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    香樟籽油的響應面優(yōu)化提取及其抗氧化研究

    2014-06-11 02:44:48耿敬章劉軍海
    中國糧油學報 2014年2期
    關鍵詞:籽油香樟超臨界

    耿敬章 劉軍海

    (陜西理工學院生物科學與工程學院1, 漢中 723000)(陜西理工學院化學與環(huán)境科學學院2, 漢中 723000)

    香樟 (Cinnamomumcamphora),別名樟樹、芳樟等,屬樟科,樟屬植物, 主要分布在長江以南地區(qū)[1]。樟樹是一種用途廣泛的經(jīng)濟樹種,其根莖、枝葉可以提煉樟腦和樟腦油等[2]。此外香樟含有揮發(fā)油,尤其以籽中為多,其脂肪酸組成以癸酸、月桂酸等中碳鏈脂肪酸為主,占90%左右[3]。香樟籽有一定的生理作用,能散寒祛濕,行氣止痛,治吐瀉,胃寒腹痛,腳氣,腫毒,具有降血脂及降膽固醇等作用[4-5]?!毒V目拾遺》記載:“磨涂腫毒;治中酒、心胃疼皆效?!薄稄V西中藥志》記載:“治嘔吐,水瀉,腹痛?!薄逗纤幬镏尽酚涊d:“利尿,解酒”[4]。研究以香樟籽為原料,對香樟籽油的響應面提取工藝進行優(yōu)化,并對其體外抗氧化活性進行研究,以期為香樟籽的綜合利用提供理論基礎。

    1 材料及方法

    1.1 原料

    香樟籽:采集于陜西理工學院香樟路,將采集到的香樟籽洗凈后烘干并用粉碎機粉碎后備用;CO2,食用級。

    1.2 試驗儀器與設備

    HA231-50-06-C型超臨界C02流體萃取裝置:華安超臨界萃取有限公司;RE52-AA旋轉蒸發(fā)儀:廣東凱文設備公司;FY135中藥草粉碎機:天津市泰斯特儀器有限公司;TU-1221紫外-可見分光光度計:日本島津;TDL-40B型飛鴿牌離心機:上海安亭;Al204型電子天平:梅特勒-托利多儀;DHF-9055A型電熱鼓風干燥箱:上海一恒。

    1.3 試驗方法

    1.3.1 香樟籽油超臨界CO2提取工藝流程

    香樟籽→烘干→破碎→去殼→篩分→稱量→裝于萃取器→控制CO2流量→設定壓力、溫度和時間→超臨界CO2提取萃取→分離→精制香樟籽油[4]

    1.3.2 香樟籽油得率計算

    1.3.3 還原力的測定

    采用普魯士藍法[5]。

    1.3.4 DPPH·清除率的測定

    將香樟籽油溶液取0.1 mL與3 mL120 μmol/L的DPPH·溶液加入同一試管中,搖勻,在黑暗中放置30 min,以無水乙醇為空白在517 nm測定其吸光度[6],并按下式計算其清除率:

    清除率=[(Ac-Ai) /Ac]×100%

    式中:Ac為無水乙醇加DPPH·溶液的吸光度;Ai為香樟籽油加DPPH·溶液的吸光度。

    2 結果與分析

    2.1香樟籽油的超臨界CO2提取條件的優(yōu)化試驗

    2.1.1 CO2流量對香樟籽油萃取得率的影響

    設定萃取壓力為30 MPa,溫度為50 ℃,萃取時間為2.5 h,研究20、25、30、35、40、45 kg/h 6個梯度的CO2流量對香樟籽油萃取得率的影響[7]。按方法1.3.1提取香樟籽油。由圖1可以看出,CO2流量應控制在35 kg/h左右較為適宜。

    圖1 CO2流量對香樟籽油得率的影響

    2.1.2 萃取壓力對香樟籽油萃取得率的影響

    設定CO2流量為35 kg/h,溫度為50 ℃,萃取時間為2.5 h,研究20、25、30、35、40、45 MPa 6個梯度的萃取壓力對香樟籽油萃取得率的影響。按方法1.3.1提取香樟籽油。由圖2可以看出,萃取壓力應控制在30 MPa左右較為適宜。

    圖2 萃取壓力對香樟籽油得率的影響

    2.1.3 萃取時間對香樟籽油萃取得率的影響

    設定CO2流量為35 kg/h,溫度為50 ℃,萃取壓力為30 MPa,研究1、1.5、2、2.5、3、3.5 h 6個梯度的萃取時間對香樟籽油萃取得率的影響[8]。按方法

    圖3 萃取時間對香樟籽油得率的影響

    1.3.1提取香樟籽油。由圖3可以看出,萃取時間應控制在2.5 h左右較為適宜。

    2.1.4 溫度對香樟籽油萃取得率的影響

    設定CO2流量為35 kg/h,萃取時間為2.5 h,萃取壓力為30 MPa,研究40、45、50、55、60、65 ℃ 6個梯度的溫度對香樟籽油萃取得率的影響[9]。按1.3.1方法提取香樟籽油。由圖4可以看出,溫度應控制在50 ℃左右較為適宜。

    圖4 溫度對香樟籽油得率的影響

    2.1.5 響應面法優(yōu)化香樟籽油超臨界CO2萃取工藝條件

    在單因素試驗的基礎上,選取CO2流量、萃取壓力、萃取時間、溫度各因素的最優(yōu)試驗范圍,研究按照表1的因素水平表,以香樟籽油得率為響應值,采用響應面分析法對其進行優(yōu)化,以確定香樟籽油得率超臨界CO2萃取最佳工藝條件。試驗結果、回歸方程圖及響應面方差分析結果見表2、表3。

    表1 試驗因素水平及編碼

    根據(jù)香樟籽油提取的試驗結果,由響應面分析法得出關于香樟籽油提取率的二次回歸擬合方程:

    提取率=30.09+0.80A+0.42B+0.92C-1.46D-3.02AB+0.71AC+2.35AD-0.91BC+0.57BD-1.36CD-2.25A2-3.22B2-2.52C2-1.62D2(式中:A為CO2流量,B為萃取壓力,C為萃取時間,D為溫度)

    對香樟籽油提取的試驗結果進行多元回歸分析,由回歸方程各項的方差分析結果(表3)可以看出,Model的F值為7 067.70,P值為<0.000 1,表明Model極顯著,同時CO2流量、萃取壓力、萃取時間和溫度都是顯著因素, CO2流量與萃取壓力、萃取時間、溫度的交互作用都顯著,萃取壓力與萃取時間、溫度的交互作用也都顯著,萃取時間與溫度的交互作用也顯著。而失擬項的F值為4.26,P值為0.102 0,說明了該模型與香樟籽油提取實際情況擬合程度比較好,可以預測香樟籽油提取最佳條件。根據(jù)回歸分析結果(表3),做出相應曲面圖,見圖5~圖10。

    表2 香樟籽油超臨界CO2萃取工藝設計試驗及結果

    表3 回歸方程各項的方差分析

    注:“P>F”<0.05,代表研究因素為顯著因素。

    圖5 CO2流量與萃取壓力交互作用對得率影響的響應面圖

    圖6 CO2流量與萃取時間交互作用對得率影響的響應面圖

    圖7 CO2流量與溫度交互作用對油得率影響的響應面圖

    圖8 萃取壓力與萃取提取時間交互作用對油得率影響的響應面圖

    根據(jù)香樟籽油提取試驗結果和回歸方程各項的方差分析,由響應面分析法優(yōu)化出香樟籽油提取最佳工藝條件,即CO2流量為36.13 kg/h,萃取壓力為29.88 MPa,萃取時間為2.61 h,溫度為49.25 ℃。

    圖9 萃取壓力與溫度交互作用對油得率影響的響應面圖

    圖10 萃取時間與溫度交互作用對油得率影響的響應面圖

    2.1.6 驗證試驗

    根據(jù)響應面設計法優(yōu)化的結果,選擇香樟籽油提取率較高的3個較優(yōu)條件,將這3個試驗條件(試驗1~3)和響應面設計法優(yōu)化得出的較優(yōu)條件(試驗4)一起進行驗證試驗。試驗結果見表4。

    表4 驗證試驗設計表

    由表4可知,響應面設計法優(yōu)化得出的較優(yōu)條件(試驗4)香樟籽油提取率最高,因此香樟籽油提取最佳工藝條件為CO2流量為36.1 kg/h,萃取壓力為29.9 MPa,萃取時間為2.6 h,溫度為49.3 ℃。

    2.2 香樟籽油體外抗氧化活性研究

    2.2.1 香樟籽油還原力測定

    由圖11可知,隨著香樟籽油濃度的增加,吸光度也不斷增大,相應的還原力也增強。當香樟籽油質量濃度大于0.3 mg/mL時,香樟籽油的吸光度明顯高于對照物VC,表明香樟籽油具有較強的還原能力。

    圖11 香樟籽油還原力

    2.2.2 香樟籽油對DPPH·的清除能力

    由圖12可知,香樟籽油清除DPPH·的能力較強,明顯高于對照組VC;在試驗濃度范圍內,隨著濃度的增加,其清除能力也逐漸增強,呈現(xiàn)較好的量效關系。因此,香樟籽油具有較好的清除DPPH·能力。

    圖12 香樟籽油對DPPH·的清除能力

    3 結論

    香樟籽油超臨界CO2萃取最佳工藝條件為CO2流量為36.1 kg/h,萃取壓力為29.9 MPa,萃取時間為2.6 h,溫度為49.3 ℃。香樟籽油具有較好的還原能力,明顯高于對照組VC,而且對DPPH·有較強清除能力,隨著香樟籽油濃度的增加,其清除能力逐漸增強,明顯高于對照組VC。

    [1]黃喜根, 任健敏, 劉曉庚, 等. 樟樹籽核油的開發(fā)與利用研究[J]. 林產化工通訊, 2002, 36(3): 19-21

    [2]李林松,羅永明.井岡山地區(qū)樟樹果揮發(fā)性成分的分析[J],江西中醫(yī)學院學報,2005,17(3):36-37

    [3]黃喜根,任健敏,劉曉庚,李艷霞,龔霞.樟樹籽核油的開發(fā)與利用研究[J],林產化工通訊,2002, 36,(3):19-21

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    [8]錢國平, 楊亦文 ,吳彩娟. 超臨界CO2從黃花蒿中提取青蒿素的研究[J]. 化工進展, 2005, 24(3): 286-290

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