不同組織學(xué)類型膀胱癌組織中HER2蛋白的表達

胡文暉，郝 斌#，李惠翔，張志臣

1)鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院泌尿外科 鄭州 450014 2)鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科 鄭州 450052

不同組織學(xué)類型膀胱癌組織中HER2蛋白的表達

胡文暉1)，郝 斌1)#，李惠翔2)，張志臣1)

1)鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院泌尿外科 鄭州 450014 2)鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科 鄭州 450052

#通訊作者,男,1956年11月生,博士,教授,主任醫(yī)師,研究方向:泌尿外科疾病基礎(chǔ)與臨床,E-mail:binhao68@hotmail.com

膀胱腫瘤；HER2蛋白

目的：探討不同組織學(xué)類型膀胱癌組織中HER2蛋白的表達及意義。方法采用免疫組化法檢測73例不同組織學(xué)類型的膀胱癌組織中HER2蛋白的表達水平及其與臨床分期、病理分級之間的關(guān)系。結(jié)果HER2蛋白在膀胱鱗狀細胞癌(鱗癌)、腺癌和尿路上皮細胞癌組織的陽性表達率分別為88.9%(16/18)、88.2%(15/17)和57.9%(22/38)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.016)，鱗癌和腺癌兩者之間的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.999)，尿路上皮細胞癌組織中HER2的陽性表達率低于鱗癌和腺癌 (χ2=8.620，P=0.003)；膀胱癌組織中HER2蛋白的表達與患者的性別、年齡、腫瘤大小無關(guān)(P>0.05)，而與腫瘤TNM分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(χ2=7.980，11.559，11.934，P<0.05)。結(jié)論HER2蛋白可以作為鑒別不同組織學(xué)類型膀胱癌的潛在指標(biāo)，并與膀胱癌的增殖、浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

膀胱癌作為常見的惡性腫瘤，發(fā)病率及死亡率均居泌尿系統(tǒng)腫瘤的首位，其組織學(xué)類型以尿路上皮細胞癌最常見，鱗狀細胞癌(鱗癌)與腺癌僅占5%左右。不同人群的膀胱癌組織學(xué)類型不同，在大多數(shù)國家中，以尿路上皮細胞癌為主，占90%以上，而非洲國家則以血吸蟲感染所致的鱗癌為主，如在埃及，鱗癌約占膀胱癌的75%[1]。近年來，HER2蛋白作為判斷一些腫瘤進展、預(yù)后的指標(biāo)，受到廣泛關(guān)注。國外學(xué)者[2]對HER2基因及其蛋白表達與膀胱癌的關(guān)系進行了研究，發(fā)現(xiàn)HER2蛋白在膀胱尿路上皮細胞癌組織中高表達，尤其在低分化和浸潤性膀胱癌組織中。目前，國內(nèi)的相關(guān)研究也主要集中在尿路上皮細胞癌。作者對不同組織學(xué)類型的膀胱癌組織中HER2蛋白進行檢測，探討其與膀胱癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來源收集2011年6月至2012年10月鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院泌尿外科及鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科住院的膀胱癌患者73例，術(shù)后病理證實均為原發(fā)性膀胱癌。男47例，女26例，年齡57～69(62.6±5.3)歲。其中尿路上皮細胞癌38例，鱗癌18例，腺癌17例；腫瘤分化程度采用WHO 2004分級：高分化36例，中分化21例，低分化16例；臨床分期采用國際抗癌協(xié)會第7版分期標(biāo)準(zhǔn)：0、Ⅰ期15例，Ⅱ期33例，Ⅲ、Ⅳ期25例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例。

1.2HER2蛋白表達的免疫組化檢測及結(jié)果判定

兔抗人HER2多克隆抗體購自Biolegend公司，SP9000試劑盒、抗原修復(fù)液和DAB顯色試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。 所有石蠟包埋標(biāo)本連續(xù)4 μm切片，進行SP免疫組化染色，具體操作步驟嚴格按試劑盒說明書操作。以已知陽性切片作陽性對照(試劑公司提供)，以PBS代替一抗作陰性對照。HER2蛋白表達定位于細胞膜，或伴有部分細胞質(zhì)著色，僅胞質(zhì)著色為非特異染色。結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：①按陽性細胞數(shù)計分，在高倍鏡下選5個視野，共計數(shù)200個細胞，陽性細胞數(shù)<5%計為1分，5%～計為2分，25%～計為3分，50%～計為4分，≥75%計為5分。②按染色強弱分級，無染色計為0分，弱染色(淡黃)計為1分，中等強度染色(黃棕)計為2分，強陽性染色(棕色)計為3分。上述兩種評分之和≥5分為陽性，<5分為陰性。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 17.0進行分析，應(yīng)用χ2檢驗比較不同組織學(xué)類型膀胱癌組織中HER2蛋白表達的差異以及膀胱癌組織中HER2蛋白表達與臨床病理參數(shù)的關(guān)系，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1不同組織學(xué)類型膀胱癌組織中HER2蛋白的表達見圖1。HER2蛋白在尿路上皮細胞癌、鱗癌和腺癌組織中的陽性表達率分別為57.9%(22/38)、88.9%(16/18)、88.2%(15/17)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.016)，在鱗癌與腺癌組織中HER2蛋白陽性表達率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.999)。尿路上皮細胞癌中HER2蛋白陽性表達率低于鱗癌和腺癌(χ2=8.620，P=0.003)。

2.2膀胱癌組織中HER2蛋白表達與臨床病理參數(shù)的關(guān)系見表1。膀胱癌組織中HER2蛋白的表達與患者的性別、年齡及腫瘤大小無關(guān)(P>0.05)，而與TNM分期、腫瘤分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。

表1 HER2蛋白表達與膀胱癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3 討論

HER2為人類表皮生長因子受體( human epidermal growth factor receptor,EGFR)家族的第2個成員，也稱為C-erbB-2基因，其編碼產(chǎn)物為具有酪氨酸酶活性的細胞跨膜糖蛋白，參與細胞生長、分化的調(diào)節(jié)。在正常情況下HER2處于非激活狀態(tài)，當(dāng)受到某些致癌因素作用后，主要以基因擴增和過度表達的形式被激活，轉(zhuǎn)化為活化的癌基因，通過和EGFR之間的協(xié)同作用形成同源或異源二聚體，使ATP能更容易與受體分子結(jié)合，激活受體并作用于細胞核，使細胞增殖，抑制腫瘤細胞凋亡；上調(diào)血管內(nèi)皮生長因子和血管通透性因子的表達，促進腫瘤新生血管生成，增強腫瘤細胞的侵襲能力，導(dǎo)致腫瘤細胞的過度增殖、浸潤或轉(zhuǎn)移[3-4]。

HER2基因的激活可使其蛋白表達增多,因此檢測HER2蛋白的表達可間接反映基因狀態(tài)。文獻[5-7]表明HER2在乳癌、胃癌、子宮內(nèi)膜癌、肝癌中均存在擴增和過度表達。在對不同組織學(xué)類型膀胱癌的研究[8-10]中發(fā)現(xiàn)，尿路上皮細胞癌中HER2蛋白陽性表達率為26%～80%，該實驗結(jié)果為57.9%。

針對膀胱鱗癌、腺癌的研究較少，國外在對血吸蟲所致的膀胱鱗癌的研究中發(fā)現(xiàn)，HER2蛋白在鱗癌組織中高表達[11]。該研究發(fā)現(xiàn)HER2蛋白在鱗癌和腺癌組織中陽性表達率分別為88.9%、88.2%，且HER2蛋白在尿路上皮細胞癌中的表達低于鱗癌及腺癌，而在鱗癌和腺癌兩者之間的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義，提示檢測HER2蛋白的表達可作為鑒別不同組織學(xué)類型膀胱癌的潛在指標(biāo)，另外HER2蛋白在鱗癌和腺癌組織中高表達，可能是兩者浸潤、轉(zhuǎn)移潛能強的原因之一。

大量研究證實HER2的過表達與腫瘤的組織分化、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及生存率有一定相關(guān)性：Prati等[12]研究表明在乳癌中HER2蛋白的過表達與組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，與腫瘤大小、臨床分期無關(guān)；王辛等[13]發(fā)現(xiàn)乳癌的高腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與HER高表達呈正相關(guān)；張紅燕等[14]在研究不同分子亞型的浸潤性乳癌臨床病理特征中發(fā)現(xiàn)HER2陽性病例均為浸潤性癌。該研究發(fā)現(xiàn)，TNM分期、分化程度及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與HER2蛋白的陽性表達有關(guān)，即隨著膀胱癌惡性程度的增加和浸潤深度的增加，HER2蛋白的陽性表達率增加。

總之，HER2蛋白可以作為鑒別不同組織學(xué)類型膀胱癌的潛在指標(biāo)，并與膀胱癌的增殖、浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

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(2013-05-03 收稿 責(zé)任編輯 趙秋民)

Expression of HER2 protein in different histological types of bladder cancer

HUWenhui1)，HAOBin1)，LIHuixiang2)，ZHANGZhichen1)

1)DepartmentofUrology，theSecondAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450014 2)DepartmentofPathology，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052

bladder neoplasm；HER2 protein

Aim: To explore the expression and the significance of HER2 protein in different histological types of bladder cancers．Methods: The immunohistochemistry SP method was used to detect the expression of HER2 protein in 73 cases of different histological types of bladder cancers．Results: The positive expression rate of HER2 protein was 88.9%(16/18) in squamous cell cancer，88.2%(15/17) in adenocarcinoma and 57.9%(22/38) in urothelial cell carcinoma, there were statistical differences(P=0.016), there was no significant difference between squamous cell carcinoma and adenocarcinoma (P>0.999). The positive expression rate of HER2 in urothelial cell carcinoma were lower than those in squamous cell carcinoma and adenocarcinoma (χ2=8.620，P=0.003).The expression of HER2 protein in bladder cancer was not correlated with patient’s gender, age or tumor size(P>0.05),but correlated with the tumor TNM stage,differentiation degree and lymph node metastasis (χ2=7.980，11.559，11.934，P<0.05).Conclusion: HER2 protein can be used as potential indicators identifing different histological types of bladder cancer and closely related with bladder cancer’s proliferation, invasion and metastasis.

R737.14

10.3969/j.issn.1671-6825.2014.01.027