支氣管哮喘患者血清IL－6、IL－10及TNF－α的表達(dá)水平及臨床意義

李玉秀 苗英慧

1 河南推拿職業(yè)學(xué)院基礎(chǔ)教學(xué)部實(shí)驗(yàn)室，河南省洛陽(yáng)市 471023； 2 南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校微生物免疫教研室

支氣管哮喘主要是以喘息、氣促、紫紺和呼吸困難為主要癥狀，是一種常見病和多發(fā)病。由于遺傳、環(huán)境、職業(yè)等因素，使該病的發(fā)病率、死亡率呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢(shì)，目前全世界有支氣管哮喘患者約1.5億，其中我國(guó)支氣管哮喘患者就有約2500萬(wàn)，發(fā)病率介于1%～3%，因此可以說支氣管哮喘已成為威脅人類健康的主要的慢性呼吸系統(tǒng)疾病?，F(xiàn)在對(duì)于支氣管哮喘的發(fā)病機(jī)理，研究的還不是太透徹，但有相關(guān)研究表明［1，2］，其發(fā)病機(jī)理與免疫功能的紊亂有關(guān)，特別是與患者體內(nèi)某些細(xì)胞因子的過度表達(dá)或過低表達(dá)有密切的關(guān)系。本研究通過觀察哮喘發(fā)作期和恢復(fù)期患者血清中IL－6、IL－10和 TNF－α水平的變化，來(lái)分析這三種細(xì)胞因子與哮喘發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性，以便為臨床對(duì)該病的診斷、治療和判斷預(yù)后提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 病例選自2013年3月－2014年1月在南陽(yáng)醫(yī)專第一附屬醫(yī)院呼吸科住院的42例支氣管哮喘患者，且病例確診均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)會(huì)哮喘組的診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］，女18例，男24例，平均年齡（43.6±5.3）歲，患者均排除肺部和其他臟器器質(zhì)性病變，也排除急性感染性疾病，且患病前1個(gè)月不曾應(yīng)用過與調(diào)節(jié)免疫力有關(guān)的藥物。同時(shí)抽取我院38例健康體檢者作為對(duì)照組，其中女17例，男21例，平均年齡（45.2±4.7）歲，對(duì)照組在性別和年齡上與患病組相比，P＞0.05，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 樣本的采集。對(duì)照組、患病發(fā)作期組和恢復(fù)期組均于清晨空腹抽取靜脈血5ml，以3000r／min離心15min，繼而取上清液加入試管中，塞好口，做好標(biāo)記，放入－70℃低溫冰箱中保存待檢，避免反復(fù)凍融，并在有效期內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.2 檢測(cè)方法。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法），對(duì)支氣管哮喘患者哮喘發(fā)作期、恢復(fù)期及對(duì)照組血清中IL－6、IL－10和 TNF－α的水平進(jìn)行檢測(cè)，三種試劑盒均購(gòu)于上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司，操作時(shí)嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，測(cè)得的結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）來(lái)表示，組間的差異采用t檢驗(yàn)，P＜0.01，說明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清中 TNF－α、IL－6、IL－10水平 各組血清中 TNF－α、IL－6、IL－10水平與方差分析結(jié)果，見表1。

表1 各組血清中IL－6、IL－10、TNF－α的水平與方差分析結(jié)果（）

表1 各組血清中IL－6、IL－10、TNF－α的水平與方差分析結(jié)果（）

注：各組在年齡、性別上無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞0.05。

組別 例數(shù) IL－6（ng／L） IL－10（μg／L） TNF－α（μg／L）1.732±0.307哮喘恢復(fù)期組 4265.453±4.51433.473±1.985 1.474±0.251對(duì)照組 3858.742±3.78335.352±2.175 0.683±0.223 F 值 182.874 115.533 169.032 P 值 0.000 0.000哮喘急性發(fā)作期組 4275.372±3.37428.247±2.3720.000

2.2 各組間血清中 TNF－α、IL－6、IL－10水平的比較 從表1可以看出，支氣管哮喘患者在哮喘急性發(fā)作期血清中IL－6、TNF－α的濃度均高于恢復(fù)期和正常對(duì)照組，P＜0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；恢復(fù)期IL－6、TNF－α的濃度比哮喘急性發(fā)作期要低，但與對(duì)照組相比還是有所增高，P＜0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而IL－10在哮喘急性發(fā)作期血清中的濃度卻低于正常對(duì)照組，P＜0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；恢復(fù)期IL－10的濃度比哮喘急性發(fā)作期高，但比正常對(duì)照組低，P＜0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

支氣管哮喘是一種有多種炎癥細(xì)胞、炎癥介質(zhì)與細(xì)胞因子參與的變態(tài)反應(yīng)性疾病，以氣道阻塞、氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性為主要特征。目前對(duì)于哮喘發(fā)病機(jī)理研究的還不太清楚，但有相關(guān)研究證實(shí)血清中細(xì)胞因子IL－6、IL－10和 TNF－α的表達(dá)增加或異常表達(dá)與該病的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系［4］。

IL－6是至今為止發(fā)現(xiàn)的生物學(xué)活性最廣泛的細(xì)胞因子，可以調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，促進(jìn)B細(xì)胞的增殖和分化。IL－6是一種具有抗炎癥和促炎癥雙相作用的多效性細(xì)胞因子，正常的濃度IL－6可促進(jìn)多克隆B細(xì)胞的增殖分化，同時(shí)誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞合成及表達(dá)的IL－2與IL－2R，來(lái)抑制單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等分泌釋放TNF－α等促炎癥細(xì)胞因子，以維持機(jī)體正常的自身免疫功能，但高濃度的IL－6，一方面可以抑制T淋巴細(xì)胞合成及表達(dá)IL－2與IL－2R，致使相關(guān)細(xì)胞分泌釋放促炎因子而加重炎癥反應(yīng)；另一方面能刺激B細(xì)胞而使其功能亢進(jìn)，并通過自身免疫性的反應(yīng)產(chǎn)生自身抗體，導(dǎo)致自身免疫病的發(fā)生，使周圍細(xì)胞和組織出現(xiàn)免疫病理?yè)p傷。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：支氣管哮喘患者在哮喘急性發(fā)作期血清中IL－6的濃度高于正常對(duì)照組（P＜0.01）；恢復(fù)期IL－6的濃度比哮喘急性發(fā)作期要低，但與對(duì)照組相比還是有所增高（P＜0.01）。說明IL－6參與了哮喘的發(fā)病過程，IL－6是重要的促炎性細(xì)胞因子，高濃度的IL－6，能促進(jìn)其他炎性因子的釋放，加重炎癥反應(yīng)；還能促進(jìn)B細(xì)胞增殖分化產(chǎn)生過多的IgE，使肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞釋放大量的生物活性介質(zhì)，來(lái)加重哮喘的發(fā)作。

IL－10主要是由單核－巨噬細(xì)胞和各種亞群的T細(xì)胞合成分泌的一種具有多功能的抑制性細(xì)胞因子，參與了多種疾病的發(fā)病過程，對(duì)疾病的轉(zhuǎn)歸有重要的影響。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：IL－10在哮喘急性發(fā)作期血清中的濃度卻低于正常對(duì)照組（P＜0.01）；恢復(fù)期IL－10的濃度比哮喘急性發(fā)作期要高，但比正常對(duì)照組要低（P＜0.01）。說明IL－10參與了哮喘的發(fā)病過程，IL－10 具有抑制炎癥介質(zhì)IL－6、TNF－α的作用，哮喘發(fā)作時(shí)血清中IL－10的水平降低，其抑制作用也降低，導(dǎo)致IL－6和TNF－α等炎癥介質(zhì)和IgE的過度表達(dá)，這與哮喘的急性發(fā)作有重要的關(guān)系。

TNF－α主要由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，一種促炎性細(xì)胞因子，在免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)和炎癥損傷反應(yīng)中起著重要的作用。它的生物學(xué)活性具有雙重性，一方面它在機(jī)體的免疫防御中有重要的作用，正常的情況下，在人體內(nèi)的活性比較低，但具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和促進(jìn)免疫細(xì)胞增殖分化的生理功能；另一方面它也參與機(jī)體的免疫病理?yè)p傷，如果濃度過高可引起局部炎性反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致多器官受損［5］。TNF－α可以通過刺激內(nèi)皮細(xì)胞、組織內(nèi)巨噬細(xì)胞釋放IL－6、IL－8等炎癥因子，來(lái)加重炎癥反應(yīng)。本研究結(jié)果也表明，支氣管哮喘患者在哮喘急性發(fā)作期血清中TNF－α的濃度高于正常對(duì)照組和恢復(fù)期組（P＜0.01），且發(fā)現(xiàn)哮喘發(fā)作期血清中濃度越高，病情越嚴(yán)重，說明TNF－α濃度的變化與哮喘病的進(jìn)展有密切的關(guān)系。

綜上所述，細(xì)胞因子IL－6、IL－10和 TNF－α是支氣管哮喘發(fā)病過程中主要的調(diào)節(jié)性炎癥介質(zhì)，其濃度的高低直接影響著疾病的轉(zhuǎn)歸，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)其濃度的變化，對(duì)評(píng)價(jià)哮喘的病情和指導(dǎo)臨床治療均有很大幫助。

［1］伏開新，姚加平，李靜，等.支氣管哮喘患兒血清TNF－α、VIP、MTL和GAS檢測(cè)的臨床意義〔J〕.放射免疫學(xué)雜志，2013，26（4）：399－401.

［2］喻昌利，郭艷麗，劉和亮.細(xì)胞因子白細(xì)胞介素－10在哮喘發(fā)病機(jī)制中的作用及其治療效應(yīng)〔J〕.中國(guó)醫(yī)學(xué)前沿雜志，2012，4（11）：45－50.

［3］中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)哮喘學(xué)組.支氣管哮喘防治指南〔J〕.中華結(jié)核和呼吸雜志，2008，31（3）：177－180.

［4］Chung KF.Cytokines in chronic obstructive pulmonary disease〔J〕.Eur Respir J Suppl，2001，34：50s－59s.

［5］楊東亮.危重癥與 TNF－α、IL－6、IL－8和IL－10〔J〕.醫(yī)師進(jìn)修雜志，2004，27（11）：56.