COX-2與Fax、Ki-67在宮頸癌中表達(dá)的臨床意義

董靜茹 李麗 潘龍

COX-2與Fax、Ki-67在宮頸癌中表達(dá)的臨床意義

董靜茹 李麗 潘龍

目的 探討環(huán)氧化酶-2(COX-2)、Fax、Ki-67在宮頸癌中的表達(dá)及其臨床病理意義。方法 采用免疫組織化學(xué)染色的方法, 檢測(cè)宮頸癌(cervical cancer, CC)40例, 宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasm, CIN)10例及正常宮頸組織(normal cervical epithelium, NCE)9例中COX-2、Fax、Ki-67的抗體表達(dá)的情況。結(jié)果 COX-2在宮頸癌中的表達(dá)率為70%~90%, 而在正常宮頸組織及宮頸上皮內(nèi)瘤變中表達(dá)率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。Fax在宮頸癌中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織(P＜0.05)；Ki-67在宮頸癌、CIN與正常宮頸組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 COX-2、Fax、Ki-67在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中有著重要作用 , 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。

環(huán)氧化酶-2；Fax；Ki-67；宮頸癌；免疫組織化學(xué)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

作者采用免疫組化方法檢測(cè)COX-2與Fax、Ki-67在宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)及正常宮頸組織中的表達(dá), 探討它們異常表達(dá)與宮頸癌的增殖、分化、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集南陽(yáng)地區(qū)2008~2013年手術(shù)切除標(biāo)本,所有標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí), 且術(shù)前未經(jīng)過(guò)任何治療。宮頸癌40例, 宮頸上皮內(nèi)瘤變10例；正常宮頸組織9例?；颊甙l(fā)病年齡28~72歲, 平均年齡(47.6±10.6)歲, 40例宮頸癌中鱗狀細(xì)胞癌35例, 腺癌5例；高分化13例, 中分化20例, 低分化7例；臨床分期：Ⅰ期11例, Ⅱ期21例, Ⅲ期8例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例。

1. 2 方法 標(biāo)本經(jīng)4%甲醛固定, 石蠟包埋, 連續(xù)切片, 厚度0.4 μm, 免疫組化方法參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。試劑均購(gòu)自福建邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司。

1. 3 結(jié)果判定 COX-2染色陽(yáng)性為在細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒, Fax染色陽(yáng)性為在細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色顆粒, Ki-67染色陽(yáng)性為在細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒。按切片中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的比例劃分, 無(wú)明確陽(yáng)性為“-”；陽(yáng)性細(xì)胞<10%為“+”；陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)10%~50%為“++”；陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>50%為“+++”。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件和Spearmen相關(guān)分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

COX-2在宮頸癌中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織(P＜0.05), 而在正常宮頸組織與CIN組織之間表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；COX-2陽(yáng)性表達(dá)與病理分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(P＜0.05), 與年齡及病理類型無(wú)關(guān)(P＞0.05), 見(jiàn)表1。

Fax在宮頸癌中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織(P＜0.05), 在正常宮頸組織與CIN組織之間表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；Fax陽(yáng)性表達(dá)與年齡及病理類型、病理分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)(P＞0.05)。

Ki-67在正常宮頸組織中的表達(dá)明顯低于CIN組織和宮頸癌組織(P＜0.05), 在宮頸癌組織中的表達(dá)與COX-2相同。

表1 宮頸癌組織中COX-2、Fax、Ki-67的表達(dá)情況［n(%)］

3 討論

COX-2是前列腺素合成過(guò)程中的重要酶, 也是花生四烯酸代謝的關(guān)鍵限速酶。COX-2的高表達(dá)與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)。Masferre 等［1］研究顯示, 在胃癌中COX-2高表達(dá)者比低表達(dá)者更易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果顯示, COX-2在宮頸癌中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織, 且染色逐漸加深, 說(shuō)明隨著癌變的發(fā)生COX-2的表達(dá)逐漸增強(qiáng), 這與Liu等［2］的研究結(jié)果一致。同時(shí), COX-2在低分化癌中、Ⅲ期及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中表達(dá)明顯增強(qiáng), 說(shuō)明COX-2的高表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。研究也發(fā)現(xiàn)部分標(biāo)本的腫瘤區(qū)域內(nèi), 血管內(nèi)皮細(xì)胞也呈陽(yáng)性染色, 提示COX-2的表達(dá)可能與腫瘤的轉(zhuǎn)移有關(guān)。所以, COX-2與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移關(guān)系密切, 對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤及預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后有一定的意義, 可以作為一種參考指標(biāo)。

Fax被稱為凋亡蛋白1, 與其配體組成Fas系統(tǒng), 再將凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)通過(guò)凋亡途徑使靶細(xì)胞死亡。惡性腫瘤的Fax表達(dá)明顯下降或丟失, 說(shuō)明腫瘤的發(fā)生發(fā)展可能與Fax丟失有關(guān)。曲利娟等［3］研究發(fā)現(xiàn)Fax在結(jié)腸癌中的表達(dá)明顯下降。本研究結(jié)果表明隨著正常宮頸→CIN→宮頸癌的轉(zhuǎn)化, Fax的陽(yáng)性表達(dá)呈下降趨勢(shì), 說(shuō)明Fax系統(tǒng)在細(xì)胞凋亡中的作用減低, 使得腫瘤逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視。而在宮頸癌的臨床分期和病理分級(jí)中Fax的陽(yáng)性表達(dá)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。且Fax與COX-2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān), 說(shuō)明Fax在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中不是一個(gè)早期事件, 其發(fā)生可能是宮頸癌已經(jīng)形成的后期事件。COX-2可能通過(guò)調(diào)節(jié)抗細(xì)胞凋亡基因bcl-2的表達(dá)抑制凋亡基因Fax的表達(dá), 深入研究相關(guān)機(jī)制, 對(duì)宮頸癌病情監(jiān)測(cè)、轉(zhuǎn)移潛能等有潛在價(jià)值。

Ki-67是一種DNA結(jié)合蛋白, 它存在于增殖細(xì)胞中, 參與驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期的調(diào)控, 在除G0期之外的有絲分裂細(xì)胞周期中表達(dá), 它可以識(shí)別生長(zhǎng)中的正常和腫瘤細(xì)胞, 而對(duì)靜止期的細(xì)胞無(wú)作用。本實(shí)驗(yàn)中, Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)從宮頸CIN階段就已開(kāi)始, 并且隨著進(jìn)一步發(fā)展為宮頸癌, Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)率逐漸上升, 且核染色呈棕色。提示細(xì)胞增殖活性的改變與癌變的過(guò)程相關(guān)。Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)也與臨床分期、病理分級(jí)呈正相關(guān), 與靳玉蘭等［4］的研究結(jié)果相一致。在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中, Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)明顯增高, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, 說(shuō)明腫瘤細(xì)胞增殖水平可能反映了腫瘤的惡性程度［5］。

綜上所述, 根據(jù)COX-2與Fax、Ki-67三者的聯(lián)合應(yīng)用,在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中有著重要作用 , 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。

［1］ Masferre JL , Leahy KM, Koki AT, et al. Antiangiogenic and antitumor activities of cyclooxygenase-2 inhibitors. Cancer Res, 2000, 60(5):1306.

［2］ Liu CH, Chang SH, Narko K, et al. Overexpression of cyc looxygenase -2 is sufficient to induce tumorigenesis in transgenic mice. J Biol Chem, 2001, 276(21):18563-18569.

［3］ 曲利娟, 余英豪, 談景旺, 等.大腸癌組織中Fas/FasL系統(tǒng)、nm23表達(dá)與轉(zhuǎn)移的關(guān)系.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2002，18(2): 153-155.

［4］ 靳玉蘭, 張偉, 劉伯齊, 等. 食管癌前病變及原位癌組織中Ki-67、P53、iNOS的異常表達(dá).中華腫瘤雜志, 2001, 23(2): 129.

［5］ 謝麗, 安瑞芳. Ki-67在婦科腫瘤中的研究與應(yīng)用.國(guó)外醫(yī)學(xué)：婦幼保健分冊(cè), 2004, 15(6):391-392.

Clinical significance of expressions of COX-2, Fax and Ki-67 in cervical cancer

DONG Jing-ru, LI Li, PAN Long.
Department of Pathology, Henan Xixia County People’s Hospital, Nanyang 474500, China

Objective To explore the expressions of cyclooxygenase-2 (COX-2), Fax and Ki-67 in cervical cancer, and their clinical pathological significance. Methods Immunohistochemical staining was applied to examine the antibody expressions of COX-2, Fax and Ki-67 in 40 cases with cervical cancer (CC), 10 cases with cervical intraepithelial neoplasm (CIN), and 9 cases with normal cervical epithelium (NCE). Results The expression rate of COX-2 in CC was 70%~90%, while its expression rate had no statistically significant difference between NCE and CIN (P>0.05). The positive expression rate of FAX was obviously lower in the CC than NCE and CIN (P<0.05). The difference of expression of Ki-67 between CC, CIN and NCE had statistical significance (P<0.05). Conclusion COX-2, Fax and Ki-67 play important roles in the development and progress of cervical cancer, and lymphatic metastasis, and they can act as the biological indicators for judging grade malignancy of cervical cancer and lymphatic metastasis.

Cyclooxygenase-2; Fax; Ki-67; Cervical cancer; Immunohistochemistry; Lymphatic metastasis

2014-08-26］

474500 河南省西峽縣人民醫(yī)院病理科