中藥制劑對哺乳仔豬腹瀉及血液生化指標的影響

黃志勇， 黃偉煌

（1.福建省南平出入境檢驗檢疫局，福建南平353000；2.中山比克生物科技有限公司，廣東中山528427）

哺乳仔豬腹瀉是當前眾多豬場的棘手問題，是制約仔豬生長性能的一個重要制約瓶頸，因此對應用中藥制劑來降低仔豬腹瀉的研究意義重大。中獸醫(yī)辨證施治從整體觀念出發(fā)，以平衡陰陽、協(xié)調臟腑功能、健脾消食為治則，采用的方劑多以提高免疫、增強體質為主，對降低仔豬的腹瀉率有一定的作用。中藥對促進仔豬生長發(fā)育的配方主要原則是補脾益氣、消食和胃[1]，以此降低腹瀉率。本研究采用復方中藥制劑作為母豬的飼料添加劑，防治哺乳仔豬腹瀉，并通過對仔豬相關血液生化指標的分析進行效果確定，以期為中藥制劑替代抗生素，生產無藥物殘留、健康生態(tài)的動物食品開辟一條新的用藥途徑。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 長大二元母豬所產的9窩哺乳仔豬，選擇的母豬按照年齡體重胎次相似的原則進行挑選，采取血清所挑選的仔豬也按照體況相似的原則進行。

1.2 試驗藥品與試劑 復方中藥添加劑：主要原料為黃芪、黨參、茯苓、蒼術、龍膽草、魚腥草、半枝蓮、神曲、山楂、柴胡、甘草等[2]。購于福州回春醫(yī)藥公司，按一定的比例配合，烘干，300目粉碎備用。試驗試劑：丙氨酸轉氨酶(ALT)、天門冬氨酸轉氨酶(AST)、丙二醛（MDA） 及超氧化物歧化酶（MDA） 試劑盒，購置南京建成生物試劑盒有限公司；豬瘟抗體檢測試劑盒，IDEXX公司產品。

主要儀器：安科Anke臺式離心機，上海安亭科學儀器廠；電子天平，上海精密儀器儀表公司；恒溫水浴鍋，上海羌強儀器設備有限公司；UV-3200紫外可見分光光度計，上海精密儀器儀表公司；移液槍，Eppendorf；酶標儀及洗板機，美國寶特。

1.3 試驗方法

1.3.1 試驗分組 選擇胎次年齡相同的長大母豬所產的9窩仔豬供試驗，試驗分為中藥制劑試驗組、抗生素對照組和空白對照組,各組采取血清20份，共計60份。

1.3.2 血液指標測定 于斷奶前(未進行豬瘟免疫，22日齡)采集仔豬血清，每頭母豬對應仔豬采集血液，每組采集20份血樣，共計60份。血液采集完畢后，室溫放置2 h，3000r/min離心10min，得高質量血清，4℃保存，按ALT、AST、MDA、SOD試劑盒說明書進行相關指標測定；豬瘟抗體的按IDEXX公司豬瘟抗體檢測試劑盒說明書進行。

表1 腹瀉評分標準

表2 中藥制劑對母豬產仔數(shù)及仔豬增重的影響

表3 中藥制劑對哺乳仔豬的腹瀉率和腹瀉指數(shù)的影響

表4 中藥制劑對仔豬血清中ALT 和AST 活性的影響

表5 中藥制劑對仔豬血清中MDA、 SOD 含量的影響

表6 中藥制劑對仔豬豬瘟抗體的影響

1.3.3 日常操作 試驗組1組為中草藥飼料添加劑與營養(yǎng)性飼料添加劑復合制成的4%母豬預混料，中草藥飼料添加劑按母豬飼料的0.5%添加。試驗組2組為西藥抗菌素桿菌肽鋅與營養(yǎng)性飼料添加劑復合制成的4%母豬預混料。試驗組3組為營養(yǎng)性飼料添加劑復合制成的4%母豬預混料，不含任何抗菌素和其他藥物[3]。

免疫程序按豬場正常免疫程序接種疫苗（7日齡注射肺炎支原體兔化弱毒凍干疫苗；14日齡藍耳病弱毒疫苗、25日齡接種豬瘟細胞苗），7日齡開始補料，試驗期間，自由采食，自由飲水。記錄好每組每天飼料的飼喂量，按公式(1)和(2)進行仔豬腹瀉情況統(tǒng)計。

(1)腹瀉率=∑（腹瀉頭數(shù)×腹瀉天數(shù)） ÷（仔豬頭數(shù)×天數(shù)） ×100%

(2)腹瀉指數(shù)=糞便評分之和÷試驗仔豬頭數(shù)

1.3.4 數(shù)據處理與分析 對數(shù)據結果采用SPSS13.0單因子方差(One-Way ANOVA)分析統(tǒng)計軟件包和Excell軟件統(tǒng)計分析。

2 結果與分析

2.1 復方中藥制劑對仔豬增重的影響 對仔豬增重情況進行統(tǒng)計，并根據公式：平均日增重=(仔豬斷奶窩重-仔豬出生窩重)÷試驗天數(shù)，來計算仔豬平均日增重，結果詳見表2。從表中可知，仔豬平均日增重中藥制劑組、抗生素組與空白對照組差異顯著(P≤0.05)；中藥制劑組與抗生素組差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 中藥制劑對仔豬腹瀉情況的影響 對仔豬的腹瀉情況進行統(tǒng)計，結果見表3。從表3可知，中藥制劑添加組與抗生素組的腹瀉率和腹瀉指數(shù)低于對照組且差異顯著(P≤0.05)；中藥制劑組與抗生素組間差異不顯著，說明中藥制劑對降低哺乳仔豬的腹瀉情況有一定的作用，與使用抗生素作用相當。

2.3 中藥制劑對仔豬血液生化指標的影響

2.3.1 中藥制劑對仔豬血清中ALT和AST活性的影響按試劑盒說明書對仔豬血清進行ALT和AST活性的測定，結果見表4。從表中可知，中藥制劑組與抗生素組的ALT和AST活性均低于對照組，且差異顯著（P＜0.05）；其中抗生素組AST活性與對照組差異極顯著（P＜0.01），但中藥制劑組與抗生素組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.3.2 中藥制劑對抗氧化指標MDA、SOD的影響 從表5可知，中藥制劑組與抗生素組的MDA活性均高于對照組，且差異顯著（P＜0.05）；中藥制劑組SOD活性均高于對照組，且差異極顯著（P＜0.05），抗生素組SOD活性與對照組差異顯著（P＜0.05）；但中藥制劑組與抗生素組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.3.3 中藥制劑對仔豬豬瘟抗體的影響 采用IDEXX豬瘟抗體試劑盒對仔豬血清豬瘟抗體進行檢測，按照試劑盒說明，把阻斷率值≥40%判定為陽性，＜40判定為陰性，結果詳見表6。從表中可知，中藥制劑組的陽性率最高，其阻斷率與空白對照組差異顯著（P＜0.05）；從變異系數(shù)（CV） 來看，中藥制劑組的CV值最小，即變幅較小，空白對照組CV值最大，即變幅較大，說明中藥制劑組的哺乳仔豬獲得的母源抗體水平較充足且整齊度較好，對豬群生產的穩(wěn)定有一定的作用。

3 討論

3.1 中草藥飼料添加劑防治仔豬腹瀉的作用原理 本試驗中采用的中草藥飼料添加劑主要作為免疫增強劑，目的在于篩選出能增強免疫作用的中草藥，兼有助消化和調味作用。方中采用的黃芪是最常用的中草藥免疫增強劑、黨參補脾益氣，蒼術燥濕健脾，與黃芪、黨參共顯健補脾胃、保護胃腸道功能的作用；龍膽草、魚腥草、半枝蓮是常用的抗菌增強免疫中草藥，藥理研究證明，半枝蓮對金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌等多種細菌和病毒都有抑制作用[4]；魚腥草除了對京科68-1株病毒有抑制作用以外，還能延緩?？?1株病毒引起的細胞病變，對多種致病菌都有抑制和殺滅作用，甚至在1：40000的濃度時仍有抑菌作用，魚腥草素能提高血清備解素的水平，而血清備解素是一種非特異性免疫因素，是存在于人和動物血清內的一種β 球蛋白，它在補體和鎂離子的參與下，能裂解含有多糖體的革蘭氏陰性桿菌，也能使某些病毒滅活[5]。所以采用魚腥草和半枝蓮在生態(tài)豬養(yǎng)殖中能起免疫殺菌和抗病毒作用。柴胡除了有抗炎、退熱和鎮(zhèn)靜作用外，還具有很強的抗菌、抗病毒作用，實驗證明，柴胡對溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、結核桿菌和鉤端螺旋體有較強的抑制作用，并且對流感病毒、肝炎病毒等都有很強的抑制作用。除此之外，柴胡還有明顯的舒肝利膽降血脂作用。茯苓和山楂是常用的健脾消食藥，也是常用的免疫降血脂中草藥，藥理實驗證明，茯苓還有保肝、促進造血功能和抗菌作用；山楂能健胃消食、活血散瘀、降血壓和降血脂，并且還有調味作用。而且從豬的生理生化檢驗指標可見，其結果與中草藥飼料添加劑的作用機理相符合[6]。中藥制劑添加組與抗生素組的腹瀉率和腹瀉指數(shù)低于對照組且差異顯著(P≤0.05)；中藥制劑組與抗生素組間差異不顯著，說明中藥制劑對降低哺乳仔豬的腹瀉情況有一定的作用，與使用抗生素作用相當。

3.2 中藥制劑對仔豬血液生化指標的影響 丙二醛（MDA） 是機體內氧自由基代謝中產生的脂質過氧化物，MDA的含量與機體抗氧化性能密切相關，是衡量機體脂質氧化程度的一個重要指標[7]；超氧化歧化酶（SOD） 是機體內重要的抗氧化酶，作為活性氧清除劑參與清除體內自由基，在防止機體衰老和生物分子損傷等方面具有重要的作用[8]；在正常情況下，血清中ALT和AST活性值較小，當動物機體發(fā)病或受損傷的組織范圍較大，肝臟損傷、病變，大量ALT和AST滲入血液，使得血液中ALT和AST活性升高[9]。本研究對仔豬血清相關指標測定，得出中藥制劑組與抗生素組的ALT和AST活性均低于對照組，與抗生素組間差異不顯著；中藥制劑組的MDA、SOD活性均高于對照組；與抗生素組間差異不顯著，說明中藥制劑在改善仔豬的血液指標ALT、AST和抗氧化指標MDA、SOD均有一定的效果，而按照中草藥的藥理作用，黃芪本身就是一種雙向調節(jié)劑，。

3.3 中藥制劑對仔豬豬瘟抗體的影響 哺乳仔豬豬瘟抗體水平不合格的主要由以下原因造成的。第一，母源抗體的不足：王波[63]等對仔豬豬瘟抗體消長規(guī)律進行研究，研究發(fā)現(xiàn)仔豬的豬瘟抗體平均效價在1-7日齡基本上是高于母豬的抗體效價的，說明仔豬在1日齡吮乳后對于母源抗體的吸收效率非常高；在7日齡之后，仔豬體內的抗體卻開始逐漸下降，說明此時仔豬已經不能再從母乳中吸收母源抗體進入血液；在14-20日齡，雖然仔豬仍然吮食母乳，但體內豬瘟抗體效價下降最為明顯。第二，傳染病是引起豬免疫抑制的主要原因，傳染病的發(fā)生可使豬對其他病原的易感性增強，甚至有些病毒直接侵襲豬的淋巴器官和免疫細胞，造成豬瘟抗體不合格。第三，種公豬精液的帶毒與母豬的帶毒，通過水平途徑或垂直途徑傳播給仔豬，導致仔豬帶毒，從而使仔豬豬瘟抗體水平不合格。本研究通過對未進行免疫的哺乳仔豬（22日齡） 豬瘟抗體進行檢測，發(fā)現(xiàn)中藥制劑組的豬瘟抗體水平合格率最高，變異系數(shù)最小，推測可能是由于中藥制劑組母豬的泌乳力、母源抗體水平較高；或是因為對哺乳仔豬采食了中藥制劑組，激活免疫細胞，增強了仔豬的免疫功能；或是共同作用導致的。而中草藥黃芪、魚腥草、半枝蓮、黨參、柴胡、甘草本身就是很好的免疫增強劑，這幾年來在動物免疫過程或疫苗應用過程中充當了很重要的免疫佐劑的作用[10]。

4 結論

本研究結果表明復方中藥制劑對降低哺乳仔豬的腹瀉率有一定的效果；同時對血清相關指標測定，得出中藥制劑可以不同程度改善哺乳的血清AST、ALT指標及其抗氧化指標SOD、MDA指標，并且能夠提高豬瘟抗體合格率和整齊度，為中藥制劑逐步替代抗生素提供一條新的途徑。

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