微綠球藻作為刺參幼體餌料的可行性研究

陳書秀+劉學(xué)遷+王青巖+李曉捷+曲善村

摘要：用微綠球藻新鮮藻液、微綠球藻冷凍濃縮液、微綠球藻干粉+干酵母及干酵母對刺參浮游階段幼體進(jìn)行了為期15 d的投喂實驗。結(jié)果表明: 以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢；單獨投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長發(fā)育的營養(yǎng)需求，但生長相對緩慢，成活率及變態(tài)率相對較低。另外，單獨投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低。

關(guān)鍵詞：刺參幼體；微綠球藻；日增長率；成活率；變態(tài)率

刺參（Apostichopus japonicus）屬棘皮動物門（Echinodermata）、海參綱（Holothuroidea）楯手目（Aspidochirota）、刺參科（Stichopodidae）、刺參屬（Stichopus）。在中國自古被譽為“海產(chǎn)八珍”之首，具有很高的營養(yǎng)保健和藥用價值［1］。近年來，隨著人們保健意識的逐步增強和刺參市場前景的不斷開闊，刺參養(yǎng)殖已經(jīng)成為中國北方尤其是遼寧、山東等地的主要珍貴水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)品種。但是，隨著刺參產(chǎn)業(yè)的不斷壯大，也隨之產(chǎn)生了一系列的問題從而在一定程度上制約了刺參產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。刺參養(yǎng)殖分為育苗和養(yǎng)成兩個階段，刺參育苗過程中浮游時期幼體發(fā)育正常與否對于變態(tài)至稚參的成活率有直接影響，期間投喂充足而適宜的餌料又是浮游幼體正常生長、發(fā)育、順利變態(tài)的前提。目前研究表明［1-3］，適宜的餌料有鹽藻、湛江叉鞭金藻、牟氏角毛藻、三角褐指藻、小新月菱形藻。采用上述餌料單一或混合投喂均可獲得較好的培育效果，但以2～3種餌料混合投喂效果更佳，餌料混合投喂可使其營養(yǎng)互補，滿足幼體的營養(yǎng)需求。但是目前所采用的單胞藻都為高溫種類，且不易培養(yǎng)、易污染老化，容易造成育苗期間的餌料短缺，從而導(dǎo)致育苗失敗。

微綠球藻是一種海洋單細(xì)胞微藻，具有繁殖迅速、易培養(yǎng)、營養(yǎng)豐富等特點，細(xì)胞球形或橢球形，直徑2～4 μm。該藻含有的PUFA是海水仔魚、蝦蟹貝等幼體的必需脂肪酸，能夠提高海產(chǎn)動物生長率和幼體的存活率，加上其細(xì)胞壁極薄，易于消化吸收，在水產(chǎn)養(yǎng)殖及生物活性物質(zhì)提取方面具有重要的經(jīng)濟(jì)價值［4］。目前已應(yīng)用于泥蚶、蟹［5］、蝦［6］等育苗及輪蟲［7-8］培養(yǎng)中，并取得了良好效果。本文主要以微綠球藻活細(xì)胞、干粉或冷凍濃縮液及干酵母為餌料，通過對刺參浮游幼體生長率、存活率及變態(tài)率的統(tǒng)計分析，從而對微綠球藻作為刺參浮游幼體階段的投喂餌料效果做出初步分析。

1材料與方法

1.1刺參幼體及餌料來源

實驗用刺參幼體來自于牟平海區(qū)。

所用微綠球藻新鮮藻液、干粉、冷凍濃縮液均由煙臺海融生物技術(shù)有限公司提供。

1.2實驗方法

刺參幼體分別放置于0.15 m3的塑料桶中，暗光培育，培育密度為0.5個/mL，連續(xù)充氣，水溫保持在21 ℃，每天換水2次，每次換水量100%，換水后溫差不超過±1 ℃。每天換水后投餌，培育用水及投喂餌料均經(jīng)300目篩絹過濾。每次投餌量為：小耳幼體5 000～10 000個/mL，中耳幼體10 000～15 000個/mL，大耳幼體15 000～20 000個/mL。（干酵母按說明濃度換算為細(xì)胞數(shù)投喂）。

實驗設(shè)4個處理組，每組設(shè)3個重復(fù)。分別為：A—微綠球藻新鮮藻液；B—微綠球藻冷凍濃縮液；C—微綠球藻干粉50%+酵母粉50%；D—干酵母。

實驗從7月5日開始，每天從各桶中隨機取30個幼體進(jìn)行測量，計算其體長、密度并觀察其生長發(fā)育情況。

體長日增長率計算方法：⊿L（%d-1）=100(㏑L2-㏑L1)/T

L2；表示所測稚幼參的最終體長（μm）；L1：表示所測稚幼參的初始體長（μm）；T：表示稚幼參的生長時間（d）。

大耳幼體成活率計算方法：大耳幼體成活率=p1/p2×100%

其中：p1為剛開始出現(xiàn)樽形幼體時水中浮游刺參幼體密度；p2為原有刺參幼體密度。

2結(jié)果

2.1各處理組幼體體長日增長率比較

各處理組刺參幼體在整個實驗過程中均表現(xiàn)出了顯著的生長（圖1）。各處理組經(jīng)8 d的培育，生長最快的處理組為組C（干酵母+微綠球藻干粉），由430 μm生長到910 μm，體長日增長率為59.25%。最慢的處理組為組B(冷凍藻濃縮液)，由420 μm生長到680 μm，體長日增長率為39.50%。

圖1不同餌料條件下刺參幼體體長日增長率

2.2各處理組大耳幼體成活率比較

由于各處理組生長發(fā)育快慢的差異，大耳幼體成活率分別在不同時間進(jìn)行計算，結(jié)果見圖2。由圖2可以看出處理組C（酵母+藻粉）效果最好，成活率高達(dá)96.5%，處理組B（冷凍藻）成活率最低，為45.6%。

圖2不同餌料條件下大耳幼體成活率

2.3各處理組變態(tài)率的比較

實驗的四個不同處理組不僅生長速率及成活率存在差異，其樽形幼體變態(tài)率也有顯著差異（見圖3），生長最快的處理組C（酵母+干藻粉）在培養(yǎng)到第7 d就已經(jīng)開始出現(xiàn)樽形幼體，2 d后全部變態(tài)；生長最慢的處理組B（冷凍藻液）不僅在培育到第10 d才開始出現(xiàn)樽形幼體，而且12 d后仍有多數(shù)幼體未變態(tài)，停留在大耳幼體期直至死亡。

圖3不同餌料條件下樽形幼體變態(tài)率

2.4各處理組生長發(fā)育情況比較

實驗從7月5日開始投喂餌料，第1 d投喂餌料之后觀察各處理組幼體攝食情況，從圖4可以看出，各處理組幼體發(fā)育情況無顯著差異，胃型較飽滿，攝食情況良好。第6天觀察各處理組幼體發(fā)育情況（見圖5），從圖中可以看出處理組C大耳幼體胃型飽滿，個體較大，并開始出現(xiàn)樽形幼體。而處理組B中刺參幼體個體小，且出現(xiàn)胃縮小及爛胃現(xiàn)象，有一部分停留在小耳幼體階段，未出現(xiàn)樽形幼體。處理組A和處理組D發(fā)育情況良好，與處理組C相比，僅在幼體密度及個體大小上稍有差異?！糉L)〗〖TP<25.tif>,BP〗

圖4投餌第一天，不同處理組幼體生長發(fā)育情況

圖5投餌第六天，不同處理組幼體生長發(fā)育情況

3討論

實驗結(jié)果表明，以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢；單獨投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長發(fā)育的營養(yǎng)需求，但生長相對緩慢，成活率及變態(tài)率相對較低。另外，單獨投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低，且在培育后期損失過半，在培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)“爛胃”、“胃萎縮”等現(xiàn)象，后期幼體出現(xiàn)“化邊”、“爛邊”等。

由以上結(jié)果可以看出，微綠球藻雖為綠藻，但其細(xì)胞壁薄，且具較好的上浮性，個體小（2～4 μm），易于攝食，富含多種不飽和脂肪酸等生物活性物質(zhì)，可以作為刺參幼參的餌料之一，較硅藻或金藻等常用餌料，微綠球藻具有易培養(yǎng)、生長快、抗污染等優(yōu)點，單獨投喂新鮮藻液基本可以滿足幼體的需求，達(dá)到較好的育苗效果。如果采用微綠球藻干藻粉與干酵母混合投喂，由于酵母可以彌補微藻中氨基酸、消化酶和生長激素等營養(yǎng)缺陷，因此可以更好地滿足幼體的營養(yǎng)需求，本實驗結(jié)果也證明了這一點。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 仇磊，姜國良.幾種單胞藻餌料對刺參耳狀幼體爛胃的影響［J］.齊魯漁業(yè)，2006(6):41-42

［2］ 張煜，劉永宏. 國內(nèi)、外刺參研究的回顧、進(jìn)展極其資源增殖途徑的探討［J］.齊魯漁業(yè)，1984（2）：57-60

［3］ 隋錫林. 海參增養(yǎng)殖［M］. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，1990

［4］ 余穎，陳必鏈.微綠球藻的研究進(jìn)展［J］.海洋通報，2005，6（24）：75-81

［5］ 沈和定，黃旭雄.三種藻類對中華絨螯蟹Ⅰ期溞狀幼體培育效果的比較［J］.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報，1999,8（3）：202-209

［6］ 成文靖,蔡春芳.微綠球藻在羅氏沼蝦育苗中的應(yīng)用研究［J］.水利漁業(yè), 2002, 22(1): 15-16

［7］ 劉新富，雷霽霖，劉忠強，等.真鯛餌料生物褶皺臂尾輪蟲和眼點擬微綠球藻的大量培養(yǎng)［J］.海洋科學(xué)，2002，24（5）：47-51

［8］ Lubzens E, Gibson O, Zmora O et al..Potential advantages of frozen algae (Nannochloropsis sp.) for rotifer (Brachionus plicatilis) culture ［J］.Aquaculture, 1995, 133: 295-309

摘要：用微綠球藻新鮮藻液、微綠球藻冷凍濃縮液、微綠球藻干粉+干酵母及干酵母對刺參浮游階段幼體進(jìn)行了為期15 d的投喂實驗。結(jié)果表明: 以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢；單獨投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長發(fā)育的營養(yǎng)需求，但生長相對緩慢，成活率及變態(tài)率相對較低。另外，單獨投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低。

關(guān)鍵詞：刺參幼體；微綠球藻；日增長率；成活率；變態(tài)率

刺參（Apostichopus japonicus）屬棘皮動物門（Echinodermata）、海參綱（Holothuroidea）楯手目（Aspidochirota）、刺參科（Stichopodidae）、刺參屬（Stichopus）。在中國自古被譽為“海產(chǎn)八珍”之首，具有很高的營養(yǎng)保健和藥用價值［1］。近年來，隨著人們保健意識的逐步增強和刺參市場前景的不斷開闊，刺參養(yǎng)殖已經(jīng)成為中國北方尤其是遼寧、山東等地的主要珍貴水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)品種。但是，隨著刺參產(chǎn)業(yè)的不斷壯大，也隨之產(chǎn)生了一系列的問題從而在一定程度上制約了刺參產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。刺參養(yǎng)殖分為育苗和養(yǎng)成兩個階段，刺參育苗過程中浮游時期幼體發(fā)育正常與否對于變態(tài)至稚參的成活率有直接影響，期間投喂充足而適宜的餌料又是浮游幼體正常生長、發(fā)育、順利變態(tài)的前提。目前研究表明［1-3］，適宜的餌料有鹽藻、湛江叉鞭金藻、牟氏角毛藻、三角褐指藻、小新月菱形藻。采用上述餌料單一或混合投喂均可獲得較好的培育效果，但以2～3種餌料混合投喂效果更佳，餌料混合投喂可使其營養(yǎng)互補，滿足幼體的營養(yǎng)需求。但是目前所采用的單胞藻都為高溫種類，且不易培養(yǎng)、易污染老化，容易造成育苗期間的餌料短缺，從而導(dǎo)致育苗失敗。

微綠球藻是一種海洋單細(xì)胞微藻，具有繁殖迅速、易培養(yǎng)、營養(yǎng)豐富等特點，細(xì)胞球形或橢球形，直徑2～4 μm。該藻含有的PUFA是海水仔魚、蝦蟹貝等幼體的必需脂肪酸，能夠提高海產(chǎn)動物生長率和幼體的存活率，加上其細(xì)胞壁極薄，易于消化吸收，在水產(chǎn)養(yǎng)殖及生物活性物質(zhì)提取方面具有重要的經(jīng)濟(jì)價值［4］。目前已應(yīng)用于泥蚶、蟹［5］、蝦［6］等育苗及輪蟲［7-8］培養(yǎng)中，并取得了良好效果。本文主要以微綠球藻活細(xì)胞、干粉或冷凍濃縮液及干酵母為餌料，通過對刺參浮游幼體生長率、存活率及變態(tài)率的統(tǒng)計分析，從而對微綠球藻作為刺參浮游幼體階段的投喂餌料效果做出初步分析。

1材料與方法

1.1刺參幼體及餌料來源

實驗用刺參幼體來自于牟平海區(qū)。

所用微綠球藻新鮮藻液、干粉、冷凍濃縮液均由煙臺海融生物技術(shù)有限公司提供。

1.2實驗方法

刺參幼體分別放置于0.15 m3的塑料桶中，暗光培育，培育密度為0.5個/mL，連續(xù)充氣，水溫保持在21 ℃，每天換水2次，每次換水量100%，換水后溫差不超過±1 ℃。每天換水后投餌，培育用水及投喂餌料均經(jīng)300目篩絹過濾。每次投餌量為：小耳幼體5 000～10 000個/mL，中耳幼體10 000～15 000個/mL，大耳幼體15 000～20 000個/mL。（干酵母按說明濃度換算為細(xì)胞數(shù)投喂）。

實驗設(shè)4個處理組，每組設(shè)3個重復(fù)。分別為：A—微綠球藻新鮮藻液；B—微綠球藻冷凍濃縮液；C—微綠球藻干粉50%+酵母粉50%；D—干酵母。

實驗從7月5日開始，每天從各桶中隨機取30個幼體進(jìn)行測量，計算其體長、密度并觀察其生長發(fā)育情況。

體長日增長率計算方法：⊿L（%d-1）=100(㏑L2-㏑L1)/T

L2；表示所測稚幼參的最終體長（μm）；L1：表示所測稚幼參的初始體長（μm）；T：表示稚幼參的生長時間（d）。

大耳幼體成活率計算方法：大耳幼體成活率=p1/p2×100%

其中：p1為剛開始出現(xiàn)樽形幼體時水中浮游刺參幼體密度；p2為原有刺參幼體密度。

2結(jié)果

2.1各處理組幼體體長日增長率比較

各處理組刺參幼體在整個實驗過程中均表現(xiàn)出了顯著的生長（圖1）。各處理組經(jīng)8 d的培育，生長最快的處理組為組C（干酵母+微綠球藻干粉），由430 μm生長到910 μm，體長日增長率為59.25%。最慢的處理組為組B(冷凍藻濃縮液)，由420 μm生長到680 μm，體長日增長率為39.50%。

圖1不同餌料條件下刺參幼體體長日增長率

2.2各處理組大耳幼體成活率比較

由于各處理組生長發(fā)育快慢的差異，大耳幼體成活率分別在不同時間進(jìn)行計算，結(jié)果見圖2。由圖2可以看出處理組C（酵母+藻粉）效果最好，成活率高達(dá)96.5%，處理組B（冷凍藻）成活率最低，為45.6%。

圖2不同餌料條件下大耳幼體成活率

2.3各處理組變態(tài)率的比較

實驗的四個不同處理組不僅生長速率及成活率存在差異，其樽形幼體變態(tài)率也有顯著差異（見圖3），生長最快的處理組C（酵母+干藻粉）在培養(yǎng)到第7 d就已經(jīng)開始出現(xiàn)樽形幼體，2 d后全部變態(tài)；生長最慢的處理組B（冷凍藻液）不僅在培育到第10 d才開始出現(xiàn)樽形幼體，而且12 d后仍有多數(shù)幼體未變態(tài)，停留在大耳幼體期直至死亡。

圖3不同餌料條件下樽形幼體變態(tài)率

2.4各處理組生長發(fā)育情況比較

實驗從7月5日開始投喂餌料，第1 d投喂餌料之后觀察各處理組幼體攝食情況，從圖4可以看出，各處理組幼體發(fā)育情況無顯著差異，胃型較飽滿，攝食情況良好。第6天觀察各處理組幼體發(fā)育情況（見圖5），從圖中可以看出處理組C大耳幼體胃型飽滿，個體較大，并開始出現(xiàn)樽形幼體。而處理組B中刺參幼體個體小，且出現(xiàn)胃縮小及爛胃現(xiàn)象，有一部分停留在小耳幼體階段，未出現(xiàn)樽形幼體。處理組A和處理組D發(fā)育情況良好，與處理組C相比，僅在幼體密度及個體大小上稍有差異。〖FL)〗〖TP<25.tif>,BP〗

圖4投餌第一天，不同處理組幼體生長發(fā)育情況

圖5投餌第六天，不同處理組幼體生長發(fā)育情況

3討論

實驗結(jié)果表明，以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢；單獨投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長發(fā)育的營養(yǎng)需求，但生長相對緩慢，成活率及變態(tài)率相對較低。另外，單獨投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低，且在培育后期損失過半，在培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)“爛胃”、“胃萎縮”等現(xiàn)象，后期幼體出現(xiàn)“化邊”、“爛邊”等。

由以上結(jié)果可以看出，微綠球藻雖為綠藻，但其細(xì)胞壁薄，且具較好的上浮性，個體小（2～4 μm），易于攝食，富含多種不飽和脂肪酸等生物活性物質(zhì)，可以作為刺參幼參的餌料之一，較硅藻或金藻等常用餌料，微綠球藻具有易培養(yǎng)、生長快、抗污染等優(yōu)點，單獨投喂新鮮藻液基本可以滿足幼體的需求，達(dá)到較好的育苗效果。如果采用微綠球藻干藻粉與干酵母混合投喂，由于酵母可以彌補微藻中氨基酸、消化酶和生長激素等營養(yǎng)缺陷，因此可以更好地滿足幼體的營養(yǎng)需求，本實驗結(jié)果也證明了這一點。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 仇磊，姜國良.幾種單胞藻餌料對刺參耳狀幼體爛胃的影響［J］.齊魯漁業(yè)，2006(6):41-42

［2］ 張煜，劉永宏. 國內(nèi)、外刺參研究的回顧、進(jìn)展極其資源增殖途徑的探討［J］.齊魯漁業(yè)，1984（2）：57-60

［3］ 隋錫林. 海參增養(yǎng)殖［M］. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，1990

［4］ 余穎，陳必鏈.微綠球藻的研究進(jìn)展［J］.海洋通報，2005，6（24）：75-81

［5］ 沈和定，黃旭雄.三種藻類對中華絨螯蟹Ⅰ期溞狀幼體培育效果的比較［J］.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報，1999,8（3）：202-209

［6］ 成文靖,蔡春芳.微綠球藻在羅氏沼蝦育苗中的應(yīng)用研究［J］.水利漁業(yè), 2002, 22(1): 15-16

［7］ 劉新富，雷霽霖，劉忠強，等.真鯛餌料生物褶皺臂尾輪蟲和眼點擬微綠球藻的大量培養(yǎng)［J］.海洋科學(xué)，2002，24（5）：47-51

［8］ Lubzens E, Gibson O, Zmora O et al..Potential advantages of frozen algae (Nannochloropsis sp.) for rotifer (Brachionus plicatilis) culture ［J］.Aquaculture, 1995, 133: 295-309

摘要：用微綠球藻新鮮藻液、微綠球藻冷凍濃縮液、微綠球藻干粉+干酵母及干酵母對刺參浮游階段幼體進(jìn)行了為期15 d的投喂實驗。結(jié)果表明: 以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢；單獨投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長發(fā)育的營養(yǎng)需求，但生長相對緩慢，成活率及變態(tài)率相對較低。另外，單獨投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低。

關(guān)鍵詞：刺參幼體；微綠球藻；日增長率；成活率；變態(tài)率

刺參（Apostichopus japonicus）屬棘皮動物門（Echinodermata）、海參綱（Holothuroidea）楯手目（Aspidochirota）、刺參科（Stichopodidae）、刺參屬（Stichopus）。在中國自古被譽為“海產(chǎn)八珍”之首，具有很高的營養(yǎng)保健和藥用價值［1］。近年來，隨著人們保健意識的逐步增強和刺參市場前景的不斷開闊，刺參養(yǎng)殖已經(jīng)成為中國北方尤其是遼寧、山東等地的主要珍貴水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)品種。但是，隨著刺參產(chǎn)業(yè)的不斷壯大，也隨之產(chǎn)生了一系列的問題從而在一定程度上制約了刺參產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。刺參養(yǎng)殖分為育苗和養(yǎng)成兩個階段，刺參育苗過程中浮游時期幼體發(fā)育正常與否對于變態(tài)至稚參的成活率有直接影響，期間投喂充足而適宜的餌料又是浮游幼體正常生長、發(fā)育、順利變態(tài)的前提。目前研究表明［1-3］，適宜的餌料有鹽藻、湛江叉鞭金藻、牟氏角毛藻、三角褐指藻、小新月菱形藻。采用上述餌料單一或混合投喂均可獲得較好的培育效果，但以2～3種餌料混合投喂效果更佳，餌料混合投喂可使其營養(yǎng)互補，滿足幼體的營養(yǎng)需求。但是目前所采用的單胞藻都為高溫種類，且不易培養(yǎng)、易污染老化，容易造成育苗期間的餌料短缺，從而導(dǎo)致育苗失敗。

微綠球藻是一種海洋單細(xì)胞微藻，具有繁殖迅速、易培養(yǎng)、營養(yǎng)豐富等特點，細(xì)胞球形或橢球形，直徑2～4 μm。該藻含有的PUFA是海水仔魚、蝦蟹貝等幼體的必需脂肪酸，能夠提高海產(chǎn)動物生長率和幼體的存活率，加上其細(xì)胞壁極薄，易于消化吸收，在水產(chǎn)養(yǎng)殖及生物活性物質(zhì)提取方面具有重要的經(jīng)濟(jì)價值［4］。目前已應(yīng)用于泥蚶、蟹［5］、蝦［6］等育苗及輪蟲［7-8］培養(yǎng)中，并取得了良好效果。本文主要以微綠球藻活細(xì)胞、干粉或冷凍濃縮液及干酵母為餌料，通過對刺參浮游幼體生長率、存活率及變態(tài)率的統(tǒng)計分析，從而對微綠球藻作為刺參浮游幼體階段的投喂餌料效果做出初步分析。

1材料與方法

1.1刺參幼體及餌料來源

實驗用刺參幼體來自于牟平海區(qū)。

所用微綠球藻新鮮藻液、干粉、冷凍濃縮液均由煙臺海融生物技術(shù)有限公司提供。

1.2實驗方法

刺參幼體分別放置于0.15 m3的塑料桶中，暗光培育，培育密度為0.5個/mL，連續(xù)充氣，水溫保持在21 ℃，每天換水2次，每次換水量100%，換水后溫差不超過±1 ℃。每天換水后投餌，培育用水及投喂餌料均經(jīng)300目篩絹過濾。每次投餌量為：小耳幼體5 000～10 000個/mL，中耳幼體10 000～15 000個/mL，大耳幼體15 000～20 000個/mL。（干酵母按說明濃度換算為細(xì)胞數(shù)投喂）。

實驗設(shè)4個處理組，每組設(shè)3個重復(fù)。分別為：A—微綠球藻新鮮藻液；B—微綠球藻冷凍濃縮液；C—微綠球藻干粉50%+酵母粉50%；D—干酵母。

實驗從7月5日開始，每天從各桶中隨機取30個幼體進(jìn)行測量，計算其體長、密度并觀察其生長發(fā)育情況。

體長日增長率計算方法：⊿L（%d-1）=100(㏑L2-㏑L1)/T

L2；表示所測稚幼參的最終體長（μm）；L1：表示所測稚幼參的初始體長（μm）；T：表示稚幼參的生長時間（d）。

大耳幼體成活率計算方法：大耳幼體成活率=p1/p2×100%

其中：p1為剛開始出現(xiàn)樽形幼體時水中浮游刺參幼體密度；p2為原有刺參幼體密度。

2結(jié)果

2.1各處理組幼體體長日增長率比較

各處理組刺參幼體在整個實驗過程中均表現(xiàn)出了顯著的生長（圖1）。各處理組經(jīng)8 d的培育，生長最快的處理組為組C（干酵母+微綠球藻干粉），由430 μm生長到910 μm，體長日增長率為59.25%。最慢的處理組為組B(冷凍藻濃縮液)，由420 μm生長到680 μm，體長日增長率為39.50%。

圖1不同餌料條件下刺參幼體體長日增長率

2.2各處理組大耳幼體成活率比較

由于各處理組生長發(fā)育快慢的差異，大耳幼體成活率分別在不同時間進(jìn)行計算，結(jié)果見圖2。由圖2可以看出處理組C（酵母+藻粉）效果最好，成活率高達(dá)96.5%，處理組B（冷凍藻）成活率最低，為45.6%。

圖2不同餌料條件下大耳幼體成活率

2.3各處理組變態(tài)率的比較

實驗的四個不同處理組不僅生長速率及成活率存在差異，其樽形幼體變態(tài)率也有顯著差異（見圖3），生長最快的處理組C（酵母+干藻粉）在培養(yǎng)到第7 d就已經(jīng)開始出現(xiàn)樽形幼體，2 d后全部變態(tài)；生長最慢的處理組B（冷凍藻液）不僅在培育到第10 d才開始出現(xiàn)樽形幼體，而且12 d后仍有多數(shù)幼體未變態(tài)，停留在大耳幼體期直至死亡。

圖3不同餌料條件下樽形幼體變態(tài)率

2.4各處理組生長發(fā)育情況比較

實驗從7月5日開始投喂餌料，第1 d投喂餌料之后觀察各處理組幼體攝食情況，從圖4可以看出，各處理組幼體發(fā)育情況無顯著差異，胃型較飽滿，攝食情況良好。第6天觀察各處理組幼體發(fā)育情況（見圖5），從圖中可以看出處理組C大耳幼體胃型飽滿，個體較大，并開始出現(xiàn)樽形幼體。而處理組B中刺參幼體個體小，且出現(xiàn)胃縮小及爛胃現(xiàn)象，有一部分停留在小耳幼體階段，未出現(xiàn)樽形幼體。處理組A和處理組D發(fā)育情況良好，與處理組C相比，僅在幼體密度及個體大小上稍有差異?！糉L)〗〖TP<25.tif>,BP〗

圖4投餌第一天，不同處理組幼體生長發(fā)育情況

圖5投餌第六天，不同處理組幼體生長發(fā)育情況

3討論

實驗結(jié)果表明，以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢；單獨投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長發(fā)育的營養(yǎng)需求，但生長相對緩慢，成活率及變態(tài)率相對較低。另外，單獨投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低，且在培育后期損失過半，在培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)“爛胃”、“胃萎縮”等現(xiàn)象，后期幼體出現(xiàn)“化邊”、“爛邊”等。

由以上結(jié)果可以看出，微綠球藻雖為綠藻，但其細(xì)胞壁薄，且具較好的上浮性，個體?。?～4 μm），易于攝食，富含多種不飽和脂肪酸等生物活性物質(zhì)，可以作為刺參幼參的餌料之一，較硅藻或金藻等常用餌料，微綠球藻具有易培養(yǎng)、生長快、抗污染等優(yōu)點，單獨投喂新鮮藻液基本可以滿足幼體的需求，達(dá)到較好的育苗效果。如果采用微綠球藻干藻粉與干酵母混合投喂，由于酵母可以彌補微藻中氨基酸、消化酶和生長激素等營養(yǎng)缺陷，因此可以更好地滿足幼體的營養(yǎng)需求，本實驗結(jié)果也證明了這一點。

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