7種生物酵素對(duì)病蟲害的室內(nèi)防治作用初探

王麗麗，諶江華，柴偉綱，孫梅梅，姚紅燕

（寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江寧波 315040）

7種生物酵素對(duì)病蟲害的室內(nèi)防治作用初探

王麗麗，諶江華，柴偉綱，孫梅梅，姚紅燕

（寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江寧波 315040）

采用驅(qū)避、毒殺和平板對(duì)峙試驗(yàn)研究7種生物材料發(fā)酵液對(duì)朱砂葉螨和青枯勞爾氏菌的室內(nèi)防治作用。結(jié)果表明，大蒜、生姜和洋蔥發(fā)酵液對(duì)朱砂葉螨的驅(qū)避作用較好，處理后72h的驅(qū)避率分別達(dá)到68.0%，52.3%和53.3%；大蒜、丁香和洋蔥發(fā)酵液對(duì)朱砂葉螨的毒殺作用較好，處理后72h的校正死亡率分別為77.1%，65.7%和67.0%；生姜、大蒜發(fā)酵液對(duì)青枯勞爾氏菌的拮抗作用較好，處理后48h的抑菌圈直徑大小為3.0和2.2cm。綜合防蟲和抗病的能力，大蒜和生姜發(fā)酵液為較好的生物發(fā)酵材料。

生物酵素；朱砂葉螨；青枯勞爾氏菌

生物酵素是混合了糖和新鮮生物在密閉環(huán)境中經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的特殊液體的通俗稱法，生物酵素里含有大量的營(yíng)養(yǎng)元素及適量的微量元素和激素，能夠?yàn)橹参锾峁B(yǎng)分［1］；其特殊的pH環(huán)境可以有效抑制病蟲害的滋生；有的發(fā)酵液的次生代謝物質(zhì)可以有效地抑制病蟲害的發(fā)生［2］。生物酵素的制作過(guò)程不使用任何化學(xué)合成物質(zhì)，對(duì)環(huán)境友好，有利于生態(tài)環(huán)境的可持續(xù)發(fā)展。劉艷娜等［3］用雀草、紫蘇、薄荷、神香草等經(jīng)密閉發(fā)酵制成植物營(yíng)養(yǎng)液，研究證明其能提高梨葉片養(yǎng)分含量，改善營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)狀況，有效抑制梨黑星病、輪紋病、腐爛病的發(fā)生。瓜農(nóng)［4］用糖和白色酵母經(jīng)發(fā)酵后配合燒酒、米醋可以有效防治黃瓜細(xì)菌性斑點(diǎn)病、灰霉病和霜霉病的發(fā)生；果農(nóng)［5］用碎果皮、水等經(jīng)發(fā)酵用于果樹(shù)驅(qū)蟲取得了很好的效果，且取材方便，對(duì)環(huán)境不造成污染。由此可見(jiàn)，研究生物酵素在植物病蟲害防治中的作用具有重要的現(xiàn)實(shí)意義，其應(yīng)用技術(shù)將是綜合防治植物病蟲害的關(guān)鍵技術(shù)之一。本研究將朱砂葉螨作為試驗(yàn)害蟲、茄科作物青枯勞爾氏菌為試驗(yàn)病菌初步研究7種生物材料發(fā)酵液對(duì)病蟲害的室內(nèi)防治作用?，F(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試?yán)ハx及菌種

從田間采集朱砂葉螨（Tetranychus cinnabarinus）成蟲或若蟲300頭左右，放在25℃、75RH光照培養(yǎng)箱內(nèi)飼養(yǎng)1～2代后備用。

供試菌種為青枯勞爾氏菌（Ralstonia solanacearum）。來(lái)自南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省固體有機(jī)廢棄物資源化利用高技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，分離自番茄青枯病病土。

1.1.2 生物材料

生物材料有大蒜蒜頭、生姜根莖、韭菜莖葉、洋蔥鱗莖（以上購(gòu)自寧波歐尚超市）、丁香花蕾（購(gòu)自寧波馮存仁堂藥店）、夾竹桃葉片和夾竹桃花朵（采自寧波江東路邊）。

1.2 方法

1.2.1 生物材料的發(fā)酵

大蒜、洋蔥、韭菜、生姜、夾竹桃葉、夾竹桃花、丁香7種生物材料與紅糖按照質(zhì)量比3∶1的比例發(fā)酵15d，發(fā)酵完成后提取液體備用。

1.2.2 對(duì)朱砂葉螨的驅(qū)避試驗(yàn)

選取新鮮干凈、未受過(guò)污染的茄子葉片，剪成大小一致的葉蝶，以中間主葉脈為界用毛筆將葉碟一側(cè)均勻涂上一定稀釋倍數(shù)的生物酵素，另一側(cè)涂清水為對(duì)照，靜置陰干；將脫脂棉剪成小塊放置在培養(yǎng)皿中間，加水，然后將葉蝶置于脫脂棉上，將大小一致的30頭試蟲接于葉脈中部，培養(yǎng)皿包上Parafilm封口膜，以防試蟲逃出培養(yǎng)皿。每處理重復(fù)3次，置于25℃恒溫養(yǎng)蟲室內(nèi)。分別于處理后24，48，72h計(jì)數(shù)處理和對(duì)照的活蟲數(shù)，計(jì)算驅(qū)避率。

驅(qū)避率／%＝（對(duì)照區(qū)活蟲數(shù)-處理區(qū)活蟲數(shù)）／對(duì)照區(qū)活蟲數(shù)×100。

1.2.3 對(duì)朱砂葉螨的毒殺試驗(yàn)

選取新鮮干凈、未受過(guò)污染的茄子葉片，剪成大小一致的葉蝶，在一定稀釋倍數(shù)的生物酵素過(guò)濾液中或者水中（作為對(duì)照）浸泡5s后取出，將脫脂棉剪成小塊放置在培養(yǎng)皿中間，加水，待葉蝶自然風(fēng)干后置于脫脂棉上，將大小一致的試蟲30頭接于葉蝶上，培養(yǎng)皿外圈包上Parafilm封口膜，以防試蟲逃出培養(yǎng)皿。每處理重復(fù)3次，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)。分別于處理后24，48，72h計(jì)數(shù)生物酵素處理和對(duì)照的活蟲數(shù)，計(jì)算死亡率。死亡率／%＝（總蟲數(shù)-處理活蟲數(shù)）／總蟲數(shù)×100，校正死亡率／%＝（處理死亡率-對(duì)照死亡率）／（1-對(duì)照死亡率）×100。

1.2.4 對(duì)青枯菌的拮抗作用試驗(yàn)

制備青枯菌菌液。在TTC培養(yǎng)基上挑取有致病性的青枯勞爾氏菌菌落接入NA液體培養(yǎng)基內(nèi)，48h后將菌液倒入用紫外線殺菌過(guò)的猴頭噴霧器中備用。

拮抗作用試驗(yàn)。用0.22μm微孔過(guò)濾膜對(duì)生物酵素和去離子水（作為對(duì)照）進(jìn)行過(guò)濾除菌，用無(wú)菌槍頭將過(guò)濾后的生物酵素和去離子水200 μL放入打過(guò)孔的培養(yǎng)基中間，用猴頭噴霧器均勻噴灑青枯菌菌液，在30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，48 h后用直尺測(cè)定抑菌圈直徑的大小。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)朱砂葉螨的驅(qū)避作用

表1表明，大蒜、生姜、洋蔥發(fā)酵液對(duì)朱砂葉螨的驅(qū)避作用較好，72h對(duì)紅蜘蛛的驅(qū)避作用分別為68.0%，52.3%和53.3%；夾竹桃葉、丁香、韭菜發(fā)酵液對(duì)紅蜘蛛的驅(qū)避作用較差，其原因可能為這些生物材料的發(fā)酵物氣味較輕；夾竹桃花對(duì)紅蜘蛛反而有吸引作用，其可能原因?yàn)樵谡A竹桃花時(shí)同時(shí)摘取了花下的一部分嫩莖，紅蜘蛛喜食植物嫩莖的汁液。

2.2 對(duì)朱砂葉螨的毒殺作用

表2表明，大蒜、丁香和洋蔥發(fā)酵液對(duì)朱砂葉螨有較好的毒殺作用，試驗(yàn)后72h校正死亡率分別達(dá)到77.1%，65.7%和67.0%；韭菜對(duì)試蟲的毒殺作用較差，72h后的校正死亡率僅為45.1%。

表1 生物酵素對(duì)朱砂葉螨的驅(qū)避作用

表2 生物酵素對(duì)朱砂葉螨的毒殺作用

2.3 對(duì)青枯菌的拮抗作用

表4表明，生姜發(fā)酵液對(duì)青枯菌的平板抑制作用最強(qiáng)，48h后的抑菌圈直徑達(dá)到3.0cm；大蒜發(fā)酵液48h后的抑菌圈直徑為2.2cm；夾竹桃花和夾竹桃葉發(fā)酵液對(duì)青枯菌均有一定的拮抗作用，但48h后的抑菌圈直徑均小于2.0cm；丁香、洋蔥、韭菜對(duì)青枯菌沒(méi)有抑制作用。

表3 生物酵素對(duì)青枯菌的平板對(duì)峙試驗(yàn)結(jié)果

3 小結(jié)與討論

綜合7種生物材料發(fā)酵物對(duì)朱砂葉螨的驅(qū)避、毒殺作用和對(duì)青枯勞爾氏菌的平板對(duì)峙試驗(yàn)，大蒜和生姜發(fā)酵液對(duì)防治蟲害和病害綜合效果較好。其原因可能為：一是大蒜和生姜本身刺激性氣味較重，發(fā)酵后更是將這些具有刺激性氣味的化合物釋放出來(lái)了，對(duì)害蟲具有較強(qiáng)的趨避作用；二是大蒜有多種含硫化合物［6］，這些化合物具有抗菌或殺蟲的作用，生姜也含有大量具有抗病蟲害作用的化合物［7］，大蒜和生姜在發(fā)酵過(guò)程中這些化合物被充分釋放出來(lái)了；三是本研究中發(fā)酵用的是新鮮生物材料，新鮮生物表面含有大量的有益細(xì)菌、真菌等，在發(fā)酵過(guò)程中這些有益生微生物可以利用可溶性糖作為碳源，快速繁殖，使發(fā)酵后的發(fā)酵液含有較高水平的微生物數(shù)量，這些微生物可能對(duì)有害微生物起積極的抑制作用。

［1］ 代明亮，李松濤，韓振海，等.植物源營(yíng)養(yǎng)液對(duì)“雪青梨”生長(zhǎng)及果實(shí)品質(zhì)的影響［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，13（5）：19－23.

［2］ 耿健，崔楠楠，張杰，等.噴施芳香植物源營(yíng)養(yǎng)液對(duì)梨樹(shù)生長(zhǎng)、果實(shí)品質(zhì)及病害的影響［J］.生態(tài)學(xué)報(bào)，2011，31（5）：1285－1294.

［3］ 劉艷娜，崔楠楠，張杰，等.芳香植物源營(yíng)養(yǎng)液對(duì)梨樹(shù)的抑菌和營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，44（19）：3981－3990.

［4］ 范風(fēng)翠.紅糖發(fā)酵液防治黃瓜三大?。跩］.莊稼醫(yī)院，2000（10）：11.

［5］ 康雪琴.紅糖、果皮加水能給果樹(shù)驅(qū)蟲［EB／OL］.山西晚報(bào)，2011-07-11（27）.

［6］ 孫翠玲，于大勝.大蒜素的提取及其應(yīng)用［J］.廣州化工，2009，37（6）：65－67.

［7］ 葉剛颯，余書洪，楊衛(wèi)芳，等.生姜的有效成分與藥理作用研究進(jìn)展［J］.浙江樹(shù)人大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，11（3）：24－27.

（責(zé)任編輯：張才德）

S476

A

0528-9017（2014）08-1209-02

文獻(xiàn)著錄格式：王麗麗，諶江華，柴偉綱，等.7種生物酵素對(duì)病蟲害的室內(nèi)防治作用初探［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（8）：1209－1211.

2014-05-14

寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院院長(zhǎng)基金（2013-2014）

王麗麗（1987－），女，浙江紹興人，助理農(nóng)藝師，主要從事生態(tài)環(huán)境工作。E-mail：wanglili531＠163.com。