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    鹿角膠對(duì)環(huán)磷酰胺所致血虛模型小鼠的影響

    2014-08-09 08:48:00律廣富曲曉波
    吉林中醫(yī)藥 2014年10期
    關(guān)鍵詞:鹿角膠血虛全血

    李 晶,李 娜,律廣富,楊 擎,越 皓,曲曉波*

    (1.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué) 吉林省人參科學(xué)研究院,長(zhǎng)春 130117;2.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)研發(fā)中心 中藥藥理實(shí)驗(yàn)室,長(zhǎng)春 130117)

    鹿角膠為鹿科動(dòng)物馬鹿(CervuselaphusLinnaeus)或梅花鹿(CervusnipponTemminck)的已骨化的角或鋸茸后翌年春季脫落的角基,經(jīng)水煎煮、濃縮而成的固體膠[1],始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。溫補(bǔ)肝腎,益精養(yǎng)血。古代主要用于虛勞、陽(yáng)痿遺精、胎動(dòng)不安、五勞七傷、面黃肌瘦等證[2]?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明,鹿角膠能夠增加白細(xì)胞,促進(jìn)骨髓恢復(fù),提升化療耐受力作用[3], 并且具有保護(hù)胃黏膜、抗骨質(zhì)疏松癥、提高免疫力等功能[4-5],并且對(duì)成骨細(xì)胞具有保護(hù)作用[6]。本研究采用環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)致小鼠血虛模型,從抗炎和活血角度探討鹿角膠的傳統(tǒng)應(yīng)用,賦予其傳統(tǒng)功效的現(xiàn)代科學(xué)理論,為進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    雄性balb/c小鼠,體質(zhì)量(20±2) g,清潔級(jí),購(gòu)自長(zhǎng)春生物制品研究所有限公司,合格證編號(hào):SCXK-(吉)2011-0003。玉屏風(fēng)膠囊(江蘇吉貝爾藥業(yè)有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字z10980026,批號(hào)130809),鹿角膠(黑龍江神樹(shù)阿膠有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字z23020051),注射用CTX(山西普德藥業(yè)有限股份公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H14023686,規(guī)格0.2 g/每支),PT試劑盒(上海太陽(yáng)生物技術(shù)有限公司,批號(hào)1001133),APTT試劑盒(上海太陽(yáng)生物技術(shù)有限公司,批號(hào)1011043)。JA2003B電子天平(上海越平科學(xué)儀器有限公司),Mindray BC-5300全自動(dòng)細(xì)胞血液分析儀(深圳邁瑞儀器有限公司),Coatron-M4血凝儀(成都貝斯達(dá)儀器有限公司)。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 分組及給藥 將48只雄性小鼠隨機(jī)分為6組,即空白組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組(玉屏風(fēng)膠囊,0.39 g/kg)、高劑量組(4.0 g生藥/kg)、中劑量(2.0 g生藥/kg)、低劑量(1.0 g生藥/kg)。于造模前預(yù)防性給藥7 d,空白組和模型組小鼠給予等體積生理鹽水灌胃,1次/d,20 mL/kg。

    2.2 模型建立 空白組小鼠腹腔注射等體積生理鹽水,其他各組小鼠腹腔注射CTX注射液60 mg/kg,1次/d,連續(xù)3 d。

    2.3 檢測(cè)指標(biāo) 末次給藥后2 h,小鼠眼球取血,部分全血利用全自動(dòng)細(xì)胞血液分析儀進(jìn)行RBC、PLT、WBC、T-LYM的檢測(cè);部分全血3 500 rpm離心10 min,分離血漿,利用全自動(dòng)血凝儀對(duì)PT和APTT進(jìn)行測(cè)定。

    3 結(jié)果

    3.1 鹿角膠對(duì)CTX致血虛小鼠模型血細(xì)胞的影響 與空白組比較,模型組小鼠全血中RBC、PLT、WBC、T-LYM的數(shù)量均下降,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),說(shuō)明模型制備成功;與模型組比較,除鹿角膠低劑量組RBC外,鹿角膠和玉屏風(fēng)膠囊能顯著升高血虛小鼠全血中RBC、PLT、WBC、T-LYM的數(shù)量,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。提示鹿角膠對(duì)血虛小鼠具有預(yù)防炎癥、活血的功能,見(jiàn)表1。

    表1 鹿角膠對(duì)CTX所致血虛模型小鼠全血中WBC、RBC、T-LYM、PLT的影響

    注:與模型組比較,#P<0.05,##P<0.01;與空白組比較,△△P<0.01。

    3.2 鹿角膠對(duì)CTX致血虛小鼠模型對(duì)PT和APTT的影響 與空白組比較,模型組小鼠PT和APTT數(shù)值明顯降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明模型制備成功;與模型組比較,鹿角膠和玉屏風(fēng)膠囊能明顯提高小鼠PT和APTT數(shù)值,其中鹿角膠高劑量組APTT值有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),其余各組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示鹿角膠能夠通過(guò)抗凝血作用來(lái)保護(hù)免疫損傷模型小鼠。

    組 別劑量/(g/kg)PT/(s)APTT/(s)空白組 19.961±1.751 25.690 ±2.572 模型組 18.800±2.011△△19.186 ±1.681△△陽(yáng)性對(duì)照組 0.3916.730±1.290# 21.558 ±1.527# 419.178±2.223# 24.705 ±2.625##鹿角膠組 218.456±1.574# 23.771 ±2.012# 118.506±1.897# 22.810 ±1.634#

    注:與模型組比較,#P<0.05,##P<0.01; 與空白組比較,△△P<0.01

    4 討論

    鹿角膠是鹿角經(jīng)水煎煮,濃縮制成的固體膠,味甘、咸,性溫。歸肝、腎經(jīng)。傳統(tǒng)功效益氣養(yǎng)血、益精填髓、強(qiáng)筋骨、壯陽(yáng)。現(xiàn)代研究表明,血虛會(huì)出現(xiàn)RBC 、PLT、WBC、T-LYM的減少,并且凝血功能障礙,采用現(xiàn)代科學(xué)手段模擬中醫(yī)血虛癥,賦予傳統(tǒng)中藥現(xiàn)代科學(xué)理論,對(duì)于機(jī)制的探討和新藥的開(kāi)發(fā)具有一定的意義。

    CTX為常用的抗腫瘤化療藥物,同時(shí)影響人體的造血功能和免疫功能,對(duì)外周血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞均有殺傷作用,采用CTX損傷小鼠血液系統(tǒng),造成血虛癥候。PLT在血栓形成、止血、炎癥反應(yīng)等過(guò)程中有著重要的作用,WBC聚集、浸潤(rùn),單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的黏附,都受到PLT的影響,可釋放大量炎性介質(zhì),直接參與多種疾病的形成和發(fā)展[7]。WBC和RBC能夠促進(jìn)血小板的凝血活性,當(dāng)機(jī)體RBC大量減少時(shí),會(huì)引起貧血。PT和APTT是反應(yīng)機(jī)體凝血功能的重要指標(biāo)。免疫損傷屬于中醫(yī)氣血不足、肝腎兩虛的病癥。WBC和RBC都是具有免疫功能的細(xì)胞,可吞噬異物產(chǎn)生抗體,抵抗病菌入侵,當(dāng)由于各種理化因素導(dǎo)致的中毒,腫瘤放化療,免疫抑制等時(shí)就會(huì)導(dǎo)致WBC和RBC的數(shù)量明顯下降,T-LYM主要參與細(xì)胞免疫,直接殺傷靶細(xì)胞,釋放淋巴因子,使免疫效應(yīng)增強(qiáng),是炎癥反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞,抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生。

    本實(shí)驗(yàn)采用CTX建立小鼠免疫抑制模型,利用鹿角膠對(duì)模型小鼠進(jìn)行干預(yù),通過(guò)檢測(cè)全血中RBC、PLT、WBC、T-LYM,以及PT和APTT變化,從抗炎和活血兩方面探討了鹿角膠調(diào)節(jié)血虛癥可能的機(jī)制,結(jié)果顯示,鹿角膠可明顯升高血虛小鼠全血中RBC 、PLT、WBC、T-LYM數(shù)量,提高PT和APTT,提示鹿角膠可作為治療腫瘤和改善化療藥物產(chǎn)生血虛癥的輔助用藥,為臨床應(yīng)用提供參考。

    [1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:302.

    [2]李娜,曲曉波,姜宗文,等.動(dòng)物藥整理研究—鹿角膠[J].吉林中醫(yī)藥,2014,34(1):74-76.

    [3]李炯輝,劉瑩.參鹿固元湯治療非小細(xì)胞肺癌同步放化療后白細(xì)胞減少癥 43 例[J].陜西中醫(yī),2013(12):1571-1572.

    [4]蒙海燕,曲曉波,李娜,等.鹿茸及鹿角膠對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥的影響[J].中藥材,2009,32(2):179-182.

    [5]吳靜,余仕龍,王峰,等.鹿角膠對(duì)大鼠胃黏膜保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2007,23(17):2636.

    [6]李娜,曲曉波,李晶,等.鹿角多肽對(duì) H2O2誘導(dǎo) MG63 氧化損傷的保護(hù)作用[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2014,34(10):2783.

    [7]凌霜,卞卡.血小板活化產(chǎn)物與炎癥的關(guān)系研究進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2009,27(4):719-721.

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