煙臺(tái)市萊山區(qū)豬O型口蹄疫免疫抗體檢測(cè)與分析

潘志剛　李軍港　邱榮

摘要：采用豬口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)煙臺(tái)市萊山區(qū)4個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)和5個(gè)生豬散養(yǎng)戶的105份免疫豬份血清樣品進(jìn)行ELISA抗體檢驗(yàn)，其中規(guī)模場(chǎng)平均抗體陽性率為92.5%，散養(yǎng)戶平均抗體陽性率為44.0%。針對(duì)本次獲得的口蹄疫血清學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果，提出了相應(yīng)的補(bǔ)救措施和科學(xué)防控意見，強(qiáng)化了豬的免疫、跟蹤監(jiān)測(cè)和生物安全措施。

關(guān)鍵詞：豬口蹄疫；ELISA ；抗體檢測(cè)；煙臺(tái)市萊山區(qū)

中圖分類號(hào)：S858.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1007-273X（2014）02-0054-02

口蹄疫（Foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病[1]，主要分為7個(gè)血清型，即O型、A型、C型、南非Ⅰ型、南非Ⅱ型、南非Ⅲ型和亞洲Ⅰ型，其中O型和A型分布最廣，危害最大[2]。該病歷來被世界各國所重視，在進(jìn)出口貿(mào)易中嚴(yán)格限制，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A類家畜傳染病之首，我國也將其列為Ⅰ類動(dòng)物疫病。

為有效防控口蹄疫發(fā)生，切實(shí)做好口蹄疫免疫無疫區(qū)建設(shè)，煙臺(tái)市萊山區(qū)自2013年以來進(jìn)一步加強(qiáng)了口蹄疫等重大動(dòng)物疫病的集中免疫力度。為科學(xué)評(píng)價(jià)免疫效果，2013年12月初，筆者隨機(jī)選取萊山區(qū)區(qū)內(nèi)的4個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)和5個(gè)生豬散養(yǎng)戶采集豬血清樣品共計(jì)105份，應(yīng)用液相阻斷ELISA檢測(cè)豬O型口蹄疫抗體，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果評(píng)估免疫效果，并提出相應(yīng)的防控建議。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品 105份血清樣品采自萊山區(qū)所屬的4個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)和5個(gè)散養(yǎng)戶。

1.1.2 口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)為2013111101。

1.2 方法

1.2.1 免疫抗體檢測(cè) 口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)方法按照試劑盒說明書進(jìn)行。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)以病毒抗原對(duì)照平均OD492nm值的50%為臨界值，被檢測(cè)抗體效價(jià)大于或等于1：128判為口蹄疫O型抗體陽性；抗體效價(jià)1：64～1：128，判為疑似；抗體效價(jià)小于或等于1：64，判為陰性。

2 結(jié)果與分析

應(yīng)用口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)規(guī)模豬場(chǎng)血清樣品80份，結(jié)果其口蹄疫O型抗體平均陽性率為 92.5%（表1），說明規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)口蹄疫免疫抗體的合格率較高。從表2可以看出檢測(cè)25份散養(yǎng)戶口蹄疫O型抗體平均陽性率僅為44.0%。

3 討論

液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)方法適用于動(dòng)物疫苗免疫抗體檢測(cè)，用于檢測(cè)豬、牛和羊等偶蹄動(dòng)物血清中口蹄疫抗體水平，以監(jiān)測(cè)動(dòng)物免疫抗體水平，了解動(dòng)物的免疫情況，制定合理的免疫程序[3]。液相阻斷ELISA具有高靈敏性，且Van[4]證實(shí)液相阻斷ELISA試驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性要高于血清中和試驗(yàn)。

口蹄疫是危害嚴(yán)重的人畜共患病，一旦流行發(fā)病就可造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失及惡劣的社會(huì)影響，因此要切實(shí)加強(qiáng)口蹄疫的預(yù)防和控制。煙臺(tái)市萊山區(qū)作為膠東半島無疫區(qū)建設(shè)核心區(qū)，2014年將迎接農(nóng)業(yè)部口蹄疫和高致病性禽流感免疫無疫區(qū)建設(shè)評(píng)估，但對(duì)于疫苗的免疫效果一直缺乏相應(yīng)的數(shù)據(jù)，本試驗(yàn)通過監(jiān)測(cè)煙臺(tái)市萊山區(qū)所屬的4個(gè)豬場(chǎng)和5個(gè)散養(yǎng)戶，對(duì)口蹄疫免疫效果的評(píng)價(jià)、免疫程序的調(diào)整及適時(shí)的補(bǔ)免提供了積極有效的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，具有很強(qiáng)的實(shí)踐指導(dǎo)意義。

對(duì)于本次試驗(yàn)中個(gè)體散養(yǎng)戶口蹄疫免疫抗體水平較低的原因分析可能有：散養(yǎng)戶對(duì)家畜接種口蹄疫疫苗的重視程度不夠；目前口蹄疫等重大動(dòng)物疫病采用由村級(jí)動(dòng)物防疫員進(jìn)行免疫的模式，由于工作量大，在免疫過程中通常多采取口蹄疫及其他疫苗同時(shí)注射，其雖然配有疫苗保溫設(shè)備，但開啟后的疫苗經(jīng)過再次的運(yùn)輸與反復(fù)取用，可能產(chǎn)生相互干擾而影響免疫效果[5，6]。規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)有固定的專職獸醫(yī)，有科學(xué)的免疫程序，免疫效果普遍較好。為此，要進(jìn)一步加大對(duì)口蹄疫等重大疫病預(yù)防接種的宣傳力度，制定科學(xué)的免疫程序，加強(qiáng)對(duì)村級(jí)動(dòng)物防疫員這一防疫主力軍的培訓(xùn)力度，完善基層冷鏈建設(shè)等，只有從各個(gè)環(huán)節(jié)都重視起來，才能科學(xué)有效的防控口蹄疫等重大動(dòng)物疫情的發(fā)生，確保膠東半島無疫區(qū)建設(shè)評(píng)估工作順利完成。

參考文獻(xiàn)：

[1] 殷 震，劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)[M].第二版.北京：科學(xué)出版社，1997.

[2] 陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].第五版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2007.

[3] 劉俊林，祁淑云，馬軍武，等.液相阻斷ELISA在口蹄疫病毒抗體水平檢測(cè)中的應(yīng)用[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008（3）：18-20.

[4] VAN MAANEN C.A complex trapping blocking （CTB）ELISA，using monoclonal antibodies and detecting specifically antibodies directed against foot and mouth disease types A，O and C.Methodand characteristics[J]. Vet Microbiol，1990，24（2）：171-178.

[5] 董桂英.口蹄疫免疫存在的困難與對(duì)策[J].畜牧獸醫(yī)，2011（3）：50-51.

[6] 韓梅英，劉國華，牛長(zhǎng)義.牲畜口蹄疫疫苗防疫的難點(diǎn)及對(duì)策[J].中國動(dòng)物檢疫，2007，24（3）：41-42.

摘要：采用豬口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)煙臺(tái)市萊山區(qū)4個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)和5個(gè)生豬散養(yǎng)戶的105份免疫豬份血清樣品進(jìn)行ELISA抗體檢驗(yàn)，其中規(guī)模場(chǎng)平均抗體陽性率為92.5%，散養(yǎng)戶平均抗體陽性率為44.0%。針對(duì)本次獲得的口蹄疫血清學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果，提出了相應(yīng)的補(bǔ)救措施和科學(xué)防控意見，強(qiáng)化了豬的免疫、跟蹤監(jiān)測(cè)和生物安全措施。

關(guān)鍵詞：豬口蹄疫；ELISA ；抗體檢測(cè)；煙臺(tái)市萊山區(qū)

中圖分類號(hào)：S858.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1007-273X（2014）02-0054-02

口蹄疫（Foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病[1]，主要分為7個(gè)血清型，即O型、A型、C型、南非Ⅰ型、南非Ⅱ型、南非Ⅲ型和亞洲Ⅰ型，其中O型和A型分布最廣，危害最大[2]。該病歷來被世界各國所重視，在進(jìn)出口貿(mào)易中嚴(yán)格限制，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A類家畜傳染病之首，我國也將其列為Ⅰ類動(dòng)物疫病。

為有效防控口蹄疫發(fā)生，切實(shí)做好口蹄疫免疫無疫區(qū)建設(shè)，煙臺(tái)市萊山區(qū)自2013年以來進(jìn)一步加強(qiáng)了口蹄疫等重大動(dòng)物疫病的集中免疫力度。為科學(xué)評(píng)價(jià)免疫效果，2013年12月初，筆者隨機(jī)選取萊山區(qū)區(qū)內(nèi)的4個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)和5個(gè)生豬散養(yǎng)戶采集豬血清樣品共計(jì)105份，應(yīng)用液相阻斷ELISA檢測(cè)豬O型口蹄疫抗體，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果評(píng)估免疫效果，并提出相應(yīng)的防控建議。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品 105份血清樣品采自萊山區(qū)所屬的4個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)和5個(gè)散養(yǎng)戶。

1.1.2 口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)為2013111101。

1.2 方法

1.2.1 免疫抗體檢測(cè) 口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)方法按照試劑盒說明書進(jìn)行。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)以病毒抗原對(duì)照平均OD492nm值的50%為臨界值，被檢測(cè)抗體效價(jià)大于或等于1：128判為口蹄疫O型抗體陽性；抗體效價(jià)1：64～1：128，判為疑似；抗體效價(jià)小于或等于1：64，判為陰性。

2 結(jié)果與分析

應(yīng)用口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)規(guī)模豬場(chǎng)血清樣品80份，結(jié)果其口蹄疫O型抗體平均陽性率為 92.5%（表1），說明規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)口蹄疫免疫抗體的合格率較高。從表2可以看出檢測(cè)25份散養(yǎng)戶口蹄疫O型抗體平均陽性率僅為44.0%。

3 討論

液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)方法適用于動(dòng)物疫苗免疫抗體檢測(cè)，用于檢測(cè)豬、牛和羊等偶蹄動(dòng)物血清中口蹄疫抗體水平，以監(jiān)測(cè)動(dòng)物免疫抗體水平，了解動(dòng)物的免疫情況，制定合理的免疫程序[3]。液相阻斷ELISA具有高靈敏性，且Van[4]證實(shí)液相阻斷ELISA試驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性要高于血清中和試驗(yàn)。

口蹄疫是危害嚴(yán)重的人畜共患病，一旦流行發(fā)病就可造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失及惡劣的社會(huì)影響，因此要切實(shí)加強(qiáng)口蹄疫的預(yù)防和控制。煙臺(tái)市萊山區(qū)作為膠東半島無疫區(qū)建設(shè)核心區(qū)，2014年將迎接農(nóng)業(yè)部口蹄疫和高致病性禽流感免疫無疫區(qū)建設(shè)評(píng)估，但對(duì)于疫苗的免疫效果一直缺乏相應(yīng)的數(shù)據(jù)，本試驗(yàn)通過監(jiān)測(cè)煙臺(tái)市萊山區(qū)所屬的4個(gè)豬場(chǎng)和5個(gè)散養(yǎng)戶，對(duì)口蹄疫免疫效果的評(píng)價(jià)、免疫程序的調(diào)整及適時(shí)的補(bǔ)免提供了積極有效的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，具有很強(qiáng)的實(shí)踐指導(dǎo)意義。

對(duì)于本次試驗(yàn)中個(gè)體散養(yǎng)戶口蹄疫免疫抗體水平較低的原因分析可能有：散養(yǎng)戶對(duì)家畜接種口蹄疫疫苗的重視程度不夠；目前口蹄疫等重大動(dòng)物疫病采用由村級(jí)動(dòng)物防疫員進(jìn)行免疫的模式，由于工作量大，在免疫過程中通常多采取口蹄疫及其他疫苗同時(shí)注射，其雖然配有疫苗保溫設(shè)備，但開啟后的疫苗經(jīng)過再次的運(yùn)輸與反復(fù)取用，可能產(chǎn)生相互干擾而影響免疫效果[5，6]。規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)有固定的專職獸醫(yī)，有科學(xué)的免疫程序，免疫效果普遍較好。為此，要進(jìn)一步加大對(duì)口蹄疫等重大疫病預(yù)防接種的宣傳力度，制定科學(xué)的免疫程序，加強(qiáng)對(duì)村級(jí)動(dòng)物防疫員這一防疫主力軍的培訓(xùn)力度，完善基層冷鏈建設(shè)等，只有從各個(gè)環(huán)節(jié)都重視起來，才能科學(xué)有效的防控口蹄疫等重大動(dòng)物疫情的發(fā)生，確保膠東半島無疫區(qū)建設(shè)評(píng)估工作順利完成。

參考文獻(xiàn)：

[1] 殷 震，劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)[M].第二版.北京：科學(xué)出版社，1997.

[2] 陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].第五版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2007.

[3] 劉俊林，祁淑云，馬軍武，等.液相阻斷ELISA在口蹄疫病毒抗體水平檢測(cè)中的應(yīng)用[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008（3）：18-20.

[4] VAN MAANEN C.A complex trapping blocking （CTB）ELISA，using monoclonal antibodies and detecting specifically antibodies directed against foot and mouth disease types A，O and C.Methodand characteristics[J]. Vet Microbiol，1990，24（2）：171-178.

[5] 董桂英.口蹄疫免疫存在的困難與對(duì)策[J].畜牧獸醫(yī)，2011（3）：50-51.

[6] 韓梅英，劉國華，牛長(zhǎng)義.牲畜口蹄疫疫苗防疫的難點(diǎn)及對(duì)策[J].中國動(dòng)物檢疫，2007，24（3）：41-42.

摘要：采用豬口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)煙臺(tái)市萊山區(qū)4個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)和5個(gè)生豬散養(yǎng)戶的105份免疫豬份血清樣品進(jìn)行ELISA抗體檢驗(yàn)，其中規(guī)模場(chǎng)平均抗體陽性率為92.5%，散養(yǎng)戶平均抗體陽性率為44.0%。針對(duì)本次獲得的口蹄疫血清學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果，提出了相應(yīng)的補(bǔ)救措施和科學(xué)防控意見，強(qiáng)化了豬的免疫、跟蹤監(jiān)測(cè)和生物安全措施。

關(guān)鍵詞：豬口蹄疫；ELISA ；抗體檢測(cè)；煙臺(tái)市萊山區(qū)

中圖分類號(hào)：S858.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1007-273X（2014）02-0054-02

口蹄疫（Foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病[1]，主要分為7個(gè)血清型，即O型、A型、C型、南非Ⅰ型、南非Ⅱ型、南非Ⅲ型和亞洲Ⅰ型，其中O型和A型分布最廣，危害最大[2]。該病歷來被世界各國所重視，在進(jìn)出口貿(mào)易中嚴(yán)格限制，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A類家畜傳染病之首，我國也將其列為Ⅰ類動(dòng)物疫病。

為有效防控口蹄疫發(fā)生，切實(shí)做好口蹄疫免疫無疫區(qū)建設(shè)，煙臺(tái)市萊山區(qū)自2013年以來進(jìn)一步加強(qiáng)了口蹄疫等重大動(dòng)物疫病的集中免疫力度。為科學(xué)評(píng)價(jià)免疫效果，2013年12月初，筆者隨機(jī)選取萊山區(qū)區(qū)內(nèi)的4個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)和5個(gè)生豬散養(yǎng)戶采集豬血清樣品共計(jì)105份，應(yīng)用液相阻斷ELISA檢測(cè)豬O型口蹄疫抗體，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果評(píng)估免疫效果，并提出相應(yīng)的防控建議。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品 105份血清樣品采自萊山區(qū)所屬的4個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)和5個(gè)散養(yǎng)戶。

1.1.2 口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)為2013111101。

1.2 方法

1.2.1 免疫抗體檢測(cè) 口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)方法按照試劑盒說明書進(jìn)行。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)以病毒抗原對(duì)照平均OD492nm值的50%為臨界值，被檢測(cè)抗體效價(jià)大于或等于1：128判為口蹄疫O型抗體陽性；抗體效價(jià)1：64～1：128，判為疑似；抗體效價(jià)小于或等于1：64，判為陰性。

2 結(jié)果與分析

應(yīng)用口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)規(guī)模豬場(chǎng)血清樣品80份，結(jié)果其口蹄疫O型抗體平均陽性率為 92.5%（表1），說明規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)口蹄疫免疫抗體的合格率較高。從表2可以看出檢測(cè)25份散養(yǎng)戶口蹄疫O型抗體平均陽性率僅為44.0%。

3 討論

液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)方法適用于動(dòng)物疫苗免疫抗體檢測(cè)，用于檢測(cè)豬、牛和羊等偶蹄動(dòng)物血清中口蹄疫抗體水平，以監(jiān)測(cè)動(dòng)物免疫抗體水平，了解動(dòng)物的免疫情況，制定合理的免疫程序[3]。液相阻斷ELISA具有高靈敏性，且Van[4]證實(shí)液相阻斷ELISA試驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性要高于血清中和試驗(yàn)。

口蹄疫是危害嚴(yán)重的人畜共患病，一旦流行發(fā)病就可造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失及惡劣的社會(huì)影響，因此要切實(shí)加強(qiáng)口蹄疫的預(yù)防和控制。煙臺(tái)市萊山區(qū)作為膠東半島無疫區(qū)建設(shè)核心區(qū)，2014年將迎接農(nóng)業(yè)部口蹄疫和高致病性禽流感免疫無疫區(qū)建設(shè)評(píng)估，但對(duì)于疫苗的免疫效果一直缺乏相應(yīng)的數(shù)據(jù)，本試驗(yàn)通過監(jiān)測(cè)煙臺(tái)市萊山區(qū)所屬的4個(gè)豬場(chǎng)和5個(gè)散養(yǎng)戶，對(duì)口蹄疫免疫效果的評(píng)價(jià)、免疫程序的調(diào)整及適時(shí)的補(bǔ)免提供了積極有效的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，具有很強(qiáng)的實(shí)踐指導(dǎo)意義。

對(duì)于本次試驗(yàn)中個(gè)體散養(yǎng)戶口蹄疫免疫抗體水平較低的原因分析可能有：散養(yǎng)戶對(duì)家畜接種口蹄疫疫苗的重視程度不夠；目前口蹄疫等重大動(dòng)物疫病采用由村級(jí)動(dòng)物防疫員進(jìn)行免疫的模式，由于工作量大，在免疫過程中通常多采取口蹄疫及其他疫苗同時(shí)注射，其雖然配有疫苗保溫設(shè)備，但開啟后的疫苗經(jīng)過再次的運(yùn)輸與反復(fù)取用，可能產(chǎn)生相互干擾而影響免疫效果[5，6]。規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)有固定的專職獸醫(yī)，有科學(xué)的免疫程序，免疫效果普遍較好。為此，要進(jìn)一步加大對(duì)口蹄疫等重大疫病預(yù)防接種的宣傳力度，制定科學(xué)的免疫程序，加強(qiáng)對(duì)村級(jí)動(dòng)物防疫員這一防疫主力軍的培訓(xùn)力度，完善基層冷鏈建設(shè)等，只有從各個(gè)環(huán)節(jié)都重視起來，才能科學(xué)有效的防控口蹄疫等重大動(dòng)物疫情的發(fā)生，確保膠東半島無疫區(qū)建設(shè)評(píng)估工作順利完成。

參考文獻(xiàn)：

[1] 殷 震，劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)[M].第二版.北京：科學(xué)出版社，1997.

[2] 陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].第五版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2007.

[3] 劉俊林，祁淑云，馬軍武，等.液相阻斷ELISA在口蹄疫病毒抗體水平檢測(cè)中的應(yīng)用[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008（3）：18-20.

[4] VAN MAANEN C.A complex trapping blocking （CTB）ELISA，using monoclonal antibodies and detecting specifically antibodies directed against foot and mouth disease types A，O and C.Methodand characteristics[J]. Vet Microbiol，1990，24（2）：171-178.

[5] 董桂英.口蹄疫免疫存在的困難與對(duì)策[J].畜牧獸醫(yī)，2011（3）：50-51.

[6] 韓梅英，劉國華，牛長(zhǎng)義.牲畜口蹄疫疫苗防疫的難點(diǎn)及對(duì)策[J].中國動(dòng)物檢疫，2007，24（3）：41-42.