ER、PR、VEGF及WT-1在子宮肌瘤中的表達及分析

張鳳榮，程玲瑗

(甘肅省天水市第一人民醫(yī)院，天水 741000)

子宮肌瘤是女性生殖系統(tǒng)中最常見的一種良性腫瘤，子宮切除是最常見的治療方案。近年來，子宮肌瘤的發(fā)病率不斷增高，但其發(fā)病原因和機制仍然不明確。有學者認為雌激素誘發(fā)并促進子宮肌瘤生長，而孕激素可能是通過增加生長因子或受體來促進肌瘤的生長，因此生長因子在肌瘤中的表達是目前研究的熱點。子宮肌瘤是本地區(qū)高發(fā)疾病，本文通過觀察雌激素受體(estrogen receptor, ER)、孕激素受體(progesterone receptor, PR)、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)及Wilms瘤基因(Wilm’s tumor-suppressor gene, WT-1)在子宮肌瘤中的表達情況，探討本地區(qū)子宮肌瘤的發(fā)病機制和治療措施。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2012年1月至2013年8月于我院手術(shù)切除、病理診斷明確的子宮肌瘤病例686例，排除合并腺肌癥、子宮內(nèi)膜癌、腺瘤樣瘤、卵巢腫瘤、宮頸癌及合并妊娠切除子宮者后，隨機選擇75例手術(shù)前至少3月內(nèi)沒有經(jīng)過任何激素治療的單純子宮肌瘤切除者的病理組織作為病例組，并隨機選擇其中25例子宮肌層組織作為對照組，各切片4張，做ER、PR、VEGF及WT-1標記并比較。

1.2 試劑及方法 所有標本均采用4%的甲醛固定，石蠟包埋、H-E染色。免疫組化采用SP法，切片厚4 μm，各切片4張，高溫修復或酶消化，一抗4℃過夜，以PBS緩沖液代替第一抗體作陰性對照，已知的陽性組織作陽性對照。免疫組化試劑ER、PR、VEGF、WT-1及SP試劑盒購自邁新公司，操作按試劑盒上的要求進行。

1.3 結(jié)果判讀 ER、PR及WT-1陽性表達定位在細胞核，VEGF定位在細胞質(zhì)，以看到棕黃色顆粒分布為陽性，分級方法為:① 選染色均勻有表達的區(qū)域，陽性細胞占視野的多少分級。0：<5%;1級：6%～25%;2級：26%～50%;3級：>50%。②按著色強弱分。0：陰性;1：弱，淡黃色;2：中等，黃色;3：強，棕褐色。①、②相加為判讀結(jié)果：0～2為(-)，3～4為(+)，5～6為(++)。

1.4 統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 18.0軟件進行處理，等級資料采用秩和檢驗進行分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 子宮肌瘤患者在不同年齡段的分布和并發(fā)癥情況 子宮肌瘤患者686例，<40歲患者113例，占16.47%，40～49歲患者454例，占66.18%，圍絕經(jīng)期及絕經(jīng)后(>50歲)患者119例，占17.35%。因子宮內(nèi)膜癌、腺肌病、宮頸癌、卵巢腫瘤等切除者196例，占28.57%，其中宮頸癌25例，合并子宮內(nèi)膜癌15例，合并腺肌病65例，合并腺瘤樣瘤10例，合并妊娠52例，合并卵巢腫瘤28例，合并侵襲性葡萄胎1例；單純子宮肌瘤切除者490例，占71.43%。

2.2 ER、PR、VEGF及WT-1在子宮肌瘤組織中的表達情況 ER、PR、VEGF、WT-1在病例組和對照組中的表達比較見表1，兩組各指標比較差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。

3 討 論

子宮肌瘤是女性生殖道最常見的良性腫瘤，多見于30～50歲婦女，其中40～50歲婦女的發(fā)病率高達51.2%～60.0%[1]。美國的一項資料顯示：77%的子宮切除的標本中發(fā)現(xiàn)有子宮肌瘤[2]。本組資料中，子宮肌瘤以40～49歲占比最高，占66.18%。目前子宮肌瘤的病因和發(fā)病機制仍不確切，依據(jù)其多見于育齡期婦女，妊娠期增大，分娩或絕經(jīng)后肌瘤停止發(fā)育甚至萎縮、消失，可推斷子宮肌瘤具有激素依賴性。有資料顯示，雌、孕激素水平在肌瘤組織中的表達高于正常肌層組織，說明二者在肌瘤的發(fā)生、發(fā)展中起促進作用[3]，本組資料亦顯示ER、PR在肌瘤中高表達，明顯高于周圍肌層組織，尤其是孕激素陽性強度更明顯，這與文獻報道相一致。

表1 ER及PR在子宮肌瘤中的表達情況

研究發(fā)現(xiàn)，雌、孕激素促進肌瘤生長可能是通過生長因子介導，生長因子通過與細胞膜上相應的受體結(jié)合，發(fā)揮其促進有絲分裂及生長的作用[4]。在子宮肌層、子宮內(nèi)膜、肌瘤中均可鑒定出VEGF的存在[5]，VEGF主要作用于血管內(nèi)皮細胞，促進內(nèi)皮增殖、遷移、誘導新生血管的形成，并可顯著水解基底膜，增加微血管的通透性，有支持血管內(nèi)皮細胞生長的作用，而雌激素能增加血管的通透性，孕激素可以通過促進血管生成，達到促進肌瘤生長的目的。本組資料顯示，VEGF在部分肌瘤中陽性表達，說明其具有促進肌瘤生長作用，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義，與文獻報道[6]一致。

胰島素樣生長因子2(IGF-2)、胰島素樣生長因子1受體(IGF-1受體)、表皮生長因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)、Bcl-2和c-myc等基因，在子宮平滑肌瘤的發(fā)生中，通過抑制細胞凋亡或通過子宮平滑肌瘤分泌或旁分泌的方式，促進子宮平滑肌瘤細胞增殖和生長[7]。WT-1基因是1990年在腎的Wilm腫瘤中作為抑癌基因被分離克隆，其染色體位于11P13，而且能與IGF-1、TGF-β、EGF、Bcl-2、C-myc等生長調(diào)控因子及其受體結(jié)合，調(diào)節(jié)這些生長因子的轉(zhuǎn)錄的激活和抑制[8]。我們研究發(fā)現(xiàn)：WT-1在子宮肌層和子宮平滑肌瘤中均過表達，證明子宮肌層和肌瘤中均有WT-1基因的存在，而肌瘤中WT-1的表達與肌層有一定差異，提示W(wǎng)T-1參與了肌瘤的發(fā)生。資料顯示W(wǎng)T-1能與上述調(diào)控因子及其受體結(jié)合，激活或抑制生長因子的轉(zhuǎn)錄，因此我們推測：子宮局部雌、孕激素水平的增高，導致部分生長因子及其受體含量增加，WT-1基因可能以不同的異構(gòu)體形式與以上調(diào)控因子結(jié)合，激活了其轉(zhuǎn)錄作用，導致子宮平滑肌瘤的發(fā)生、發(fā)展。WT-1可以與多種生長因子結(jié)合，而其在女性的胃壁和腸壁的平滑肌組織中均呈陰性，在正常子宮肌壁內(nèi)高表達，提示W(wǎng)T-1過度表達可能與雌、孕激素水平有關(guān)。因此，選擇使用激素拮抗劑，不僅可以有效控制肌瘤的生長，而且可以通過降低或抑制WT-1的表達，抑制上述生長因子，阻止肌瘤生長，甚至使其萎縮、消失；或通過選擇干預位點，進行靶點治療，達到治療子宮平滑肌瘤的目的，為平滑肌瘤的藥物治療提供了理論依據(jù)。

參考文獻

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