IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR在大腸癌中的表達及意義

張序朋，周風舉，申興斌

(承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院病理科，河北承德 06700)

大腸癌是最常見的消化道惡性腫瘤，發(fā)病率、死亡率均很高，近年來還在迅速上升，其中主要是結腸癌發(fā)病增多[1-2]。大腸癌的發(fā)生、生長、浸潤和轉移是一個非常復雜的過程，涉及多種癌基因、抑癌基因和錯配修復基因的參與，是遺傳、環(huán)境、免疫和內(nèi)分泌等多種因素共同作用的結果[3]。胰島素樣生長因子-Ⅱ(insulin-like growth factor-Ⅱ，IGF-Ⅱ)可促進多種細胞增殖、抑制凋亡，其生物學活性主要通過胰島素樣生長因子-Ⅰ受體(insulinlike growth factor-I receptor，IGF-IR)介 導[4]。IGF-IR是一種酪氨酸激酶(RTK)受體，與IGF結合后發(fā)揮介導細胞增殖、抑制細胞凋亡的作用[5]。有研究表明IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR的高表達及相互作用在細胞分化和瘤變方面具有重要作用，并且與腫瘤的侵襲性有關，過度表達IGF-ⅠR的癌細胞表現(xiàn)出強烈的轉移趨勢[6]。但IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR是否參與大腸癌的發(fā)生發(fā)展以及具體機制，目前尚不清楚。本研究采用Maxvision免疫組化法檢測IGF-Ⅱ及其受體IGF-ⅠR在大腸癌中的表達情況，探討二者在大腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用和意義。

1 材料與方法

1.1 材料 承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院2012年1月-2012年12月經(jīng)手術切除并經(jīng)病理確診、存檔的大腸癌病例(CC)50例以及距離腫瘤＞10cm的癌旁正常大腸組織(NM)50例，男33例、女17例，年齡35-81歲，平均(58±5.4)歲，其中直腸腫瘤27例、結腸腫瘤23例。同期大腸腺瘤(Ad)患者20例，男11例、女9例，年齡31-62歲，平均(47±4.2)歲。全部標本經(jīng)4%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，5μm連續(xù)切片。所有病例均為首發(fā)病例，術前未經(jīng)放療、化療和生物學治療。

1.2 方法 采用免疫組織化學MaxVision法檢測IGF-Ⅱ、IGF-IR的表達情況。兔抗IGF-Ⅱ(1:100)、IGFIR(1:100)抗體，武漢博士德生物工程有限公司;即用型MaxVision羊抗兔試劑盒、即用型DAB顯色試劑盒，福州邁新生物技術開發(fā)有限公司。操作步驟按說明書進行，并設陽性對照和PBS液陰性對照。IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR均以細胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細胞。

1.3 結果判定 每張切片隨機選取5個高倍鏡視野(×400)，記數(shù)300個腫瘤細胞，并采用Volm雙評分法判定結果。雙評分法:按陽性細胞百分率(A值)評分:＜5%為0分，5%-25%為1分，25%-50%為2分，＞50%為3分;按染色強度(B值)評分:不著色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。以A值與B值的和判斷結果，陰性(-):0分，弱陽性(+):1-2分，中度陽性(++):3-4分，強陽性(+++):5-6分。

1.4 統(tǒng)計分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計處理，等級數(shù)據(jù)采用秩和檢驗，相關性分析采用Spearman等級相關分析。

2 結果

2.1 不同大腸組織IGF-Ⅱ蛋白的表達情況 IGF-Ⅱ蛋白陽性表達主要位于細胞漿，為棕黃色顆粒。正常大腸黏膜IGF-Ⅱ表達較少，且為弱陽性;大腸癌組織IGF-Ⅱ蛋白的表達較強，染色顆粒粗大。大腸正常黏膜、腺瘤和大腸癌IGF-Ⅱ的陽性表達率逐漸升高，大腸癌、大腸腺瘤IGF-Ⅱ蛋白的表達水平明顯高于大腸正常黏膜(P＜0.05)。見表1。

表1 不同大腸組織IGF-Ⅱ的表達情況

2.2 不同大腸組織IGF-IR蛋白的表達情況 IGF-IR蛋白陽性表達主要位于細胞漿和細胞膜。大腸正常黏膜、腺瘤和大腸癌IGF-IR的陽性表達率逐漸升高，且兩兩比較差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 不同大腸組織IGF-IR的表達情況

2.3 大腸癌組織IGF-Ⅱ與IGF-IR表達的相關性 大腸癌組織IGF-Ⅱ與IGF-ⅠR的表達呈正相關，隨著大腸癌IGF-Ⅱ陽性表達的增強，IGF-ⅠR的表達逐漸升高(r=0.585，P＜0.01)。

3 討論

研究發(fā)現(xiàn)，多種腫瘤如結腸癌、肝癌和胚源性腫瘤等均有IGF的異常激活和表達，說明IGF-Ⅱ過度表達可使細胞逃避凋亡，從而過度增殖形成腫瘤[7]。IGF-Ⅱ與IGFIR結合后，受體酪氨酸發(fā)生磷酸化，激活細胞內(nèi)的磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)，通過一系列蛋白激酶的級聯(lián)反應，促進細胞增殖和分化，進而參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展[8-9]。

本研究發(fā)現(xiàn)，大腸癌IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR的表達明顯高于正常大腸黏膜，且正常大腸黏膜、大腸腺瘤、大腸癌，IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR的表達逐漸升高;相關分析結果顯示，大腸癌IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR的表達呈正相關。

Pavelic等[10]的研究發(fā)現(xiàn)，切斷IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR mRNA的轉錄和蛋白的表達能有效減少腫瘤細胞的增長;動物實驗也證實應用抗IGF-ⅠR單克隆抗體封閉IGF-ⅠR可以明顯抑制腫瘤細胞的增殖和轉移。本研究提示IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR與大腸癌的發(fā)生發(fā)展有關，并且二者具有協(xié)同作用。因此后續(xù)的研究將探討，降低IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR的表達、或者阻斷IGF-Ⅱ與其受體IGF-ⅠR結合，是否對大腸癌的生長具有抑制作用，以期為大腸癌的靶向治療和改善預后提供新思路。

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