剛果紅染色在臨床病理診斷中的應(yīng)用價(jià)值

李玉蓮，袁宏偉，徐曉艷*

(1內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)教研室，呼和浩特 010059;2內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科;*通訊作者，E－mail:xxy_patho@163.com)

在病理技術(shù)飛躍發(fā)展的今天，因免疫組織化學(xué)技術(shù)及原位雜交技術(shù)在腫瘤病理診斷中有較大作用，但它們?nèi)杂幸欢ǖ木窒扌?。而常用的特殊染色及組織化學(xué)技術(shù)操作簡(jiǎn)便，結(jié)果穩(wěn)定，可彌補(bǔ)上述病理技術(shù)的不足，并能廣泛用于臨床病理診斷，而且處于不斷發(fā)展和完善中［1－3］。本文收集30例HE染色下有均質(zhì)粉染區(qū)域的標(biāo)本進(jìn)行特殊組織化學(xué)染色—?jiǎng)偣t實(shí)驗(yàn)觀察，以探討該技術(shù)在日常病理診斷及科研工作中的應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本 30例標(biāo)本包括10例聲帶息肉、10例甲狀腺髓樣癌、10例淀粉樣變腎小球腎炎。標(biāo)本來自本院2009－2012年間住院存檔的病理標(biāo)本。

1.1.2 儀器 全封閉式組織處理機(jī)、包埋機(jī)、石蠟切片機(jī)。

1.1.3 試劑 10%中性福爾馬林、梯度酒精、二甲苯、石蠟(58－60℃)、明礬蘇木素、氫氧化鉀酒精分化液(氫氧化鉀0.2 g，80%100 ml)、剛果紅染液(剛果紅0.5 g，50%酒精100 ml溶解即成)。

1.2 方法

30例標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林固定，石蠟切片，HE染色及特殊組織化學(xué)剛果紅染色。

剛果紅染色方法:①石蠟切片3－4μm，切片脫蠟至水洗;②剛果紅染液5 min;③直接用氫氧化鉀酒精分化液沖洗3－10 s，至無多余染液流出為止;④自來水洗終止分化，剛果紅染色結(jié)果為紅色或磚紅色;⑤進(jìn)明礬蘇木素染細(xì)胞核5 mis;⑥自來水洗，常法分化，返藍(lán);⑦各級(jí)酒精脫水(80%、95%酒精Ⅰ、Ⅱ各脫水5 min，無水乙醇Ⅰ、Ⅱ各脫水5 min)，二甲苯Ⅰ、Ⅱ各透明5 min，最后中性樹膠封固。

2 結(jié)果

伴有淀粉樣變性的聲帶息肉在光鏡HE染色下，淀粉樣變性區(qū)域呈現(xiàn)均質(zhì)粉染云霧狀或搓衣板樣(見圖1A，見第670頁)，為無定形嗜酸性蛋白質(zhì)性物質(zhì)沉積所造成的，HE染色下很難與玻璃樣變性鑒別。通過剛果紅染色，淀粉樣變性區(qū)域呈紅色或磚紅色(見圖1B，見第670頁)。同樣伴有淀粉樣變性的甲狀腺髓樣癌(見圖2A，見第670頁)，剛果紅染色也呈現(xiàn)陽性反應(yīng)(見圖2B，見第670頁)。淀粉樣變性腎小球腎炎常常在腎小球系膜基質(zhì)及血管基底膜有磚紅色物質(zhì)沉積(見圖3，見第670頁)。

3 討論

淀粉樣變性的染色方法有很多種，如結(jié)晶紫、剛果紅、甲基紫、阿新藍(lán)等［2］。目前，剛果紅染色法是診斷淀粉樣變性最簡(jiǎn)易而有效的方法，在免疫系統(tǒng)疾病或腫瘤疾病的病理診斷中起到關(guān)鍵性的作用，是當(dāng)今病理診斷中的一個(gè)重要鑒別方法。淀粉樣變性的確診需要病理學(xué)檢查出現(xiàn)剛果紅染色陽性，光鏡下觀察呈現(xiàn)紅色或磚紅色，而在偏振光顯微鏡下呈現(xiàn)蘋果綠雙折光［5］。

本文通過對(duì)30例聲帶息肉、甲狀腺髓樣癌、淀粉樣變腎小球腎炎進(jìn)行觀察，證明剛果紅染色在科研及日常病理診斷中的應(yīng)用價(jià)值。剛果紅染色可以從顏色上區(qū)別玻璃樣變性與淀粉樣變性，而HE染色卻達(dá)不到這種效果。聲帶息肉、甲狀腺髓樣癌、淀粉樣變腎小球腎炎這三種疾病有時(shí)在HE染色下會(huì)看到細(xì)胞間質(zhì)或細(xì)胞內(nèi)存在大量均質(zhì)粉染的蛋白質(zhì)樣物質(zhì)的沉積，有時(shí)呈云霧狀，很難判定它是玻璃樣變性還是淀粉樣變性。另外這兩種變性的臨床提示意義不同，玻璃樣變性常常提示疾病的老化退變狀態(tài);而淀粉樣變性在不同疾病中的臨床提示意義有所不同。聲帶息肉淀粉樣變性又稱為淀粉樣瘤［6］，是由于淀粉樣物質(zhì)寄居在喉部而引起的病變，并非真性腫瘤;可能與喉部慢性炎癥，局部血液和淋巴循環(huán)障礙，蛋白質(zhì)代謝紊亂和組織退行性病變有關(guān);也有人認(rèn)為與全身免疫缺陷有關(guān)。聲帶息肉間質(zhì)內(nèi)的淀粉樣變性在HE染色下很容易診斷為玻璃樣變性而被忽略掉，所以遇到此種病例時(shí)，可進(jìn)行剛果紅染色，從而有利于確定病因，提示患者應(yīng)做全身檢查以排除全身系統(tǒng)性淀粉樣變性。另外在甲狀腺髓樣癌的標(biāo)本中常常伴有淀粉樣變性［7］，所以當(dāng)腫瘤細(xì)胞形態(tài)及組織學(xué)結(jié)構(gòu)在診斷髓樣癌不太確定時(shí)，可進(jìn)行剛果紅染色，如發(fā)現(xiàn)剛果紅染色陽性的區(qū)域，便可起到輔助診斷的作用。還有一類疾病，淀粉樣變性則是其病變的主要原因，那就是淀粉樣變腎小球腎炎。該類腎炎常因淀粉樣物質(zhì)沉積在毛細(xì)血管基底膜上，造成毛細(xì)血管基底膜增厚，管腔狹窄而閉合，腎小球被大量淀粉樣物取代，腎小管萎縮。臨床主要表現(xiàn)為蛋白尿、腎病綜合征，后期常引起腎功能不全。此類疾病在電鏡及免疫熒光下也有一定的表現(xiàn)。因?yàn)槟I小球淀粉樣變性會(huì)引起嚴(yán)重后果，另外淀粉樣變性腎小球腎炎在光鏡下HE染色很難辨認(rèn)出是否存在淀粉樣變性，所以對(duì)腎穿標(biāo)本常規(guī)進(jìn)行剛果紅染色，有利于排除由于淀粉樣變性導(dǎo)致的腎小球腎炎。本科室對(duì)腎穿標(biāo)本常規(guī)進(jìn)行剛果紅染色，以排除淀粉樣變性引起的這一類腎病，以便早期診斷，早期給予干預(yù)治療。

綜上所述，剛果紅染色在病理診斷中發(fā)揮了重要的作用。我們?cè)谟闷胀ㄈ旧▽?duì)病變進(jìn)行全面觀察的基礎(chǔ)上，再選用此種染色方法，對(duì)需要顯示區(qū)分或證實(shí)的組織病變成分進(jìn)行觀察和研究具有重要意義，有利于疾病的診斷與鑒別診斷。

［1］曾漢英，于桂臣，劉曉冬.常用特殊染色及組織化學(xué)技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用［J］.吉林醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1999，19(4):78.

［2］胥維勇.現(xiàn)代病理學(xué)技術(shù)條件下特殊染色的應(yīng)用價(jià)值［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2012，19(3):313－314.

［3］王生靈，馬逢春，劉亞平，等.常用特殊染色在病理診斷中的應(yīng)用［J］.蘭后醫(yī)學(xué)，1985，6(2):138.

［4］曾漢英，于桂臣，楊秋佳，等.特殊染色在腫瘤病理組織學(xué)診斷中的應(yīng)用［J］.第四軍醫(yī)大學(xué)吉林軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，24(3):139－140.

［5］朱寅杰，張連華，薄雋杰，等.原發(fā)性膀胱淀粉樣變性1例報(bào)告并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)［J］.臨床泌尿外科雜志，2011，26(6):449－451.

［6］馮勇，奚玲，余曉旭，等.鼻、咽及喉部淀粉樣變12例臨床分析［J］.臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2011，25(24):1115－1117.

［7］陳瑞慧，劉勤江，廖世奇，等.甲狀腺髓樣癌的研究進(jìn)展［J］.甘肅醫(yī)藥，2012，31(5):355－359.