急性主動脈夾層患者血漿細(xì)胞因子及內(nèi)毒素水平測定*

李 明，法憲恩，楊景學(xué)，趙根尚，王宏山，黃真鋒

鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管外科 鄭州 450014

急性主動脈夾層患者血漿細(xì)胞因子及內(nèi)毒素水平測定*

李 明，法憲恩#，楊景學(xué)，趙根尚，王宏山，黃真鋒

鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管外科 鄭州 450014

#通訊作者，男，1962年8月生，博士，主任醫(yī)師，研究方向：心血管外科，E-mail：faxianen@163.com

急性主動脈夾層；全身炎性反應(yīng)綜合征；細(xì)胞因子；內(nèi)毒素

目的：探討急性主動脈夾層患者血漿細(xì)胞因子及內(nèi)毒素水平的變化及其與疾病預(yù)后的關(guān)系。方法選取鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管外科2005年1月至2012年12月收治的急性主動脈夾層患者85例，入院后均行急診手術(shù)治療。根據(jù)預(yù)后分為死亡組(16例)和生存組(69例)。分別于入院時(T1)、入院后12 h(T2)、入院后24 h(T3)取患者血液分離血漿，測定血漿中IL-6、IL-10、TNF-α及內(nèi)毒素水平。結(jié)果與生存組比較，死亡組IL-6、TNF-α、內(nèi)毒素水平在各時間點均增高(F組間=3.914、5.973、9.156，P均<0.05)；生存組與死亡組內(nèi)各時間點IL-6、TNF-α、內(nèi)毒素水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(F時間=5.135、11.548、8.875，P均<0.05)，且與T1比較，生存組T3的IL-6、TNF-α水平，死亡組T2的IL-6水平，死亡組T3的IL-6、TNF-α、內(nèi)毒素水平均升高(P均<0.05)。2組間IL-10水平比較及組內(nèi)各時間點間比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(F組間=1.674，F(xiàn)時間=2.901，P均>0.05)。結(jié)論急性主動脈夾層病情進展迅速， IL-6、TNF-α及內(nèi)毒素水平的急劇增加可能提示患者預(yù)后不佳。

急性主動脈夾層病情進展迅速，病死率高，疾病發(fā)展過程中時常伴有嚴(yán)重的全身炎性反應(yīng)綜合征 (systemic inflammatory response syndrome，SIRS)，甚至造成多器官功能不全綜合征(multiple organ dysfunction syndrome, MODS)[1]。該研究比較了急診手術(shù)后不同預(yù)后急性動脈夾層患者術(shù)前血漿細(xì)胞因子及內(nèi)毒素水平的變化，探討二者對預(yù)后判斷的作用。

1 對象與方法

1.1研究對象研究對象為鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管外科2005年1月至2012年12月收治的急性主動脈夾層患者，排除術(shù)前死亡者，共選取入院后順利進行急診手術(shù)者85例，其中男51例，女34例；年齡35～67歲；發(fā)病至急診手術(shù)時間18～43 h。根據(jù)手術(shù)后預(yù)后分為生存組(69例)及死亡組(16例)。2組患者發(fā)病至入院時間、年齡、性別構(gòu)成、入院時收縮壓及舒張壓相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

表1 生存組與死亡組患者一般情況比較

1 mmHg=0.133 kPa。

1.2 2組患者血漿IL-6、IL-10及TNF-α水平的測定所有患者分別于入院時(T1)、入院后12 h(T2)、入院后24 h(T3)抽取血液，分離血漿備用。采用ELISA法進行IL-6、IL-10及TNF-α水平的測定，試劑盒均由上海西唐生物科技有限公司提供。主要步驟：在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中分別加入生物素標(biāo)記液，孵育反應(yīng)，洗板機清洗。在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入酶標(biāo)記液，孵育反應(yīng)，再次洗板機清洗。每孔加入底物液，37 ℃下避光孵育。加入終止液，終止反應(yīng)。上酶標(biāo)儀于450 nm處讀取各孔的吸光度值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找樣品對應(yīng)的水平。

1.3 2組患者血漿內(nèi)毒素水平的測定采用鱟試劑盒(北京金山川公司)進行血漿中內(nèi)毒素水平的測定。主要步驟：吸取抗凝血漿，水浴、振蕩，取其上清液，加入緩沖液，然后加入鱟試劑，水浴后依次加入亞硝酸鈉、氨基硫磺胺、萘乙二胺，在721分光光度比色儀上進行比色，根據(jù)吸光度值查對內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到血漿內(nèi)毒素水平。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS 11.5進行統(tǒng)計分析，2組患者血漿細(xì)胞因子及內(nèi)毒素水平的比較采用重復(fù)測量數(shù)據(jù)的方差分析，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2組患者血漿細(xì)胞因子及內(nèi)毒素水平見表2。由表2可知，與生存組比較，死亡組IL-6、TNF-α、內(nèi)毒素水平在各時間點均增高；生存組與死亡組內(nèi)各時間點IL-6、TNF-α、內(nèi)毒素水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，且與T1比較，生存組T3的IL-6、TNF-α水平，死亡組T2的IL-6水平，死亡組T3的IL-6、TNF-α、內(nèi)毒素水平均升高。2組間IL-10水平比較及組內(nèi)各時間點間比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

表2 生存組與死亡組患者血漿IL-6、TNF-α、內(nèi)毒素及IL-10水平比較 mg/L

*：組內(nèi)與T1比較，P<0.05。

3 討論

急性主動脈夾層病情進展迅速,病死率高，發(fā)病后可迅速引起SIRS，甚至造成MODS[1]。急性主動脈夾層可造成真腔及假腔形成，持續(xù)的血流進入假腔，促使假腔向下游發(fā)展。隨著夾層剝離進展，假腔容積不斷增加，壓迫真腔，減少下游器官血液供應(yīng)，導(dǎo)致了包括腸道在內(nèi)的全身性組織缺血[2-3]，造成血漿細(xì)胞因子及內(nèi)毒素水平增加。除假腔占位外，主動脈夾層發(fā)生后引起的應(yīng)激也可能會導(dǎo)致內(nèi)毒素及細(xì)胞因子移位至血液中，促進SIRS的發(fā)生發(fā)展。該研究中作者發(fā)現(xiàn)，不論是死亡組還是生存組，在主動脈夾層發(fā)生后血漿內(nèi)毒素及促炎因子(IL-6、TNF-α)水平均急劇增高，說明主動脈夾層產(chǎn)生后確實存在細(xì)胞因子及內(nèi)毒素的暴發(fā)，從而引起SIRS。

已有的研究表明，損傷[4-5]或者嚴(yán)重的疾病，甚至不潔的操作[6]均可造成細(xì)胞因子及內(nèi)毒素水平的增加，而這些炎性因子水平的變化同時也能反映出患者病情的嚴(yán)重性[7]。連續(xù)測定血液中內(nèi)毒素及炎性因子的水平可以幫助預(yù)測患者預(yù)后，提高醫(yī)師對此類患者的重視，給予早期治療、早期干預(yù)[8]。合適的炎性介質(zhì)不僅可以反映主動脈夾層患者全身炎性反應(yīng)的劇烈程度、炎性介質(zhì)隨時間變化的規(guī)律，還可預(yù)測患者的預(yù)后。近年來，較多文獻報道了急性主動脈夾層患者全身炎性反應(yīng)的變化規(guī)律。Wen等[9]分析了血液炎性介質(zhì)水平與患者預(yù)后的關(guān)系；Nomura等[10]對比了有殘余夾層和無殘余夾層患者血液炎性介質(zhì)水平的差異。上述研究均證實細(xì)胞因子與急性主動脈夾層關(guān)系密切。該實驗發(fā)現(xiàn)，死亡組促炎因子(IL-6、TNF-α)及內(nèi)毒素水平各時間點均高于生存組，而抗炎因子(IL-10)水平2組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明主動脈夾層形成后確實存在內(nèi)毒素及促炎因子的急劇增加，而抗炎因子不能隨著增長從而減弱SIRS，可能是造成患者預(yù)后不佳的原因[11]。及早地干預(yù)促炎因子、增加抗炎因子可能會增加患者的生存率[12-14]?？梢奍L-6、TNF-α及內(nèi)毒素的急劇增加可能提示急性主動脈夾層患者預(yù)后不佳，因此臨床醫(yī)師應(yīng)提高對該類疾病治療的重視。

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(2013-04-14 收稿 責(zé)任編輯 姜春霞)

Detection of cytokines and endotoxin in plasma of patients with acute aortic dissection

LIMing，F(xiàn)AXian’en,YANGJingxue,ZHAOGenshang,WANGHongshan,HUANGZhenfeng

DepartmentofCardiovascularSurgery,theSecondAffiliatedHospital,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450014

acute aortic dissection; systemic inflammatory response syndrome; cytokine; endotoxin

Aim: To identify the relationship between cytokines and endotoxin changes of patients with acute aortic dissection and prognosis. Methods: A total of 85 patients with acute aortic dissection from Department of Cardiovascular Surgery of the Second Affiliated Hospital of Zhengzhou University from January 2005 to December 2012 were divided into death group and survival group according to prognosis. At the time of admission(T1), 12 hours after admission(T2), 24 hours after admission(T3), IL-6, IL-10, TNF-α and endotoxin levels in plasma were measured. Results: Compared with the survival group, the levels of IL-6, TNF-α and endotoxin in the death group at each time point were significantly higher(Fgroup=3.914，5.973，9.156，P<0.05). There were significant differences of IL-6,TNF-α and endotoxin levels among three time points in two groups (Ftime=5.135，11.548，8.875，P<0.05). And compared with T1, IL-6 and TNF-α levels in the survival group at T3, IL-6 level in the death group at T2, IL-6, TNF-α and endotoxin levels in the death group at T3 were significantly higher (P<0.05). There was no significant difference in IL-10 level between two groups and among three time points (Fgroup=1.674，F(xiàn)time=2.901,P>0.05).Conclusion: Acute aortic dissection progresses rapidly, and dramatic increase of IL-6, TNF-α and endotoxin may indicate poor prognosis.

*河南省衛(wèi)生科技創(chuàng)新人才工程項目 20100120；河南省醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)技術(shù)帶頭人出國培訓(xùn)計劃項目 201201053

R654.3

10.3969/j.issn.1671-6825.2014.01.022