紅花金銀花染色體核型及進(jìn)化分析

王志濤

摘要：采用常規(guī)制片方法對(duì)紅花金銀花（Lonicera syringantha Maxim.）的染色體進(jìn)行核型分析。結(jié)果表明，紅花金銀花的染色體數(shù)目為18條，基數(shù)為9，染色體核型公式為：2n=18=2M+12m（2SAT）+2sm+2st，其中第3號(hào)染色體具隨體，染色體相對(duì)長(zhǎng)度組成為2n=18=4L+4M2+4M1+6S，核型屬于“2B”型，核型不對(duì)稱系數(shù)為63.12%，屬于由對(duì)稱向不對(duì)稱演化的過渡型；同時(shí)對(duì)核型的4個(gè)重要性狀進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，紅花金銀花的進(jìn)化指數(shù)為8，進(jìn)化程度較高；表明紅花金銀花是較野生金銀花進(jìn)化的類型。

關(guān)鍵詞：紅花金銀花（Lonicera syringantha Maxim.）；染色體；核型分析；進(jìn)化指數(shù)

中圖分類號(hào)：S687.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）05-1075-03

金銀花（Lonicera japonica Thunb.）又名忍冬和金銀藤，為忍冬科（Caprifoliaceae）忍冬屬（Lonicera）半常綠纏繞藤本植物[1]。是北方常見的野生觀賞植物和園林綠化及藥用、保健植物之一。金銀花適應(yīng)性強(qiáng)，能耐-35 ℃極低嚴(yán)寒，耐旱、耐澇，在山區(qū)石縫坡堤、平原壩堰溝坎、屋邊空坪隙地均可栽植，還適宜于平原少丘河灘栽植防風(fēng)固沙，防止土壤板結(jié)，減少災(zāi)害；山區(qū)栽植還能保持水土、改良土壤、調(diào)節(jié)氣候。同時(shí)具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱的功效，主治癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風(fēng)熱感冒、溫病發(fā)熱，并有降血壓延緩衰老等藥用功效，因此被譽(yù)為“中藥抗生素”、“長(zhǎng)生不老藥”。

試驗(yàn)材料為青海省農(nóng)林科學(xué)院試驗(yàn)基地從山東平邑縣引進(jìn)的紅花金銀花（Lonicera syringantha Maxim.），該品種藥用及保健價(jià)值極高，是集城市與家庭觀花、綠化、藥用為一體的奇特品種。綠原酸含量比普通金銀花高50%以上。該品種耐極低嚴(yán)寒，四季不落葉，冬季葉片及莖為紫紅色，有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值及觀賞價(jià)值。關(guān)于金銀花染色體的報(bào)道僅見野生金銀花染色體的數(shù)目[2]及核型分析[3，4]，而關(guān)于紅花金銀花染色體核型的研究國(guó)內(nèi)尚未見報(bào)道。為此，研究紅花金銀花染色體的核型及進(jìn)化，以期為金銀花的選育提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

于10：00取生長(zhǎng)良好的紅花金銀花莖尖組織[5]，切下莖尖，放入預(yù)處理液（8-羥基喹啉）中浸泡2～3 h；預(yù)處理后的莖尖經(jīng)水洗后放入卡諾固定液（無水乙醇與冰醋酸的體積比為3∶1）中固定；固定好的材料放入1 mol/L HCl中于60 ℃下處理18 min[6]；將解離好的材料用清水沖洗2～3次，采用改良的卡寶品紅染色15 min，然后進(jìn)行壓片、鏡檢，顯微攝影[7，8]。

選擇每個(gè)物種5條染色體分散好的細(xì)胞，核型分析按照李懋學(xué)等[9]提出的植物染色體核型分類的依據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，根據(jù)中期染色體的相對(duì)長(zhǎng)度和臂比（r）兩項(xiàng)主要指標(biāo)進(jìn)行核型分析，核型不對(duì)稱系數(shù)按Arano[10]的方法計(jì)算，核型分類依照Stebbins[11]提出的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

圖1為紅花金銀花染色體形態(tài)圖，圖2為染色體核型模式圖，通過圖1、圖2與表1分析得出，紅花金銀花的染色體數(shù)目為18條，圖1中箭頭所指位置為隨體。根據(jù)染色體相對(duì)長(zhǎng)度系數(shù)（I.R.L）可將紅花金銀花染色體分成4組，L組（第l、2對(duì)），M2組（第3、4對(duì)），M1組（第5、6對(duì)），S組（第7、8、9對(duì)），其染色體相對(duì)長(zhǎng)度組成為：2n=18=4L+4M2+4M1+6S。染色體長(zhǎng)度比（LR）=最長(zhǎng)染色體長(zhǎng)度/最短染色體長(zhǎng)度，為2.75，臂比（r）的變化范圍為1.00～4.50，臂比大于2的染色體有2對(duì)。根據(jù)Stebbins[11]的核型分類標(biāo)準(zhǔn)，判定其核型屬于“2B”型，屬于中等對(duì)稱性染色體組，染色體核型公式為： 2n=18=2M+12m（2SAT）+2sm+2st，其中第3號(hào)染色體具隨體（圖1中箭頭所示），按Arano[10]的方法計(jì)算核型不對(duì)稱系數(shù)為63.12%，屬于進(jìn)化程度相對(duì)較高的種。

Stebbins[11]認(rèn)為，核型的進(jìn)化趨勢(shì)是由對(duì)稱向不對(duì)稱方向發(fā)展的，對(duì)稱性大的較為原始，對(duì)稱性小的較為進(jìn)化。根據(jù)表2列出的幾個(gè)重要性狀，借用分支系統(tǒng)學(xué)的常規(guī)編序、賦值方法[12，13]，可求出反映種群發(fā)育程度的進(jìn)化指數(shù)，從而決出各自的演化水平。其性狀分析如下。

1）染色體長(zhǎng)度比。其比值越大，核型傾于不對(duì)稱。染色體長(zhǎng)度比可分為4個(gè)進(jìn)化段，即2.20以下（賦值為0）→2.20～2.60（賦值為1）→2.61～3.00（賦值為2）→3.00以上（賦值為3）。

2）平均臂比。其比值越大，核型傾于不對(duì)稱。染色體平均臂比差異明顯，大致可分為3個(gè)進(jìn)化段，即1.30以下（賦值為0）→1.30～1.40（賦值為1）→1.40以上（賦值為2）。

3）不對(duì)稱系數(shù)。其值越大，核型也越傾于不對(duì)稱。染色體不對(duì)稱系數(shù)也可分為3個(gè)進(jìn)化段，即56.00%以下（賦值為0）→56.00%～58.00%（賦值為1）→58.00%以上（賦值為2）。

4）臂比大于1.7的染色體比例。其值越大，核型也越趨于不對(duì)稱。染色體臂比大于1.7的染色體比例也存在3個(gè)進(jìn)化段，即0.14以下（賦值為0）→0.14～0.19（賦值為1）→0.19～0.24（賦值為2）。

將上述性狀狀態(tài)的賦值按種疊加起來，便能得到表2的進(jìn)化指數(shù)值。從表2可見，紅花金銀花染色體的核型進(jìn)化指數(shù)較高，其值為8，因此進(jìn)化程度較高，是屬于較進(jìn)化的種。

3 小結(jié)

試驗(yàn)得出紅花金銀花染色體數(shù)目為18條，2n=2x=18，x=9，為二倍體植物，這與野生金銀花染色體數(shù)目的報(bào)道一致[2，3]；但染色體形態(tài)和組成有一定差異。郭振懷等[3]報(bào)道，野生金銀花染色體核型公式為2n=18=2m+14sm+2st，由2條中部著絲粒染色體、14條近中部著絲粒染色體和2條近端部染色體構(gòu)成，最長(zhǎng)染色體是最短染色體的1.95倍，在第3、第5及第6染色體上具隨體。而本研究的紅花金銀花染色體核型公式為2n=2M+12m（2SAT）+2sm+2st，由2條正中部著絲粒染色體、12條中部著絲粒染色體、2條近中部著絲粒染色體和2條近端部著絲粒染色體構(gòu)成。最長(zhǎng)染色體為最短染色體的2.75倍，在第3號(hào)染色體上具隨體。野生金銀花染色體核型為“3A”型[3]，核型對(duì)稱性明顯，表明野生金銀花在系統(tǒng)演化上有較強(qiáng)的原始性，而本研究的紅花金銀花染色體為“2B”型，屬于由對(duì)稱向不對(duì)稱演化的過渡型，進(jìn)化指數(shù)為8，進(jìn)化程度較高，是較野生型進(jìn)化的金銀花。由此可見，紅花金銀花是經(jīng)過人工培育而成的，染色體在重組過程中，染色體的結(jié)構(gòu)和形態(tài)往往會(huì)發(fā)生一定程度的變異，造成種內(nèi)的核型分化，因此，紅花金銀花在物種形成過程中表現(xiàn)出較野生金銀花進(jìn)化程度高的現(xiàn)象。

參考文獻(xiàn)：

[1] 卓麗環(huán)，陳龍清.園林樹木學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2004.

[2] 陳升振，陳忠毅，黃向旭，等.五十種植物的染色體計(jì)數(shù)[J].廣西植物，1990，10（1）：33-37.

[3] 郭振懷，王 敏，李三星.金銀花染色體核型研究[J].河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1993，16（1）：33-35.

[4] 王 飛，王 冰.忍冬屬兩種藥用植物的染色體核型分析[J].中藥材，2005，28（3）：168-169.

[5] 李曉玲，楊 進(jìn)，王洪濤，等.樹型金銀花染色體制片優(yōu)化及核型分析[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（7）：102-106.

[6] 曹方莉，王曉明，趙思東，等. 花蕾型金銀花同源四倍體的誘導(dǎo)和鑒定[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（9）：3619-3612.

[7] 李懋學(xué)，張學(xué)方.植物染色體研究技術(shù)[M].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)出版社，1991.

[8] 陳瑞陽，宋文芹，李秀蘭.植物有絲分裂染色體標(biāo)本制作的新方法[J].植物學(xué)報(bào)，1979，21（3）：297-298.

[9] 李懋學(xué)，陳瑞陽.關(guān)于植物核型分析的標(biāo)準(zhǔn)問題[J].武漢植物學(xué)研究，1985，3（4）：297-302.

[10] ARANO H. Cytological studies in subfamily Carduoideae（Composite） of Japan IX[J]. Bot Mag（Tokyo），1963，76：32-39.

[11] STEBBINS G L. Chromosomal Evolution in Higher Plants[M]. London： Edward Arnold，1971.

[12] 鐘 揚(yáng)，李 偉，黃世德.分支分類的理論與方法[M].北京：科學(xué)出版社，1994.

[13] 徐克學(xué).數(shù)量分類學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，1994.

摘要：采用常規(guī)制片方法對(duì)紅花金銀花（Lonicera syringantha Maxim.）的染色體進(jìn)行核型分析。結(jié)果表明，紅花金銀花的染色體數(shù)目為18條，基數(shù)為9，染色體核型公式為：2n=18=2M+12m（2SAT）+2sm+2st，其中第3號(hào)染色體具隨體，染色體相對(duì)長(zhǎng)度組成為2n=18=4L+4M2+4M1+6S，核型屬于“2B”型，核型不對(duì)稱系數(shù)為63.12%，屬于由對(duì)稱向不對(duì)稱演化的過渡型；同時(shí)對(duì)核型的4個(gè)重要性狀進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，紅花金銀花的進(jìn)化指數(shù)為8，進(jìn)化程度較高；表明紅花金銀花是較野生金銀花進(jìn)化的類型。

關(guān)鍵詞：紅花金銀花（Lonicera syringantha Maxim.）；染色體；核型分析；進(jìn)化指數(shù)

中圖分類號(hào)：S687.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）05-1075-03

金銀花（Lonicera japonica Thunb.）又名忍冬和金銀藤，為忍冬科（Caprifoliaceae）忍冬屬（Lonicera）半常綠纏繞藤本植物[1]。是北方常見的野生觀賞植物和園林綠化及藥用、保健植物之一。金銀花適應(yīng)性強(qiáng)，能耐-35 ℃極低嚴(yán)寒，耐旱、耐澇，在山區(qū)石縫坡堤、平原壩堰溝坎、屋邊空坪隙地均可栽植，還適宜于平原少丘河灘栽植防風(fēng)固沙，防止土壤板結(jié)，減少災(zāi)害；山區(qū)栽植還能保持水土、改良土壤、調(diào)節(jié)氣候。同時(shí)具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱的功效，主治癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風(fēng)熱感冒、溫病發(fā)熱，并有降血壓延緩衰老等藥用功效，因此被譽(yù)為“中藥抗生素”、“長(zhǎng)生不老藥”。

試驗(yàn)材料為青海省農(nóng)林科學(xué)院試驗(yàn)基地從山東平邑縣引進(jìn)的紅花金銀花（Lonicera syringantha Maxim.），該品種藥用及保健價(jià)值極高，是集城市與家庭觀花、綠化、藥用為一體的奇特品種。綠原酸含量比普通金銀花高50%以上。該品種耐極低嚴(yán)寒，四季不落葉，冬季葉片及莖為紫紅色，有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值及觀賞價(jià)值。關(guān)于金銀花染色體的報(bào)道僅見野生金銀花染色體的數(shù)目[2]及核型分析[3，4]，而關(guān)于紅花金銀花染色體核型的研究國(guó)內(nèi)尚未見報(bào)道。為此，研究紅花金銀花染色體的核型及進(jìn)化，以期為金銀花的選育提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

于10：00取生長(zhǎng)良好的紅花金銀花莖尖組織[5]，切下莖尖，放入預(yù)處理液（8-羥基喹啉）中浸泡2～3 h；預(yù)處理后的莖尖經(jīng)水洗后放入卡諾固定液（無水乙醇與冰醋酸的體積比為3∶1）中固定；固定好的材料放入1 mol/L HCl中于60 ℃下處理18 min[6]；將解離好的材料用清水沖洗2～3次，采用改良的卡寶品紅染色15 min，然后進(jìn)行壓片、鏡檢，顯微攝影[7，8]。

選擇每個(gè)物種5條染色體分散好的細(xì)胞，核型分析按照李懋學(xué)等[9]提出的植物染色體核型分類的依據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，根據(jù)中期染色體的相對(duì)長(zhǎng)度和臂比（r）兩項(xiàng)主要指標(biāo)進(jìn)行核型分析，核型不對(duì)稱系數(shù)按Arano[10]的方法計(jì)算，核型分類依照Stebbins[11]提出的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

圖1為紅花金銀花染色體形態(tài)圖，圖2為染色體核型模式圖，通過圖1、圖2與表1分析得出，紅花金銀花的染色體數(shù)目為18條，圖1中箭頭所指位置為隨體。根據(jù)染色體相對(duì)長(zhǎng)度系數(shù)（I.R.L）可將紅花金銀花染色體分成4組，L組（第l、2對(duì)），M2組（第3、4對(duì)），M1組（第5、6對(duì)），S組（第7、8、9對(duì)），其染色體相對(duì)長(zhǎng)度組成為：2n=18=4L+4M2+4M1+6S。染色體長(zhǎng)度比（LR）=最長(zhǎng)染色體長(zhǎng)度/最短染色體長(zhǎng)度，為2.75，臂比（r）的變化范圍為1.00～4.50，臂比大于2的染色體有2對(duì)。根據(jù)Stebbins[11]的核型分類標(biāo)準(zhǔn)，判定其核型屬于“2B”型，屬于中等對(duì)稱性染色體組，染色體核型公式為： 2n=18=2M+12m（2SAT）+2sm+2st，其中第3號(hào)染色體具隨體（圖1中箭頭所示），按Arano[10]的方法計(jì)算核型不對(duì)稱系數(shù)為63.12%，屬于進(jìn)化程度相對(duì)較高的種。

Stebbins[11]認(rèn)為，核型的進(jìn)化趨勢(shì)是由對(duì)稱向不對(duì)稱方向發(fā)展的，對(duì)稱性大的較為原始，對(duì)稱性小的較為進(jìn)化。根據(jù)表2列出的幾個(gè)重要性狀，借用分支系統(tǒng)學(xué)的常規(guī)編序、賦值方法[12，13]，可求出反映種群發(fā)育程度的進(jìn)化指數(shù)，從而決出各自的演化水平。其性狀分析如下。

1）染色體長(zhǎng)度比。其比值越大，核型傾于不對(duì)稱。染色體長(zhǎng)度比可分為4個(gè)進(jìn)化段，即2.20以下（賦值為0）→2.20～2.60（賦值為1）→2.61～3.00（賦值為2）→3.00以上（賦值為3）。

2）平均臂比。其比值越大，核型傾于不對(duì)稱。染色體平均臂比差異明顯，大致可分為3個(gè)進(jìn)化段，即1.30以下（賦值為0）→1.30～1.40（賦值為1）→1.40以上（賦值為2）。

3）不對(duì)稱系數(shù)。其值越大，核型也越傾于不對(duì)稱。染色體不對(duì)稱系數(shù)也可分為3個(gè)進(jìn)化段，即56.00%以下（賦值為0）→56.00%～58.00%（賦值為1）→58.00%以上（賦值為2）。

4）臂比大于1.7的染色體比例。其值越大，核型也越趨于不對(duì)稱。染色體臂比大于1.7的染色體比例也存在3個(gè)進(jìn)化段，即0.14以下（賦值為0）→0.14～0.19（賦值為1）→0.19～0.24（賦值為2）。

將上述性狀狀態(tài)的賦值按種疊加起來，便能得到表2的進(jìn)化指數(shù)值。從表2可見，紅花金銀花染色體的核型進(jìn)化指數(shù)較高，其值為8，因此進(jìn)化程度較高，是屬于較進(jìn)化的種。

3 小結(jié)

試驗(yàn)得出紅花金銀花染色體數(shù)目為18條，2n=2x=18，x=9，為二倍體植物，這與野生金銀花染色體數(shù)目的報(bào)道一致[2，3]；但染色體形態(tài)和組成有一定差異。郭振懷等[3]報(bào)道，野生金銀花染色體核型公式為2n=18=2m+14sm+2st，由2條中部著絲粒染色體、14條近中部著絲粒染色體和2條近端部染色體構(gòu)成，最長(zhǎng)染色體是最短染色體的1.95倍，在第3、第5及第6染色體上具隨體。而本研究的紅花金銀花染色體核型公式為2n=2M+12m（2SAT）+2sm+2st，由2條正中部著絲粒染色體、12條中部著絲粒染色體、2條近中部著絲粒染色體和2條近端部著絲粒染色體構(gòu)成。最長(zhǎng)染色體為最短染色體的2.75倍，在第3號(hào)染色體上具隨體。野生金銀花染色體核型為“3A”型[3]，核型對(duì)稱性明顯，表明野生金銀花在系統(tǒng)演化上有較強(qiáng)的原始性，而本研究的紅花金銀花染色體為“2B”型，屬于由對(duì)稱向不對(duì)稱演化的過渡型，進(jìn)化指數(shù)為8，進(jìn)化程度較高，是較野生型進(jìn)化的金銀花。由此可見，紅花金銀花是經(jīng)過人工培育而成的，染色體在重組過程中，染色體的結(jié)構(gòu)和形態(tài)往往會(huì)發(fā)生一定程度的變異，造成種內(nèi)的核型分化，因此，紅花金銀花在物種形成過程中表現(xiàn)出較野生金銀花進(jìn)化程度高的現(xiàn)象。

參考文獻(xiàn)：

[1] 卓麗環(huán)，陳龍清.園林樹木學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2004.

[2] 陳升振，陳忠毅，黃向旭，等.五十種植物的染色體計(jì)數(shù)[J].廣西植物，1990，10（1）：33-37.

[3] 郭振懷，王 敏，李三星.金銀花染色體核型研究[J].河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1993，16（1）：33-35.

[4] 王 飛，王 冰.忍冬屬兩種藥用植物的染色體核型分析[J].中藥材，2005，28（3）：168-169.

[5] 李曉玲，楊 進(jìn)，王洪濤，等.樹型金銀花染色體制片優(yōu)化及核型分析[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（7）：102-106.

[6] 曹方莉，王曉明，趙思東，等. 花蕾型金銀花同源四倍體的誘導(dǎo)和鑒定[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（9）：3619-3612.

[7] 李懋學(xué)，張學(xué)方.植物染色體研究技術(shù)[M].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)出版社，1991.

[8] 陳瑞陽，宋文芹，李秀蘭.植物有絲分裂染色體標(biāo)本制作的新方法[J].植物學(xué)報(bào)，1979，21（3）：297-298.

[9] 李懋學(xué)，陳瑞陽.關(guān)于植物核型分析的標(biāo)準(zhǔn)問題[J].武漢植物學(xué)研究，1985，3（4）：297-302.

[10] ARANO H. Cytological studies in subfamily Carduoideae（Composite） of Japan IX[J]. Bot Mag（Tokyo），1963，76：32-39.

[11] STEBBINS G L. Chromosomal Evolution in Higher Plants[M]. London： Edward Arnold，1971.

[12] 鐘 揚(yáng)，李 偉，黃世德.分支分類的理論與方法[M].北京：科學(xué)出版社，1994.

[13] 徐克學(xué).數(shù)量分類學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，1994.

摘要：采用常規(guī)制片方法對(duì)紅花金銀花（Lonicera syringantha Maxim.）的染色體進(jìn)行核型分析。結(jié)果表明，紅花金銀花的染色體數(shù)目為18條，基數(shù)為9，染色體核型公式為：2n=18=2M+12m（2SAT）+2sm+2st，其中第3號(hào)染色體具隨體，染色體相對(duì)長(zhǎng)度組成為2n=18=4L+4M2+4M1+6S，核型屬于“2B”型，核型不對(duì)稱系數(shù)為63.12%，屬于由對(duì)稱向不對(duì)稱演化的過渡型；同時(shí)對(duì)核型的4個(gè)重要性狀進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，紅花金銀花的進(jìn)化指數(shù)為8，進(jìn)化程度較高；表明紅花金銀花是較野生金銀花進(jìn)化的類型。

關(guān)鍵詞：紅花金銀花（Lonicera syringantha Maxim.）；染色體；核型分析；進(jìn)化指數(shù)

中圖分類號(hào)：S687.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）05-1075-03

金銀花（Lonicera japonica Thunb.）又名忍冬和金銀藤，為忍冬科（Caprifoliaceae）忍冬屬（Lonicera）半常綠纏繞藤本植物[1]。是北方常見的野生觀賞植物和園林綠化及藥用、保健植物之一。金銀花適應(yīng)性強(qiáng)，能耐-35 ℃極低嚴(yán)寒，耐旱、耐澇，在山區(qū)石縫坡堤、平原壩堰溝坎、屋邊空坪隙地均可栽植，還適宜于平原少丘河灘栽植防風(fēng)固沙，防止土壤板結(jié)，減少災(zāi)害；山區(qū)栽植還能保持水土、改良土壤、調(diào)節(jié)氣候。同時(shí)具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱的功效，主治癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風(fēng)熱感冒、溫病發(fā)熱，并有降血壓延緩衰老等藥用功效，因此被譽(yù)為“中藥抗生素”、“長(zhǎng)生不老藥”。

試驗(yàn)材料為青海省農(nóng)林科學(xué)院試驗(yàn)基地從山東平邑縣引進(jìn)的紅花金銀花（Lonicera syringantha Maxim.），該品種藥用及保健價(jià)值極高，是集城市與家庭觀花、綠化、藥用為一體的奇特品種。綠原酸含量比普通金銀花高50%以上。該品種耐極低嚴(yán)寒，四季不落葉，冬季葉片及莖為紫紅色，有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值及觀賞價(jià)值。關(guān)于金銀花染色體的報(bào)道僅見野生金銀花染色體的數(shù)目[2]及核型分析[3，4]，而關(guān)于紅花金銀花染色體核型的研究國(guó)內(nèi)尚未見報(bào)道。為此，研究紅花金銀花染色體的核型及進(jìn)化，以期為金銀花的選育提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

于10：00取生長(zhǎng)良好的紅花金銀花莖尖組織[5]，切下莖尖，放入預(yù)處理液（8-羥基喹啉）中浸泡2～3 h；預(yù)處理后的莖尖經(jīng)水洗后放入卡諾固定液（無水乙醇與冰醋酸的體積比為3∶1）中固定；固定好的材料放入1 mol/L HCl中于60 ℃下處理18 min[6]；將解離好的材料用清水沖洗2～3次，采用改良的卡寶品紅染色15 min，然后進(jìn)行壓片、鏡檢，顯微攝影[7，8]。

選擇每個(gè)物種5條染色體分散好的細(xì)胞，核型分析按照李懋學(xué)等[9]提出的植物染色體核型分類的依據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，根據(jù)中期染色體的相對(duì)長(zhǎng)度和臂比（r）兩項(xiàng)主要指標(biāo)進(jìn)行核型分析，核型不對(duì)稱系數(shù)按Arano[10]的方法計(jì)算，核型分類依照Stebbins[11]提出的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

圖1為紅花金銀花染色體形態(tài)圖，圖2為染色體核型模式圖，通過圖1、圖2與表1分析得出，紅花金銀花的染色體數(shù)目為18條，圖1中箭頭所指位置為隨體。根據(jù)染色體相對(duì)長(zhǎng)度系數(shù)（I.R.L）可將紅花金銀花染色體分成4組，L組（第l、2對(duì)），M2組（第3、4對(duì)），M1組（第5、6對(duì)），S組（第7、8、9對(duì)），其染色體相對(duì)長(zhǎng)度組成為：2n=18=4L+4M2+4M1+6S。染色體長(zhǎng)度比（LR）=最長(zhǎng)染色體長(zhǎng)度/最短染色體長(zhǎng)度，為2.75，臂比（r）的變化范圍為1.00～4.50，臂比大于2的染色體有2對(duì)。根據(jù)Stebbins[11]的核型分類標(biāo)準(zhǔn)，判定其核型屬于“2B”型，屬于中等對(duì)稱性染色體組，染色體核型公式為： 2n=18=2M+12m（2SAT）+2sm+2st，其中第3號(hào)染色體具隨體（圖1中箭頭所示），按Arano[10]的方法計(jì)算核型不對(duì)稱系數(shù)為63.12%，屬于進(jìn)化程度相對(duì)較高的種。

Stebbins[11]認(rèn)為，核型的進(jìn)化趨勢(shì)是由對(duì)稱向不對(duì)稱方向發(fā)展的，對(duì)稱性大的較為原始，對(duì)稱性小的較為進(jìn)化。根據(jù)表2列出的幾個(gè)重要性狀，借用分支系統(tǒng)學(xué)的常規(guī)編序、賦值方法[12，13]，可求出反映種群發(fā)育程度的進(jìn)化指數(shù)，從而決出各自的演化水平。其性狀分析如下。

1）染色體長(zhǎng)度比。其比值越大，核型傾于不對(duì)稱。染色體長(zhǎng)度比可分為4個(gè)進(jìn)化段，即2.20以下（賦值為0）→2.20～2.60（賦值為1）→2.61～3.00（賦值為2）→3.00以上（賦值為3）。

2）平均臂比。其比值越大，核型傾于不對(duì)稱。染色體平均臂比差異明顯，大致可分為3個(gè)進(jìn)化段，即1.30以下（賦值為0）→1.30～1.40（賦值為1）→1.40以上（賦值為2）。

3）不對(duì)稱系數(shù)。其值越大，核型也越傾于不對(duì)稱。染色體不對(duì)稱系數(shù)也可分為3個(gè)進(jìn)化段，即56.00%以下（賦值為0）→56.00%～58.00%（賦值為1）→58.00%以上（賦值為2）。

4）臂比大于1.7的染色體比例。其值越大，核型也越趨于不對(duì)稱。染色體臂比大于1.7的染色體比例也存在3個(gè)進(jìn)化段，即0.14以下（賦值為0）→0.14～0.19（賦值為1）→0.19～0.24（賦值為2）。

將上述性狀狀態(tài)的賦值按種疊加起來，便能得到表2的進(jìn)化指數(shù)值。從表2可見，紅花金銀花染色體的核型進(jìn)化指數(shù)較高，其值為8，因此進(jìn)化程度較高，是屬于較進(jìn)化的種。

3 小結(jié)

試驗(yàn)得出紅花金銀花染色體數(shù)目為18條，2n=2x=18，x=9，為二倍體植物，這與野生金銀花染色體數(shù)目的報(bào)道一致[2，3]；但染色體形態(tài)和組成有一定差異。郭振懷等[3]報(bào)道，野生金銀花染色體核型公式為2n=18=2m+14sm+2st，由2條中部著絲粒染色體、14條近中部著絲粒染色體和2條近端部染色體構(gòu)成，最長(zhǎng)染色體是最短染色體的1.95倍，在第3、第5及第6染色體上具隨體。而本研究的紅花金銀花染色體核型公式為2n=2M+12m（2SAT）+2sm+2st，由2條正中部著絲粒染色體、12條中部著絲粒染色體、2條近中部著絲粒染色體和2條近端部著絲粒染色體構(gòu)成。最長(zhǎng)染色體為最短染色體的2.75倍，在第3號(hào)染色體上具隨體。野生金銀花染色體核型為“3A”型[3]，核型對(duì)稱性明顯，表明野生金銀花在系統(tǒng)演化上有較強(qiáng)的原始性，而本研究的紅花金銀花染色體為“2B”型，屬于由對(duì)稱向不對(duì)稱演化的過渡型，進(jìn)化指數(shù)為8，進(jìn)化程度較高，是較野生型進(jìn)化的金銀花。由此可見，紅花金銀花是經(jīng)過人工培育而成的，染色體在重組過程中，染色體的結(jié)構(gòu)和形態(tài)往往會(huì)發(fā)生一定程度的變異，造成種內(nèi)的核型分化，因此，紅花金銀花在物種形成過程中表現(xiàn)出較野生金銀花進(jìn)化程度高的現(xiàn)象。

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