白芷提取物對大鼠脾淋巴細(xì)胞免疫抑制作用初探

高凱 黃春林

·短篇論著·

白芷提取物對大鼠脾淋巴細(xì)胞免疫抑制作用初探

高凱 黃春林

目的 探討白芷提取物對地塞米松致大鼠脾淋巴細(xì)胞免疫抑制作用的影響。方法 建立地塞米松致大鼠免疫抑制模型 , 考察白芷提取物對大鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖活性、自然殺傷細(xì)胞 (NK 細(xì)胞 )活性的影響。結(jié)果 白芷提取物 (5.0 g/kg)對刀豆蛋白 A(ConA) 誘導(dǎo)脾淋巴 T 細(xì)胞增殖能力有升高作用 ,但對脂多糖 (LPS)誘導(dǎo)脾淋巴 B 細(xì)胞增殖能力未見明顯影響 , 對脾淋巴細(xì)胞的 NK 細(xì)胞活性也有增強作用。結(jié)論 白芷提取物 (5.0 g/kg)能提高大鼠脾淋巴 T 細(xì)胞和 NK 細(xì)胞的增殖活性。

白芷提取物；脾淋巴細(xì)胞；自然殺生細(xì)胞

在原發(fā)性腎病綜合征的治療方案中 , 長期、大量應(yīng)用糖皮質(zhì)激素將不可避免地出現(xiàn)多種多樣的副作用。白芷提取物中含有甾體類皂苷 , 在化學(xué)結(jié)構(gòu)上與糖皮質(zhì)激素相似。本文旨在研究中藥白芷提取物能否減輕或改善糖皮質(zhì)激素所帶來的免疫抑制作用。

1 材料與儀器

白芷提取物：自制。知柏地黃丸：河南省宛西制藥股份有限公司 , 批號 ：070304。地塞米松磷酸鈉注射液 (DM)：批號 ：070116, 規(guī)格 ：5 mg/ml, 天津藥業(yè)集團新鄭股份有限公司。大鼠購自廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心；高速冷凍離心機：型號 ：3-18K, 美國 Sigma 公司 ；酶標(biāo)儀 ：型號 ：Emax, 美國Molecular Devices。

2 方法

2. 1 動物分組及給藥 選用 SD 大鼠 48 只 , 分成 6 組 , 每組 8 只 ：即空白對照組 (NC)、地塞米松模型對照組 (IC)(0.75 mg/kg)、知柏地黃丸組 (YC)(2.43 g/kg)、白芷提取物高、中、低劑量組 (HD、MD、LD)(5.0、2.5、1.25 g/kg)。除空白對照組外均皮下注射地塞米松注射液進行造模 , 給藥容積 2 ml/kg, NC 組注射等容積的 0.9% 氯化鈉注射液。造模后各試驗組立即灌胃給予預(yù)先設(shè)定的藥物 , 1 次 /d, 連續(xù) 15 d, 給藥容積 10 ml/kg, NC 組、模型組灌胃給予等容積的蒸餾水。

2. 2 脾淋巴細(xì)胞增殖活性測定及 NK 細(xì)胞活性測定 無菌取脾 , 將脾磨碎 , 制成單細(xì)胞懸液。過濾 , 離心 10 min(2000 r/min)。棄上清 , 將細(xì)胞漿彈起 , 裂解紅細(xì)胞后再加入 8 ml Hanks 液 , 2000 r/min 離心 10 min, 棄上清。用胎牛血清培養(yǎng)基制成單細(xì)胞懸液 , 濃度為 1×107cell/ml。以此單淋巴細(xì)胞懸液按照參考文獻［1, 2］方法分別測定脾淋巴細(xì)胞增殖活性和NK細(xì)胞活性。

2. 3 統(tǒng)計學(xué)方法 用 SPSS18.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差 ( x-±s)形式表示 , 實施 t檢驗 ；計數(shù)資料以率 (%)形式表示 , 實施 χ2檢驗。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

白芷提取物 (5.0 g/kg)對 ConA 誘導(dǎo)脾淋巴 T 細(xì)胞增殖能力有升高作用 , 但對 LPS 誘導(dǎo)脾淋巴 B 細(xì)胞增殖能力未見明顯影響 , 對脾淋巴細(xì)胞的 NK 細(xì)胞活性也有增強作用。見表1。

表1 白芷提取物對 SD 大鼠脾淋巴細(xì)胞活性測定及 NK 細(xì)胞活性的影響

表1 白芷提取物對 SD 大鼠脾淋巴細(xì)胞活性測定及 NK 細(xì)胞活性的影響

注 ：與 NC 組比較aP＜0.05,bP＜0.01 ；與 IC 組比較cP＜0.05,dP＜0.01

組別 劑量 例數(shù) C o n A O D 值 ( 4 9 0 n m ) L P S O D 值 ( 4 9 0 n m ) N K 細(xì)胞活性 ( % ) ( M T T 法 ) N C 8 0 . 3 4 9 ± 0 . 0 3 8 0 . 3 7 6 ± 0 . 0 6 7 5 1 . 2 9 ± 6 . 8 6 I C 0 . 7 5 m g / k g 8 0 . 2 7 0 ± 0 . 0 6 2b 0 . 3 1 4 ± 0 . 0 5 6a 2 6 . 0 0 ± 8 . 2 1bY C 2 . 4 3 g / k g 8 0 . 3 5 1 ± 0 . 0 6 2d 0 . 3 8 6 ± 0 . 0 6 5c 3 2 . 1 1 ± 8 . 8 6 H D 5 . 0 g / k g 8 0 . 3 4 9 ± 0 . 0 5 4d 0 . 3 1 1 ± 0 . 0 3 7 3 4 . 8 1 ± 7 . 7 3cM D 2 . 5 g / k g 8 0 . 3 4 0 ± 0 . 0 7 0c 0 . 3 0 9 ± 0 . 0 5 7 3 0 . 6 4 ± 6 . 2 1 L D 1 . 2 5 g / k g 8 0 . 3 3 6 ± 0 . 0 5 3c 0 . 3 1 8 ± 0 . 0 2 7 3 0 . 2 6 ± 1 1 . 2 1

4 小結(jié)

白芷提取物 (5.0 g/kg)能提高對地塞米松致大鼠脾 T 淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞的增殖活性。

［1］楊鐵虹 , 賈敏 , 梅其炳 .當(dāng)歸多糖組分促進淋巴細(xì)胞增殖及對IL-2 和 IFN-γ 的誘生作用 .中藥材 , 2005, 28(5):405-407.

［2］Yuan HM, Song JM, Li XG, et al. Immunomodulation and antitumor activity of k-carrageenan oligosaccharides. Cancer Letters. 2006, 243(2):228-234.

Effect of radix angelicae extract on rats spleen lymphocyte immune inhibition

GAO Kai. Hainan Sida Pharmaceutical Co., Ltd., Haikou 571400, China

Objective To explore effect of radix angelicae extract on rats spleen lymphocyte immune inhibition. Methods Through the establishment of dexamethasone-induced immune suppression model to study the long-term radix angelicae extract of dexamethasone on rat spleen lymphocytes after proliferation, natural killer(NK) cell activity. Results Radix angelicae extract (5.0 g/kg) increased proliferation ability of ConA-induced splenic lymphoid T-cell and NK cell activity of spleen lymphocytes, but has no obvious influence for LPS induced spleen B lymphocyte cell proliferation ability. Conclusion Radix angelicae extract (5.0 g/kg) can improve the rat spleen lymphoid T cells and NK cell proliferation activity.

Angelicae extract; Lymphocytes; Natural killer cells

2014-05-12］

571400 海南斯達制藥有限公司