兒茶中兒茶素對肉鴨血清抗氧化指標影響的試驗研究

王文彪，和翀翼，王 爽，于 娜，肖培芳，王艷艷，張鵬宇

（1.天津艾森生物工程有限公司，天津靜海縣天宇科技園5號301609；2.黑龍江省獸醫(yī)科學研究所，黑龍江齊齊哈爾161003）

兒茶（Catechu）為傳統(tǒng)中藥材，中國獸藥典（2010年版二部）[1]收載的兒茶為豆科植物兒茶的去皮枝、干的干燥煎膏，冬季采收枝、干，除去外皮，砍成大塊，加水煎煮，濃縮，干燥制成。具收澀止血、生肌斂瘡之功效，主治潰瘍不收、濕疹、口瘡、跌打損傷、外傷出血，其主要成分為兒茶素及表兒茶素，總量不得少于20.1%。

大量試驗表明[2～4]，兒茶素具有明顯的清除體內(nèi)自由基，阻斷N-亞硝基化合物形成、抑制脂氧化酶活性和脂質(zhì)過氧化物作用，并具防突變，防癌等多種藥理作用。本試驗從兒茶中提取兒茶素，研究了日糧添加兒茶素對櫻桃谷鴨血清抗氧化指標的影響，旨在為臨床安全使用兒茶素奠定理論依據(jù)及試驗基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗藥品與試劑 兒茶購于天津市老百姓大藥房，乙醇、甲醇、二甲基甲酰胺等試劑購于天津市雙慶化工，兒茶素對照品及表兒茶素素對照品購于天津一方科技有限公司，谷胱甘肽過氧化物酶、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、丙二醛試劑盒購自南京建成生物工程研究所有限公司。

1.2 兒茶素的制備 兒茶經(jīng)醇提、減壓濃縮制成兒茶素粗品，硅膠柱層析分離、洗脫后得兒茶素單體，測定兒茶素含量后備用。

1.3 試驗分組及試驗方案 選取180只1日齡櫻桃谷肉仔鴨，隨機分為6組，每組設三個重復，每個重復10只，前14日為預飼期，正式實驗從第14日齡開始進行，具體試驗分組及試驗方案見表1。

表1 試驗分組及試驗方案

第42日隨機抽取每個重復組肉鴨各2只，清晨空腹翼下靜脈采血5ml，編號，傾斜，靜置30min后，以3000r/min離心10min制成血清，在-20℃冰箱保存?zhèn)溆?，進行血清抗氧化指標檢測。

1.4 抗氧化指標測定 谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）按試劑盒方法測定。

1.5 數(shù)據(jù)分析 應用SPSS19.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

2 試驗結果

兒茶素對肉鴨血清抗氧化指標影響試驗結果見表2，從表2可以看出：與試驗Ⅰ組（對照組）相比，各試驗組能明顯提高血清GSH-PX活力及SOD活力，降低血清CAT活力及MDA含量。

試驗Ⅱ組血清GSH-PX活力與其他試驗組差異顯著，其他各試驗組組間差異不顯著；試驗Ⅱ組與試驗Ⅵ組血清SOD活力差異不顯著，試驗Ⅲ組、試驗Ⅳ組與其他各試驗組差異顯著，試驗Ⅲ組與試驗Ⅳ組差異不顯著，試驗Ⅴ組與試驗Ⅵ組差異不顯著；試驗Ⅲ組、試驗Ⅳ組血清CAT活力與其他各試驗組差異顯著，試驗Ⅲ組與試驗Ⅳ組差異不顯著，試驗Ⅱ組與試驗Ⅴ組差異不顯著，其他各試驗組差異顯著；試驗Ⅲ組、試驗Ⅳ組血清MDA含量與其他各組差異顯著，試驗Ⅲ組與試驗Ⅳ組差異不顯著，試驗Ⅱ組、試驗Ⅴ組與試驗Ⅵ組差異不顯著。

表2 兒茶素對肉鴨血清抗氧化指標影響試驗結果(n=6) （單位： U/m l)

綜合以上結果表明：試驗Ⅲ組、試驗Ⅳ組與其他各試驗組相比，能明顯提高血清GSH-PX活力及SOD活力及降低血清CAT活力及MDA含量，優(yōu)于其他各試驗組，且試驗Ⅲ組、試驗Ⅳ組組間差異不顯著。

3 分析與討論

GSH-PX的活性中心是硒半胱氨酸，其活力大小可以反映機體硒水平。硒是GSH-PX酶系的組成成分，它能催化GSH變?yōu)镚SSG，使脂質(zhì)中有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物，從而保護細胞膜的結構及功能不受過氧化物的干擾及損害。本試驗中各試驗組谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）顯著性升高，表明兒茶素能夠提高動物機體的抗氧化能力，且試驗Ⅲ組與試驗Ⅳ組優(yōu)于其他各試驗組。

超氧化物歧化酶（SOD）[5]是一類廣泛分布于組織細胞內(nèi)的金屬酶，用于催化超氧陰離子自由基（O2-）發(fā)生歧化反應，它對平衡機體氧化與抗氧化系統(tǒng)、免除自由基損傷起著至關重要的作用，SOD具有特殊的生理活性，可對抗與阻斷因氧自由基對細胞造成的損害，并及時修復受損細胞。機體抗氧化能力的強弱表明了機體的健康狀態(tài)，抗氧化能力越強，機體越健康。眾多試驗表明，諸如黃芪等中草藥中的多糖、黃酮和皂苷等活性物質(zhì)能通過直接、協(xié)同維生素C兩條途徑發(fā)揮抗氧化作用，清除體內(nèi)自由基，從而提高機體的抗氧化能力[6]。本試驗中各試驗組與試驗Ⅰ組（對照組）差異均顯著，表明添加各抗氧化劑可明顯提高肉鴨血清中SOD的含量，且試驗Ⅲ組與試驗Ⅳ組優(yōu)于其他各試驗組。

過氧化氫（CAT）是一種代謝過程中產(chǎn)生的廢物，它能夠?qū)C體造成損害。為了避免這種損害，過氧化氫必須被快速地轉化為其他無害或毒性較小的物質(zhì)。而過氧化氫酶就是常常被細胞用來催化過氧化氫分解的工具。在機體的抗氧化系統(tǒng)內(nèi)可能存在著某種動態(tài)平衡機制，即作為抗氧化系統(tǒng)的SOD、GSH-PX和CAT在某種狀況下并非同時增加，而是一種機制激活時，另一種可能處于被抑制狀態(tài)[7]。在本試驗中，各試驗組與試驗Ⅰ組（對照組）相比降低了血清中CAT活性，此時CAT活性的降低是有可能的，是符合動物機體生理規(guī)律的。

丙二醛（MDA）中的醛基能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用，并因此形成脂質(zhì)過氧化物。MDA水平的高低還間接地反映了機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度。本試驗中各試驗組與試驗Ⅰ組（對照組）差異均顯著，表明添加各抗氧化劑可明顯降低肉鴨血清中MDA的含量，且試驗Ⅲ組與試驗Ⅳ組優(yōu)于其他各試驗組。

綜合以上試驗結果表明：試驗Ⅲ組、試驗Ⅳ組與其他各試驗組相比，能明顯提高血清GSH-PX活力、SOD活力及降低血清CAT活力、MDA含量，優(yōu)于其他各試驗組，試驗Ⅲ組與試驗Ⅳ組組間差異不顯著，表明中高劑量組均能提高肉鴨血清抗氧化指標，最佳添加量為試驗Ⅲ組（基礎日糧+800mg/kg兒茶素添加組）。

[1]中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典[M].2010年版二部.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2011，13～14.

[2]李大祥，宛曉春，楊昌軍等.茶兒茶素氧化機理[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2006，18：171～181.

[3]趙文紅，鄧澤元，范亞葦?shù)?兒茶素體外抗氧化作用的研究[J].食品科技，2009，34（12）：278～282.

[4]宛曉春，李大祥，夏濤.茶色素及其藥理學功能[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2001,13（4）:65～70.

[5]文貴輝，李麗立，張彬等.白術多糖對櫻桃谷鴨血清生化指標的影響[J].家畜生態(tài)學報，2011，32（3）：45～49.

[6]劉惠芳，周安國.不同水平天然植物提取物對肉鴨外周血抗氧化能力的影響[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2009，21(3)：465～469.

[7]KumimotoF,ogawaR,OgawaR.Inhibition oflipid Per oxidation improve survival rate ofendotoxin?rats[J].Circulatory Shock,1987,21:15～22.