生鮮乳快速檢測(cè)技術(shù)及常用方法

申惠敏1，賈秀珍2

（1.山西省長(zhǎng)治市畜牧獸醫(yī)局，山西長(zhǎng)治046000；2.山西省長(zhǎng)治市城區(qū)農(nóng)林委，山西長(zhǎng)治046000）

近些年來(lái)，相關(guān)政府機(jī)構(gòu)做了大量工作改造收奶站，以質(zhì)論價(jià)，嚴(yán)厲打擊摻假使假，使鮮奶質(zhì)量有了明顯改善。但鮮奶摻假是一個(gè)普遍存在的問(wèn)題，這些行為不僅嚴(yán)重影響了鮮奶的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，也危害了消費(fèi)者的健康，如何提高原料奶的質(zhì)量仍是一個(gè)值得注意的問(wèn)題。

生鮮乳是液體乳、乳粉和其他乳制品的源頭，其質(zhì)量好壞非常重要，直接影響乳制品質(zhì)量安全。以下是常見(jiàn)的生鮮乳快速檢測(cè)技術(shù)及方法：

1 堿類(lèi)物質(zhì)快速檢測(cè)

1.1 牛奶中摻堿類(lèi)物質(zhì)的危害 在牛奶中摻入堿類(lèi)物質(zhì)的目的是為掩蓋牛奶酸敗現(xiàn)象、中和牛奶中的乳酸、降低牛奶酸度、防治牛奶因酸敗而凝結(jié)；通常以摻純堿（Na2CO3）或小蘇打（NaHCO3）為多。加堿后牛奶口感差，而且便于細(xì)菌的生長(zhǎng)，同時(shí)破壞牛奶中某些維生素。

1.2 摻堿快速檢測(cè)原理 正常牛乳呈微酸性，加堿后變?yōu)閴A性，可使溴麝香草酚藍(lán)指示劑變色，由顏色深淺的不同，判斷加堿量的多少。此法既簡(jiǎn)便、快速，又靈敏。奶站、乳制品生產(chǎn)企業(yè)多采用酸度滴定法、溴麝香草酚藍(lán)試管法或溴麝香草酚藍(lán)試紙法。目前我國(guó)執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)是《乳與乳制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》GB/T 5009.46-2003（即溴麝香草酚藍(lán)試管法）。

1.3 快速檢測(cè)步驟 配制0.4 g/L溴麝香草酚藍(lán)-乙醇溶液，變色范圍 pH 6.0～7.6（黃→藍(lán)），反應(yīng)很靈敏，加入少量的堿就可以使該指示液變色，如果含堿過(guò)多顏色就加深至深青色。量取5mL試樣，置試管中，將試管保持傾斜位置，沿管壁小心加入5滴溴麝香草酚藍(lán)-乙醇溶液；將試管輕輕傾斜轉(zhuǎn)2～3圈，使其更好地相互接觸，切勿使溶液相互混合，然后將試管垂直放置，2min后根據(jù)環(huán)層指示劑顏色的特征確定結(jié)果；同時(shí)用未摻堿的鮮乳做空白對(duì)照試驗(yàn)，或者用小蘇打配制的陽(yáng)性樣品進(jìn)行對(duì)照。

2 生鮮乳β-內(nèi)酰胺類(lèi)快速檢測(cè)

2.1 檢測(cè)步驟 調(diào)節(jié)孵育器溫度至56℃；將牛奶樣品搖勻；取出相應(yīng)數(shù)量的檢測(cè)條，水平放置在孵育器上，小心揭開(kāi)貼膜至指示線處；用移液器取300μL牛奶樣品，緩慢豎直滴加至檢測(cè)條的凹槽中；將貼膜重新封好，可同時(shí)操作四個(gè)樣品，要在60 s內(nèi)完成四個(gè)樣品的操作；蓋上孵育器塑料蓋，自動(dòng)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)；孵育8min結(jié)束后，蜂鳴器響動(dòng)，取出檢測(cè)條，3 min內(nèi)判讀結(jié)果。

2.2 判讀標(biāo)準(zhǔn) 首先查看控制線（C線），如果不顯色，本次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。在控制線（C線）正常顯色的情況下，按以下標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果：

如果檢測(cè)線（T線）的顏色和控制線（C線）的顏色一致或者比控制線顏色深，則判斷樣品為陰性。如果檢測(cè)線（T線）的顏色不可見(jiàn)或者比控制線（C線）顏色淺時(shí)，則判斷樣品為陽(yáng)性。

3 生鮮乳β-內(nèi)酰胺酶類(lèi)快速檢測(cè)

3.1 檢測(cè)步驟 配制陽(yáng)性質(zhì)控溶液；調(diào)節(jié)孵育器溫度至56℃；取陽(yáng)性質(zhì)控溶液50μL～1mL的離心管中，再加入350μL待檢測(cè)樣品充分混勻，靜置20～30min，配成待檢溶液；取出相應(yīng)數(shù)量的檢測(cè)條，水平放置在孵育器上，小心揭開(kāi)貼膜至指示線處；用移液器取300μL已配好的待檢溶液，緩慢豎直滴加至檢測(cè)條的凹槽中；將貼膜重新封好，可同時(shí)操作四個(gè)樣品，要在75 s內(nèi)完成四個(gè)樣品的操作；蓋上孵育器塑料蓋，自動(dòng)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)；孵育8min結(jié)束后，蜂鳴器響動(dòng)，取出檢測(cè)條，3min內(nèi)判讀結(jié)果。

3.2 判定標(biāo)準(zhǔn) 首先查看控制線（C線），如果不顯色，本次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。在控制線（C線）正常顯色的情況下，按以下標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果：

如果檢測(cè)線（T線）的顏色和控制線（C線）的顏色一致或者比控制線顏色深，則判斷樣品為陽(yáng)性，也就是牛奶樣品中含有檢測(cè)限水平或者高出檢測(cè)限水平的β內(nèi)酰胺酶，樣品中含有β-內(nèi)酰胺酶可降解質(zhì)控液中的青霉素G。

如果檢測(cè)線（T線）的顏色不可見(jiàn)或者比控制線（C線）顏色淺，則判斷樣品為陰性，即被檢的牛奶樣品中不含β-內(nèi)酰胺酶，不能分解質(zhì)控液中的青霉素G。

3.3 注意事項(xiàng) 如果個(gè)別牛奶或奶粉因?yàn)槿橹虻鞍缀亢芨撸瑢?dǎo)致檢測(cè)條的質(zhì)控線（C線，上面的檢測(cè)線）不出現(xiàn)顏色，請(qǐng)離心后除去脂肪蛋白質(zhì)再進(jìn)行檢測(cè)。

4 生鮮乳三聚氰胺快速檢測(cè)

4.1 生鮮乳處理 用干燥、潔凈的離心管或適當(dāng)容器盛放樣品，吸取1mL樣品于離心管中，根據(jù)所需檢測(cè)限檢測(cè)。

4.2 檢測(cè)步驟 用滴管吸取待檢樣品溶液，垂直滴加3～4滴（100μL）于加樣孔中，加樣的同時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，5～10min讀取結(jié)果。

4.3 結(jié)果判定 C、T線均顯色。表示樣品中不含有待檢測(cè)物質(zhì)或其濃度低于檢測(cè)限；檢測(cè)T線不顯色，則表示樣品中待檢測(cè)物質(zhì)濃度高于檢測(cè)限；質(zhì)控C線未顯色，表明操作過(guò)程不正確或檢測(cè)卡已失效。

4.4 注意事項(xiàng) 檢測(cè)卡應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)一次性使用，拆開(kāi)包裝后盡量在一個(gè)小時(shí)內(nèi)用完；使用前將檢測(cè)卡和待檢樣本恢復(fù)至室溫；請(qǐng)勿觸摸檢測(cè)卡中央的白色膜面；滴管不可混用，以免交叉污染。

檢測(cè)時(shí)避免陽(yáng)光直射和電風(fēng)扇直吹；請(qǐng)勿使用自來(lái)水、純化水或蒸餾水作為陰性對(duì)照；如樣品非常粘稠，有可能導(dǎo)致樣品無(wú)法層析，此時(shí)可適當(dāng)多滴1～2滴。