與其他殺菌劑交替施用，施藥量不高于1 000 g·hm-2，施藥1次.從國際食品法典委員會(CAC)可查得氟菌唑的每日允許攝入量(ADI)為0.05 mg·kg-1［9-10］，按照人均體質(zhì)量60 kg，中國人每日攝入的食品標(biāo)準(zhǔn)總量為1.028 6 kg，植物油的攝入量為0.032 7 kg，人參在日常食用比植物油要少，以食用油來計算，僅占3.18%，則氟菌唑在人體內(nèi)毒理學(xué)上最大允許殘留量為MLRs=(ADI值×60)÷3.18%=94.34 mg·kg-1，據(jù)此建議氟菌唑在人參鮮根中的MRL為0.05 mg·kg-1，干參中的MRL為0.2 mg·kg-1是合理的，小于毒理學(xué)上允許的最大殘留限量.國外歐盟(http∥ec.europa.eu/food/plant/protection/pesticide/ index_en.html)和韓國(http：∥www.mfds.go.kr/index.do?mid=19＆seq=46793＆cmd=v)規(guī)定氟菌唑在人參根中的最大殘留限量均為0.10 mg·kg-1，而美國、加拿大、日本、澳大利亞目前沒有提出氟菌唑在人參中的限量標(biāo)準(zhǔn)［11-13］.日本在蘋果、葡萄、梨上規(guī)定氟菌唑的殘留限量值為2 mg·kg-1，韓國在韭菜、甘藍(lán)、茼蒿上殘留限量值為1 mg·kg-1，而加拿大在蘋果上殘留限量為1 mg·kg-1，各國在蔬菜藥草中的最大殘留限量值MRLs在0.5～5.0 mg·kg-1之間，我國目前沒有制定氟菌唑在蔬菜、水果和人參中的殘留限量標(biāo)準(zhǔn)［14］.

本試驗(yàn)中采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)進(jìn)行檢測，該方法是近年來發(fā)展起來的分析檢測技術(shù)，逐步成為農(nóng)藥殘留分析的常用方法.其最大特點(diǎn)是將氣相色譜和質(zhì)譜儀連接起來，可以減少干擾物影響，既有氣相色譜高分離效能，又有質(zhì)譜鑒定化合物結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，可達(dá)到同時定性和定量的檢測目的［15］.本試驗(yàn)中氟菌唑的最低檢出濃度0.01 mg·L-1，添加回收率為80.1%～106.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.82%～5.77%，符合殘留試驗(yàn)要求.關(guān)于氟菌唑的殘留檢測方法，國內(nèi)報道了氟菌唑在水果、蔬菜和茶中的高效液相色譜檢測方法，蔬菜中及原藥的氣相色譜質(zhì)譜檢測方法［3，16-17］，本試驗(yàn)中采用的GC-MS方法檢測人參中氟菌唑的殘留量國內(nèi)鮮見報道.

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【責(zé)任編輯霍歡】

Residual dynamics and residual limits of triflumizole in ginseng and soil

CUI Lili1，2，F(xiàn)ENG Zhiwei3，GAO Jie1，XU Yuncheng1，WANG Chunwei1，
(1 College of Agronomy，Jilin Agricultural University，Changchun 130118，China; 2 Institute of Special Wild Economic Animal and Plant Science，CAAS，Changchun 130112，China; 3 College of Agriculture，Yanbian University，Yanji 133002，China)

【Objective】The research aims to achieve the reasonable application of triflumizole inPanax ginseng.【Method】Field trial and gas chromatography mass spectrometry were carried out to study residual decline and final residues of triflumizole 30%WP after being sprayed in 0，7，14，21，28，74 days.【Result and conclusion】The results showed that the original deposition of triflumizole was 0.54 and 0.25 mg·kg-1respectively in ginseng and soil;the half-life of triflumizole was 19.9 and 25.4 d respectively in ginseng and soil.The final residue was 0.04 mg·kg-1and 0.14 mg·kg-1respectively in fresh root and dry root，while the sprayed dosage was 1 000 g·hm-2.Based on many factors，the maximum residual limit(MRL)of triflumizole is suggested to be 0.05 mg·kg-1and 0.2 mg·kg-1in the fresh root and dry root respectively.Application of triflumizole should be just once in every growing season，and the practical dosage should not be over 1 000 g·hm-2.The preharvest interval can not be determined.

triflumizole;residual in ginseng;residual in oil;GC-MS

S481+.8

A

1001-411X(2014)01-0069-04

崔麗麗，馮志偉，高潔，等.氟菌唑在人參和土壤中的殘留動態(tài)和殘留限量研究［J］.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2014，35(1)：69-72.

2012-12-31優(yōu)先出版時間：2013-11-07

優(yōu)先出版網(wǎng)址：http:∥www.cnki.net/kcms/detail/44.1110.S.20131107.1610.015.html

崔麗麗(1984—)，女，碩士，E-mail:cbscui@126.com;通信作者:高潔(1964—)，女，教授，博士，E-mail: jiegao115@126.com

吉林省世行貸款農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全項(xiàng)目(2011-Z24);吉林省2011年人參產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項(xiàng)資金項(xiàng)目(2011省財政廳)