不同制備方法對生白芍和炒白芍中多糖含量及多糖元素含量的影響

楊 軍

河南中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院藥學部，河南 鄭州 450000

白芍藥物屬于毛茛科芍藥的一種植物，其也被稱之為百花芍藥，在中國有著非常悠久的歷史，聞名中外，白芍根部可以入藥。其產(chǎn)地包括內(nèi)蒙古、山西、河南以及吉林等地。其性涼、味道酸苦，畏寒，對陰虛發(fā)熱、胸部疼痛、崩漏以及四肢痙攣起到良好的治療效果，可以起到平肝止痛以及斂陰收汗之功效［1］。其中對其采取炮制的方法各種各樣，其中包括有土制、酒制以及炒制等。根據(jù)相關臨床報道表明，不同制備方法對白芍當中的藥苷含量的影響非常明顯［2］，可是卻沒有相關臨床報道證實，不同制備方法對白芍當中多糖含量以和理化性質(zhì)所帶來的影響［3］。針對這一情況，本文筆者對白芍當中質(zhì)量的相關指標成分采用多糖，分別采用不同制備方法來制備多糖，對炒白芍與生白芍當中多糖含量和理化性質(zhì)進行分析研究，僅供相關人員參考。

1 材料和儀器

1.1 材料 白芍藥材選自安徽省毫州市，經(jīng)河南中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院藥學部重點實驗室中藥師鑒定的Pall干燥根。采取不同制備方法處理以后，通過粉碎機進行粉碎［4］，經(jīng)過八十目篩以后放入干燥器當中進行儲存。

1.2 試劑 Glc(標準品葡萄糖)、GlcA(葡萄糖醛酸)、Gla(半乳糖)、Man(甘露糖)、Xyl(木糖)、Rha(鼠李糖)、Ara(阿拉伯糖)。乙醇屬于工業(yè)級，水屬于蒸餾水，苯酚、丙酮、間羥聯(lián)苯、硫酸等相關試劑全部為分析純。

1.3 儀器 HP 6890氣相色譜儀 (產(chǎn)地:昆山市賽特科學儀器有限公司);CARIO－ERBA元素自動分析儀 (產(chǎn)地:南京第四分析儀器有限公司);754分光光度計 (產(chǎn)地:上海濟成分析儀器有限公司);BS21S精密電子天平 (產(chǎn)地:上海平軒科學儀器有限公司);LG－5真空冷凍干燥機 (產(chǎn)地:廈門上興機械工業(yè)有限公司);RE52－86A型真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 (產(chǎn)地:上海普渡生化科技有限公司);Labofuge 400R型冷凍離心機 (產(chǎn)地:北京諾克奧基因工程技術有限公司)。

2 制作方法和結果

2.1 炮制品的制備 生白芍:采取原始材料，將其雜質(zhì)和毛須徹底去除干凈，之后干燥和粉碎，過八十目篩，作為備用［5］。炒白芍:取白芍片放到鍋當中，采取文火進行加熱，一直炒到表面呈現(xiàn)微黃色取出以及放涼，之后粉碎，過八十目篩，作為備用［3］。

2.2 兩種不同制備方法制備白芍粗多糖 ① 水提－乙醇沉淀:分別采取炒白芍以及生白芍各100g。按照1∶10的投料分別加入到蒸餾水常溫浸泡24h之后對其進行過濾，提出其藥液經(jīng)過真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至250ml，之后在往濃縮液當中加入6倍的乙醇 (95%)，使乙醇含量高達80%，室內(nèi)溫度靜置沉淀多糖，離心，將上清液去除，之后采用蒸餾水溶解進行沉淀以及抽取濾液，濾液采取截留分子量1 000的透析膜在正常溫度流水透析，使寡糖 (小分子)等相關雜質(zhì)完全去除。透析液通過降低壓力濃縮以后采取真空冷凍干燥，分別獲得BSEP－S(生白芍多糖)以及BSFP－C(炒白芍多糖)。②水提－丙酮沉淀:制備方法處理采取六倍濃縮液的丙酮替代六倍濃縮液的乙醇 (95%)以外，剩余制備方法和水提－乙醇沉淀相一致，最終分別取得BSEP－S(生白芍多糖)以及BSFP－C(炒白芍多糖)。多糖得出率 (%):多糖質(zhì)量/藥材質(zhì)量×100%。由表1可以顯示，水提－乙醇沉淀制備的生白芍多糖和炒白芍多糖的多糖得率全部明顯高于水提－乙醇沉淀方法制備的生白芍多糖和炒白芍多糖。③苯酚－硫酸方法 (中性糖含量測定):以標準品葡萄糖當做單糖標準品，對白芍多糖的含量采取苯酚－硫酸方法進行測定，具體結果詳見表1。④間羥聯(lián)苯－四硼酸鈉硫酸法 (糖醛酸含量測定):采取葡萄糖醛酸當做糖醛酸標準品，對白芍多糖的糖醛酸含量采用間羥聯(lián)苯－四硼酸鈉硫酸方法進行測定［5－6］，具體情況詳見表1。⑤元素分析:白芍多糖樣品經(jīng)過1050C烘干一直到恒中，采取CARIO－ERBA元素自動分析儀對C、N以及H元素進行分析，結果詳見表2。⑥蛋白質(zhì)含量測定:其含量能夠利用含氮量進行換算，則采用元素自動分析儀對樣品當中N元素含量進行測定，之后×6.25的系數(shù)就能夠得出其蛋白質(zhì)含量。本文白芍多糖的元素都沒有檢測出N元素，這就說明，白芍多糖當中的含氮量明顯低于儀器當中的檢測限制，也就是說在0.3%以下，具體情況詳見表2。因此，蛋白質(zhì)含量在0.30%乘以6.25以下［6－7］。

表1 白芍多糖得率、糖醛酸含量以及中性糖含量分析 (%)

2.3 樣品糖含量試驗 采取BSEP－S和BSEP－C樣品4份，依法測定含量，添加芍藥苷對照品0.1mg，白芍多糖得率如表1所示，表明本方法的加樣回收率以芍藥苷加入量計符合要求［7］。

2.4 白芍多糖元素含量測定 分別取BSEP－S和BSEP－C試品溶液20 μl進樣，測定芍藥苷的峰面積，進行白芍多糖的元素分析，標準曲線計算出芍藥苷的含量。白芍多糖的元素分析結果見表2。

表2 白芍多糖的元素分析 (%)

3 討論

不同制備多糖的方法結果顯示:水提－丙酮沉淀來制備白芍多糖的產(chǎn)量以及含量明顯高于水提－乙醇沉淀制備方法。白芍制備前后的結果顯示，生白芍多糖產(chǎn)率明顯高于炒白芍。

根據(jù)多糖含量測定結果能夠發(fā)現(xiàn)，水提－乙醇沉淀制備方法和水提－丙酮沉淀制備方法，白芍被炒制以后的多糖得率全部要比生白芍的得率低，這也許是由于白芍多糖屬于水溶性多糖，在清炒期間導致白芍直接碰觸過低，造成受到溫度過高，導致多糖出現(xiàn)降解，從而對多糖含量造成一定影響［8］。除此之外，這兩種制備方法所得到的白芍多糖的產(chǎn)率發(fā)現(xiàn)，水提－丙酮沉淀的產(chǎn)量以及含量明顯要比水提－乙醇沉淀高，這是由于多糖具有溶水性特點，因此，水溶性多糖通常在丙酮或者酒精當中的沉淀析出，不過丙酮極性要比酒精小，因此，多糖在丙酮當中的溶解程度更多，其產(chǎn)量以及含量更高，對中藥炮制作用以及原理起到至關重要的作用。

［1］王小蓉．略論白芍的炮制及功用［J］．傳統(tǒng)醫(yī)藥，2006，16(16):56．

［2］張紅飛，楊中林，尹麗華．醋炙白芍的炮制工藝研究［J］．中成藥，2005，27(3):291－293．

［3］國家藥典委員會．中華人民共和國藥典 (一部)［S］．北京:化學工業(yè)出版社，2005．附錄20．

［4］張麗萍，楊春清，趙永華，等．安徽白芍規(guī)范化種植加工技術研究及SOP的制定［J］．世界科學技術－中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2004，6(3):63－72．

［5］俞明義．中藥飲片質(zhì)量與臨床療效［J］．浙江中西醫(yī)結合雜志，2005，15(4):255－256．

［6］庫赫炎，趙惠東，唐力英，等．白芍飲片質(zhì)量研究［J］．中國中藥雜志，2006，31(13):1070－1071．

［7］王巧，劉榮霞，郭洪祝，等．加工炮制對白芍化學成分的影響［J］．中國中藥雜志，2006，31(17):1418－1421．

［8］程芳，郭玫，張艷明，等．不同炮制品白芍中芍藥苷的比較［J］．中國民族民間醫(yī)藥2010年 (03期)9－10．