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    莫氏蘭根總黃酮提取工藝優(yōu)選及體外抗氧化活性研究

    2014-07-07 15:36:03董力瑋翟富榮紀(jì)明慧陳光英孫崇格黃筱娟王友志
    關(guān)鍵詞:黃酮提取物微波

    董力瑋,翟富榮,紀(jì)明慧*,陳光英,孫崇格,黃筱娟,王友志

    (1.海南師范大學(xué)省部共建熱帶藥用植物化學(xué)教育部重點(diǎn)實驗室,海南海口571158;2.三亞柏盈熱帶蘭花產(chǎn)業(yè)有限公司,海南三亞572000)

    莫氏蘭根總黃酮提取工藝優(yōu)選及體外抗氧化活性研究

    董力瑋1,翟富榮1,紀(jì)明慧1*,陳光英1,孫崇格2,黃筱娟1,王友志1

    (1.海南師范大學(xué)省部共建熱帶藥用植物化學(xué)教育部重點(diǎn)實驗室,海南???71158;2.三亞柏盈熱帶蘭花產(chǎn)業(yè)有限公司,海南三亞572000)

    研究莫氏蘭根中總黃酮的提取工藝及提取物抗氧化活性.以總黃酮得率為評價指標(biāo),以正交實驗優(yōu)選總黃酮提取的最佳工藝;考察莫氏蘭根微波提取物的抗氧化活性.實驗結(jié)果表明,莫氏蘭根中總黃酮最佳提取工藝為:φ(EtOH)=75%、m(莫氏蘭根)∶V(EtOH)=1∶50、溫度60℃、時間40 min、微波功率700 W,總黃酮得率可達(dá)1.99%.其提取物對DPPH自由基和羥基自由基的抑制濃度(IC50)分別為58.2 μg/mL和181.4 μg/mL.

    莫氏蘭根;總黃酮;抗氧化

    莫氏蘭(Mokara)是1969年由新加坡人用萬代蘭、鳥舌蘭、蜘蛛蘭三個屬雜交出來的新型蘭花[1-4],是一類長勢強(qiáng)健,具有茂盛的氣生根,產(chǎn)量高,花枝長,花色艷麗,很適合做切花的蘭科植物.在鮮花生產(chǎn)過程中,為了增加花的產(chǎn)量和品質(zhì),花農(nóng)需要對多余的氣生根進(jìn)行定期修剪,從而產(chǎn)生大量的廢棄根.由于缺乏對其根的開發(fā)利用,大量修剪下來的根作為廢棄物丟掉了,造成資源的浪費(fèi).研究廢棄的莫氏蘭根開發(fā)利用,解決了莫氏蘭產(chǎn)品深加工問題,變廢為寶,為延伸海南蘭花產(chǎn)業(yè)鏈,提高產(chǎn)品附加值提供了新的思路和途經(jīng).莫氏蘭是雜交的新型蘭花品種,對其組成和功效的研究還少見文獻(xiàn)報導(dǎo).文章采用微波輔助提取法、超聲波輔助提取法和加熱回流提取法對莫氏蘭根總黃酮進(jìn)行提取,用正交實驗考察莫氏蘭根總黃酮的最佳提取工藝,并對其提取物進(jìn)行抗氧化活性研究,為熱帶莫氏蘭的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供科學(xué)依據(jù).

    1 實驗部分

    1.1 儀器、藥品與材料

    儀器:TP-214型電子天平(丹佛儀器北京有限公司);TU-1901型雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司);RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠);XO-5200DTS型超聲波清洗儀(南京先歐儀器制造有限公司).MAS-I型微波萃取儀(上海新儀微波化學(xué)科技有限公司).

    藥品:蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所),二苯代苦味肼基自由基(DPPH·,美國Sigma-Aldrich公司生產(chǎn)),無水乙醇、過氧化氫、七水合硫酸亞鐵、鄰二氮菲、三羥甲基氨基甲烷、抗壞血酸(Vc)等化學(xué)試劑均為分析純.

    材料:莫氏蘭根,采擷于三亞柏盈熱帶蘭花產(chǎn)業(yè)有限公司,自然晾干,粉碎備用.

    1.2 實驗方法

    1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    用體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇配制濃度為0.2 mg/ mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品貯備液.從中分別精密量取0.0(空白樣)、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0 mL標(biāo)準(zhǔn)液置于25 mL容量瓶中,參照文獻(xiàn)[5-7]方法,加入1.0 mL 5%NaNO2溶液,搖勻,放置10min,再加入1.0 mL 10%Al(NO3)3溶液,搖勻,放置10min,然后再加10.0 mL 4%NaOH溶液,用60%乙醇定容至刻度,混合均勻,靜置15min.得蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0.008、0.016、0.024、0.032、0.040、0.048、0.056、0.064、0.072、0.08 mg/mL,以試劑空白為參比,進(jìn)行全波長掃描,溶液在波長510 nm處有最大吸收,因此選擇510 nm為測定波長進(jìn)行實驗,以蘆丁質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),溶液吸光度為縱坐標(biāo)繪制蘆丁質(zhì)量濃度-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程.

    1.2.2 供試樣品溶液的制備

    精密稱取莫氏蘭根干粉1.0 g,加入30 mL的體積分?jǐn)?shù)為85%的乙醇,在水浴溫度為40℃,超聲功率為144W的條件下,超聲回流提取30 min,提取液過濾,取濾液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,加85%的乙醇稀釋至刻度,備用.

    1 2.3 穩(wěn)定性試驗

    移取6份4.0 mL的供試樣品貯備液于25 mL容量瓶中,按照1.2.1節(jié)的測定方法測定0,2,4,6,8,24 h樣品中在波長510 nm處吸光度.

    1.2.4 精密度試驗

    取4.0 mL供試品溶液,按照1.2.1節(jié)的測定方法連續(xù)測定6次,記錄溶液在510 nm處的吸光度.

    1.2.5 重現(xiàn)性試驗

    準(zhǔn)備同一批莫氏蘭根樣品6份,按1.2.1節(jié)供試品溶液制備方法提取、測定,記錄510 nm處測得的吸光度.

    1.2.6 回收率測定

    精密吸取7.0 mL已知濃度的樣品6份,分別精密加入0.2 mg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品1.0、1.0、2.0、2.0、3.0、3.0 mL于10 mL容量瓶中,以60%乙醇定容至刻度,按1.2.1節(jié)方法測定溶液中總黃酮的含量,計算平均回收率和RSD值.

    1.2.7 總黃酮測定及得率的計算

    將各實驗提取液用相應(yīng)濃度的乙醇定容至50 mL容量瓶中,從中移取5.0 mL提取液于25 mL容量瓶中,其余步驟見1.2.1節(jié),以試劑空白為參比,在510 nm處測吸光度A1;參照文獻(xiàn)[5-7]的方法測定相應(yīng)提取液在510 nm處吸光度A2.其中(A1-A2)為莫氏根中總黃酮參加一系列反應(yīng)后溶液的吸光度值,由蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線可以計算出提取液中總黃酮質(zhì)量濃度.由下列公式可算總黃酮的提取得率(%):

    總黃酮得率=(提取液中總黃酮質(zhì)量/莫氏蘭根原料質(zhì)量)*100%

    1.2.8 莫氏蘭根總黃酮的提取方法

    超聲波提取法:精密稱取莫氏蘭根干粉1.0 g,加入30 mL的體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇,在恒溫50℃,超聲功率為144W的條件下,超聲提取相應(yīng)時間,過濾,濾液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,加60%的乙醇稀釋至刻度,備用.

    微波提取法:精密稱取莫氏蘭根干粉1.0 g,加入30 mL的體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇,在恒溫50℃,微波功率為600W的條件下,微波提取相應(yīng)時間,過濾,濾液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,加60%的乙醇稀釋至刻度,備用.

    回流攪拌法:精密稱取莫氏蘭根干粉1.0 g,加入30 mL的體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇,在恒溫50℃,攪拌回流提取相應(yīng)時間,過濾,濾液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,加60%的乙醇稀釋至刻度,備用.

    1.2.9 微波提取法的條件優(yōu)化

    精密稱取莫氏蘭根干粉1.0 g,以不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇溶液為提取溶劑,在確定最佳提取方法后,分別考察料液比、乙醇濃度、提取時間、提取溫度、微波提取功率對莫氏蘭根總黃酮得率的影響.

    并在單因素實驗基礎(chǔ)上,以料液比、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時間、提取溫度、微波提取功率為考察因素,設(shè)計五因素五水平的正交實驗,用正交表L25(56)進(jìn)行實驗,以總黃酮得率為考察指標(biāo)篩選出的最佳工藝條件,因素水平表見表1.

    表1 因素水平表Tab.1Level factors

    1.2.10 莫氏蘭根提取物的抗氧化活性研究

    1.2.1 0.1提取物的制備

    取100.0 g莫氏蘭根粉末于1000 mL圓底燒瓶中,按正交實驗確定的總黃酮最佳工藝提取,提取液在80℃下減壓蒸餾至浸膏,然后進(jìn)行冷凍干燥得莫氏蘭根提取物20 g.

    1.2.1 0.2莫氏蘭根提取物清除DPPH自由基實驗

    分別配制濃度為20、40、60、80、100、120、140 μg/ mL的莫氏蘭根提取物溶液,考察其對DPPH自由基的清除作用.樣品對DPPH自由基的清除作用,參照文獻(xiàn)[7-9]的方法進(jìn)行測定.

    1.2.1 0.3莫氏蘭根提取物清除羥自由基實驗

    分別配制濃度為60、80、100、120、150、200、250、300 μg/mL的莫氏蘭根提取物溶液,考察其對·OH清除作用.

    樣品對Fenton反應(yīng)產(chǎn)生·OH清除作用,參照文獻(xiàn)[7-9]的方法進(jìn)行測定.

    2 結(jié)果與討論

    2.1 莫氏蘭根總黃酮的提取工藝

    2.1.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線測定

    在510 nm波長處測定吸光度,以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度為橫坐標(biāo),以吸光度值為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,結(jié)果蘆丁在0.008-0.08 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好.回歸方程為:Y=0.03+11.825X,相關(guān)系數(shù)為0.9998.

    2.1.2 穩(wěn)定性試驗

    分別于0,2,4,6,8,24 h各取4.0 mL供試品溶液于25 mL容量瓶中,按照1.2.2節(jié)方法進(jìn)行測定,結(jié)果表明,各溶液總黃酮含量相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.02%,表明該方法在24 h內(nèi)穩(wěn)定.

    2.1.3 精密度試驗

    取4.0 mL供試品溶液,按照1 2.2節(jié)的方法測定吸光度,連續(xù)測定6次.測得樣品溶液中總黃酮的平均含量為1.46%,RSD為1.58%(n=6),表明該方法精密高.

    2.1.4 重現(xiàn)性試驗

    準(zhǔn)備同一批供試樣品6份,按供試品溶液制備方法提取、測定,記錄510 nm處測吸光度.測得樣品溶液中總黃酮的平均含量為1.65%,RSD為1.35%(n=6),表明該方法重現(xiàn)性好.

    2.1.5 回收率測定

    精密量取7.0 mL已知濃度的樣品6份,分別精密加入0.2 mg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品1.0、1.0、2.0、2.0、3.0、3.0 mL置于10 mL容量瓶中,以60%乙醇定容至刻度,按1.2.1節(jié)方法測定溶液中總黃酮的含量,結(jié)果見表2,計算平均回收率為99.55%,RSD為1.92%,說明實驗方法準(zhǔn)確度較高,能用于莫氏蘭根黃酮的檢測.

    表2 加標(biāo)回收率實驗結(jié)果Tab.2Results of recovery test of standard addition

    2.2 不同提取方法的比較

    不同提取方法比較,由圖1和圖2可見,三種提取方法的總黃酮提取率都是隨著提取時間的延長逐漸升高,至一定時間達(dá)到平衡,表3列出了三種提取方法提取達(dá)到平衡時的提取時間和總黃酮得率,超聲波法和微波法提取效果明顯優(yōu)于攪拌法,超聲波法和微波法提取達(dá)到平衡時總黃酮得率比較接近,但微波提取用時較少,且總黃酮得率也較高,故選擇微波提取法為最優(yōu)的提取方法.

    2.3 微波提取法單因素實驗結(jié)果

    2.3.1 不同料液比對莫氏蘭根總黃酮得率的影響

    在提取條件:75%乙醇、提取溫度70℃、提取時間60 min,微波功率600W不變的情況下,考察不同料液比1∶30、1∶40、1∶50、1∶60、1∶70、1∶80(mg∶mL)對莫氏蘭根總黃酮得率的影響.結(jié)果見圖3,由圖3可以看出,當(dāng)料液比為1∶30~1∶50(mg∶mL)時,莫氏蘭根總黃酮得率隨提取溶劑的增加逐漸增加,當(dāng)料液比為1∶50~1∶80(mg∶mL)時,莫氏蘭根總黃酮得率出現(xiàn)下降的趨勢,說明當(dāng)乙醇用量增加時,可以充分地把提莫氏蘭根總黃酮提取出來,但過量的乙醇溶液同樣把莫氏蘭根中其他組分提取出來,從而影響了總黃酮的溶解度,造成提取率下降,因此,本實驗選擇的適宜物料比為1∶50(mg∶mL).

    圖1 超聲波和微波法提取時間對總黃酮得率影響Fig.1The effect of extraction time on the yield of total flavonoids by ultrasonic and microwave

    圖2 攪拌提取時間對總黃酮得率影響Fig.2The effect of stirring duration on the yield of total flavonoids

    表3 不同提取方法提取結(jié)果Tab.3The extraction results of different extraction method

    圖3 不同料液對總黃酮得率影響Fig.3The effect of ratio of sample to solution on the yield of total flavonoids

    2.3.2 不同乙醇濃度對莫氏蘭根總黃酮得率的影響

    在提取條件為料液比1∶50(mg∶mL)、提取溫度70℃、提取時間60 min,微波功率600W不變的情況下,考察不同乙醇體積分?jǐn)?shù)為35%、45%、55%、65%、75%、85%、95%的乙醇溶液對莫氏蘭根總黃酮得率的影響.結(jié)果見圖4,由圖4可以看出,當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為為35%~75%,總黃酮得率隨乙醇濃度的增加逐漸增加,當(dāng)乙醇濃度為75%時,總黃酮得率最高.當(dāng)乙醇濃度為75%~95%時,總黃酮得率隨乙醇濃度的增加逐漸下降,說明乙醇濃度對總黃酮提取效果有較大的影響,低濃度的乙醇溶液對莫氏蘭根組織細(xì)胞的破裂作用效果不理想,總黃酮提取的效果也受到影響,提高乙醇濃度有助于莫氏蘭根總黃酮的提取,但乙醇濃度過高,提取液中雜質(zhì)增加,從而影響了莫氏蘭根總黃酮的溶出率,降低了莫氏蘭根總黃酮的得率,故適宜的乙醇體積分?jǐn)?shù)為75%.

    2.3.3 不同時間對莫氏蘭根總黃酮得率的影響

    在提取條件為料液比1∶50(mg∶mL)、乙醇體積分?jǐn)?shù)為75%、提取溫度70℃、微波功率600W不變的情況下,考察10、20、30、40、50、60、70、80、90 min不同的提取時間對莫氏蘭根總黃酮得率的影響.結(jié)果見圖5.由圖5看出,隨著提取時間的延長,總黃酮得率逐漸增加,60 min時總黃酮得率最高;時間小于60 min,總黃酮提取不夠充分,提取到60 min時,提取基本完成,再延長提取時間,莫氏蘭根中其他成分同時被提取出,雜質(zhì)增多,影響了提取效果.故適宜的提取時間為60 min.

    圖4 不同乙醇體積分?jǐn)?shù)對總黃酮得率的影響Fig.4The effect of different ethanol volume fraction on the yield of total flavonoids

    圖6 不同提取溫度對總黃酮得率的影響Fig.6The effect of extraction temperature on the yield of total flavonoids

    圖5 不同提取時間對總黃酮得率的影響Fig.5The effect of extraction duration on the yield of total flavonoids

    2.3.4 不同溫度對莫氏蘭根總黃酮得率的影響

    在提取條件為料液比為1∶50(mg∶mL)、乙醇體積分?jǐn)?shù)為75%、提取時間為60 min、超聲波功率600W不變的情況下,考察不同的提取溫度30、40、50、60、70、80℃對莫氏蘭根總黃酮得率的影響.由圖6可以看出,30℃時總黃酮得率很低,隨著提取溫度的升高,總黃酮得率增加,70℃時得率最高;溫度低于30℃,莫氏蘭根中黃酮溶解度小,提取效果受到影響,因此提取率不高;溫度高于70℃時,隨著溫度的提高,黃酮氧化分解速度加快,總黃酮得率減小.故適宜的提取溫度為70℃.

    2.3.5 不同提取功率對莫氏蘭根總黃酮得率的影響

    在提取條件為料液比1∶50(mg∶mL)、乙醇體積分?jǐn)?shù)為75%、提取溫度70℃、提取時間60 min、考察微波功率為400、500、600、700、800W時對莫氏蘭根總黃酮得率的影響.由圖7看出,當(dāng)微波提取功率為400~700W時,提高微波功率有助于莫氏蘭根總黃酮的提取,但當(dāng)微波提取功率為700~800W時,隨著微波功率的提高總黃酮得率呈現(xiàn)出下降趨勢,表明增大微波提取功率,提高了莫氏蘭根細(xì)胞破裂的速度,使黃酮類物質(zhì)迅速溶入到乙醇溶液中,從而提高了黃酮的提取效果.但當(dāng)微波提取功率大于700W時,提取液中其他組分含量增加,影響了黃酮類物質(zhì)的溶出,降低了總黃酮得率.故適宜的微波提取功率為700W.

    圖7 不同微波功率對總黃酮得率的影響Fig.7The effect of Microwave power on the yield of total flavonoids

    2.4 微波法提取莫氏蘭根總黃酮正交實驗結(jié)果

    在單因素實驗基礎(chǔ)上,以料液比、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時間、提取溫度、微波提取功率為考察因素,設(shè)計五因素五水平的正交實驗,用正交表L25(56)進(jìn)行實驗,以總黃酮得率為考察指標(biāo)篩選出最佳提取工藝條件,結(jié)果見表4.

    根據(jù)表4所列的數(shù)據(jù),由直觀分析可知,用微波輔助提取莫氏蘭根總黃酮,以總黃酮得率為評價指標(biāo),通過正交實驗優(yōu)化得到最佳提取工藝條件:乙醇體積分?jǐn)?shù)為75%、料液比為1:50(g/mL)、溫度為60℃、時間為40 min、微波功率為700 W,各因素對總黃酮得率影響依次為:料液比>提取時間>微波功率>乙醇濃度>提取溫度,即料液比為主要影響因素.在此最佳條件下,取同一批次樣品,進(jìn)行3次驗證性實驗,測得總黃酮平均得率可達(dá)1.99%,RSD為1.02%,表明優(yōu)化后得到的莫氏蘭總黃酮提取工藝穩(wěn)定可靠,實驗重復(fù)性好.

    2.5 提取物抗氧化活性研究

    2.5.1 提取物對DPPH·的清除作用

    參照文獻(xiàn)[7-9]方法測得不同濃度的莫氏蘭根提取物對DPPH·清除結(jié)果見表5和圖8所示.

    表4 微波法提取莫氏蘭根總黃酮的結(jié)果與分析表Tab.4Results and analysis of ultrasonic assisted extraction of total flavonoids of RM

    表5 提取物清除DPPH·的結(jié)果Tab.5The result of scavenging DPPH free radical

    圖8 不同濃度提取物對DPPH·清除率的影響Fig.8The effect of different concentrations onthe activity of scavenging DPPH free radical

    從圖8可看出:莫氏蘭根的微波提取物對DPPH·有一定的清除能力,隨著樣品濃度的增加,對DPPH·的清除率也增加,有一定的量-效關(guān)系.可測出莫氏蘭根的微波提取物清除DPPH·的半抑制率(IC50)為58.2 μg/mL,小于Vc(IC50=104.8μg/ mL)[9],因而莫氏蘭根的微波提取物對DPPH·的清除能力強(qiáng)于Vc.

    2.5.2 提取物對·OH清除作用

    參照文獻(xiàn)[7-9]方法測得不同濃度的莫氏蘭根微波提取物對·OH清除結(jié)果,見表6所示.

    從實驗結(jié)果可看出:莫氏蘭根的微波提取物對·OH有一定的清除能力,隨著濃度的增加,對· OH的清除能力也增強(qiáng),但達(dá)到一定濃度后,清除率的增長趨勢隨樣品濃度增加而變緩.莫氏蘭根微波提取物清除·OH的IC50的值為181.4 μg/mL.其IC50的值大于Vc(IC50=104.8 μg/mL),因而其對·OH的清除能力不及Vc好.

    表6 提取物清除羥基自由基(·OH)的結(jié)果Tab.6The result of scavenging hydroxyl free radical

    圖9 不同濃度提取物對·OH清除率的影響Fig.9The effect of different concentrations on the activity of scavenging hydroxyl free radical

    3 結(jié)論

    通過實驗結(jié)果可知,在莫氏蘭根總黃酮提取過程中,微波輔助提取法優(yōu)于超聲波提取法和加熱回流提取法,總黃酮提取得率達(dá)到了1.99%,且用時較少,操作簡便,微波輔助提取法為最佳的提取方法,最佳提取條件為:φ(EtOH)=75%、m(莫氏蘭根)∶V(EtOH)=1∶50、溫度60℃、時間40 min、微波功率700 W.莫氏蘭根微波提取物對DPPH·和·OH具有較好的清除活性,清除效果與其質(zhì)量濃度有一定的量效關(guān)系,其IC50分別為58.2 μg/mL、181.4 μg/ mL.因此,莫氏蘭根具有較大的開發(fā)價值,需要進(jìn)一步研究.

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    [9]王呈文,紀(jì)明慧,陳光英,等.熱帶莫氏蘭根提取物的抗氧化活性及穩(wěn)定性研究[J].食品工業(yè)科技,2013,34(5): 209-211.

    責(zé)任編輯:畢和平

    Study on Extraction Process of Total Flavonoids and Antioxidant Activities of Extracts of Mokara Roots

    DONG Liwei1,ZHAI Furong1,JI Minghui1*,CHEN Guangying1,SUN Chongge2,HUANG Xiaojuan1,WANG Youzhi1
    (1.Key Laboratory of Tropical Medicinal Plant Chemistry of Ministry of Education,Hainan Normal University,Haikou 571158,China;2.Best Goldlines Tropical Orchid Industrial(Sanya)Co.,Ltd,Sanya 572000,China)

    The extraction process of total flavonoids and antioxidant activities of extracts of Mokara roots were studied. By using the total yield of flavonoids as an evaluation standard,the optimum extraction conditions about total flavonoids were analyzed by orthogonal experiment;The antioxidant activities of the extraction of Mokara roots were studied by Microwave technology.The optimum extraction conditions of total flavonoids in Mokara roots was as follows:φ(EtOH)= 75%、m(Mokararoots)∶V(EtOH)=1∶50,60℃,40min,700W,the yield of flavonoids up to 1.99%.The median inhibitory concentration(IC50)of scavenging hydroxyl radical and DPPH radical were 58.2μg/mL and 181.4μg/mL,respectively.

    Mokara roots;total flavonoids;antioxidant activities

    X 784

    A

    1674-4942(2014)01-0042-07

    2013-12-04

    海南省重大科研項目(ZDZX20100007);海南省應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)項目(ZDXM20130020)

    *通訊作者

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