板陳黃口服液的研究開發(fā)與應(yīng)用

要瑞麗

支原體引起的豬呼吸道疾病，一般發(fā)病率高，病程稽延，在家畜中支原體呼吸道感染更為普遍，導(dǎo)致生產(chǎn)效能減低，因此造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中支原體對(duì)肺部的損害干擾著制藥業(yè)中對(duì)遠(yuǎn)期藥效研究的評(píng)價(jià)。養(yǎng)豬重點(diǎn)是要預(yù)防如流感、豬瘟、腹瀉等疾病，目前豬群普遍處于“亞健康狀態(tài)”，許多豬場(chǎng)對(duì)主要防疫措施如實(shí)施“全進(jìn)全出”、降低飼養(yǎng)密度、加強(qiáng)通風(fēng)等都很重視，但忽視造成應(yīng)激的各個(gè)環(huán)節(jié)，如溫差對(duì)豬群產(chǎn)生的應(yīng)激，豬群轉(zhuǎn)群和換料時(shí)間、方法、喂養(yǎng)程序等，因此作為豬場(chǎng)管理者要更新獸醫(yī)防疫觀念，及時(shí)修改易產(chǎn)生應(yīng)激的防疫管理制度。有專家提出，危害養(yǎng)豬業(yè)最大的豬呼吸道綜合征，對(duì)豬場(chǎng)造成的損失相當(dāng)巨大，以肺部病變?yōu)槔?，每天豬的增長(zhǎng)將降低40～50 g，相當(dāng)于每天1.5元的損失，而嚴(yán)重的傳染性萎縮性鼻炎相當(dāng)于每天30元的損失。另?yè)?jù)國(guó)外資料統(tǒng)計(jì)，在用藥成本中有56%左右是用于呼吸道疾病防治的。近年來呼吸道疾病已成為各大養(yǎng)豬場(chǎng)最常見、危害最嚴(yán)重的疾病之一，主要癥狀為發(fā)熱、咳嗽和呼吸困難，生長(zhǎng)緩慢或停滯。因此控制好豬的呼吸道疾病是豬場(chǎng)盈利的關(guān)鍵所在，幾乎所有的豬場(chǎng)都存在肺炎支原體疾病，因此向豬場(chǎng)養(yǎng)殖場(chǎng)提供一種清熱解毒、止咳平喘、理氣化痰，主治家畜肺熱咳嗽、生物利用度高、使用方便、安全綠色天然的中獸藥口服制劑已形成必然趨勢(shì)。

1疫苗及化學(xué)藥對(duì)家畜支原體疾病的防控分析

目前多數(shù)豬場(chǎng)采用疫苗手段防治，但由于存在能夠損害免疫系統(tǒng)的病毒，如豬繁殖呼吸障礙綜合征病毒（PRRSV）、圓環(huán)病毒Ⅱ型（PCV-2），導(dǎo)致繼發(fā)細(xì)菌感染，侵害呼吸道，損傷肺臟，最終降低了疫苗的預(yù)防效果。許多抗生素對(duì)支原體有效，如沃尼妙林、泰妙菌素、泰樂菌素、林可霉素，但要對(duì)付所有細(xì)菌時(shí)抗菌譜仍顯得不夠廣泛。這就是目前抗支原體藥物與其他藥物進(jìn)行聯(lián)合使用的原因，通過與金霉素、磺胺聯(lián)合使用，擴(kuò)大了抗菌譜。如果采用中醫(yī)中藥治療家畜呼吸道感染，防治支原體的發(fā)生既保證了動(dòng)物健康和快速的生長(zhǎng)，又解決養(yǎng)豬戶的一個(gè)主要問題，而且中藥無藥殘。

2板陳黃口服液的研究現(xiàn)狀及進(jìn)展

板陳黃口服液是以板藍(lán)根、麻黃和陳皮共三種中藥飲片為原料，經(jīng)中藥炮制、浸漬、提取、濃縮、回收乙醇、精制、過濾等工藝制成的中獸藥新藥口服溶液劑，是純天然植物中藥制劑，性狀為棕黃色至棕紅色的澄清溶液；pH值為3.5～5.5；每1 mL含鹽酸麻黃堿（C10H15NO·HCl）計(jì)，不得少于2 mg；規(guī)格為100 mL /瓶，相當(dāng)于原生藥50 g；其功能為清熱解毒、止咳平喘、理氣化痰，主治家畜肺熱咳嗽，可廣泛用于支原體引起的家畜呼吸道疾病預(yù)防和治療。板陳黃注射液已收載于《農(nóng)業(yè)部公告第1759號(hào)》，但目前尚未有口服液和其它劑型的研究開發(fā)和上市銷售。

3板陳黃口服液研究背景及立題依據(jù)

家畜內(nèi)科學(xué)呼吸器官的結(jié)構(gòu)與生理功能研究表明，上呼吸道為鼻、副鼻竇、喉和氣管，下呼吸道為支氣管和肺，其功能為進(jìn)行體內(nèi)外間的氣體交換，家畜呼吸器官的防御機(jī)能為肺泡的巨噬細(xì)胞及全體和局部的抗體免疫系統(tǒng)，全身免疫為lgM和lgG，局部免疫為lgA和lgE，其中l(wèi)gA具有阻抑黏附、中和病毒、免疫排出作用；lgE具有激活肥大細(xì)胞，釋放血管活性胺和趨化因子，增加血管通透性。家畜呼吸器官常見的致病因素歸納起來主要有三個(gè)方面，其一為病原微生物，包括細(xì)菌、病毒、衣原體、支原體、真菌和蠕蟲等；其二為粉塵、煙霧、化學(xué)刺激劑、過敏原（變應(yīng)原）和有害氣體均易隨空氣進(jìn)入呼吸道和肺部；其三為條件的變化，比如突然更換日糧、斷奶、寒冷、賊風(fēng)侵襲、環(huán)境潮濕、通風(fēng)換氣次數(shù)不當(dāng)、高濃度的氨氣及不同年齡的動(dòng)物混群飼養(yǎng)、長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)?。家畜呼吸器官疾病的主要癥狀為流鼻液、咳嗽、呼吸困難、發(fā)紺和肺部聽診的啰音。近年來呼吸道疾病已成為各大養(yǎng)豬場(chǎng)最常見、危害最嚴(yán)重的疾病之一。多發(fā)生于保育期及以后各生長(zhǎng)階段，尤其是18～20周齡，主要癥狀為發(fā)熱、咳嗽和呼吸困難，生長(zhǎng)緩慢或停滯。發(fā)病率通常在30%～70%，死亡率15%～20%，給豬場(chǎng)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

呼吸道疾病已經(jīng)成為影響?zhàn)B豬場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益的主要因素之一，感染豬群主要以保育豬和育肥前期為主，主要癥狀為發(fā)燒、咳嗽、喘氣，嚴(yán)重時(shí)呼吸困難，造成飼料轉(zhuǎn)化率降低、被毛粗亂、消瘦、生長(zhǎng)緩慢或停滯，給豬場(chǎng)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失，危害性日益突出，受到國(guó)內(nèi)外養(yǎng)殖業(yè)者的普遍關(guān)注。因注射液生產(chǎn)工藝復(fù)雜嚴(yán)格，使用方法不便，而且大劑量注射可引起局部刺激，為使老藥新用、發(fā)揚(yáng)我國(guó)中藥大國(guó)的瑰寶傳統(tǒng)和發(fā)揮中獸藥的優(yōu)勢(shì)，為減少家畜死亡率、增效增產(chǎn)、健康養(yǎng)殖、切實(shí)提高養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益，向獸藥市場(chǎng)提供一種家禽用的安全、有效、綠色的中獸藥口服液新制劑產(chǎn)品，已勢(shì)在必行。

4板陳黃口服液中各成分功效及性質(zhì)

4.1板藍(lán)根：板藍(lán)根（Isatidis Radix）為十字花科植物菘藍(lán)（Isatis indigotica Fort.）的干燥根。英文名為Indigowoad Root或Root of Indigowoad，別名為靛青根、藍(lán)靛根、靛根、菘藍(lán)、大藍(lán)、馬藍(lán)、葴、大葉冬藍(lán)、青藍(lán)、板藍(lán)、山藍(lán)、大藍(lán)根、馬藍(lán)根、藍(lán)龍根、土龍根、大靛。性寒，味苦，歸心、胃經(jīng)。具有清熱解毒、涼血利咽之功效，主治風(fēng)熱感冒，咽喉腫痛，口舌生瘡，瘡黃腫毒，溫毒所致的疾病，如流感、上呼吸道炎癥、急性腸炎、菌痢、熱病發(fā)斑等。應(yīng)置干燥處防霉防蛀保存。曾收載于《本草經(jīng)集注》《本草圖經(jīng)》《本草衍義》《本草述》《本草便讀》《綱目》《新修本草》《三農(nóng)紀(jì)》《植物名實(shí)圖考》《日華子本草》《分類草藥性》《現(xiàn)代實(shí)用中藥》《中藥志》《遼寧常用中草藥手冊(cè)》《上海常用中草藥》《廣西中草藥》中，板藍(lán)根主要分布于安徽、河北、江蘇、內(nèi)蒙古、陜西、山西、河南、甘肅、東北等地。主產(chǎn)于安徽、江蘇、河北、陜西、河南、山西等地，質(zhì)量以安徽亳州、宿縣為佳。秋季采挖，除去泥沙，曬干。主要成分為靛藍(lán)（indigotin，indigo）、靛玉紅（indirubin）、β-谷甾醇（β-sitosterol）、γ-谷甾醇（γ-sitosterol）以及多種氨基酸，還含黑芥子甙（sinigrin）、靛甙（indoxyl-β-hlucoside）、色胺酮（trptanthrin）、1-硫氰酸-2-羥基丁-3-烯（l-thiocyano-2-hydroxy-3-butene）、表告伊春（epigoitrin）、腺甙（adenosine）、棕櫚酸（palmitic acid）、蔗糖（sucrose）及蛋白多糖。藥理作用為①抗菌抗病毒，板藍(lán)根對(duì)枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、八聯(lián)球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌、痢疾（志賀氏、弗氏）桿菌、腸炎桿菌等均有抑制作用；② 抗鉤端螺旋體；③解毒；④提高免疫力。表現(xiàn)為能顯著增加正常小鼠脾重，白細(xì)胞總數(shù)及淋巴細(xì)胞數(shù)，對(duì)藥物所致免疫功能抑制的降低有明顯對(duì)抗作用；顯著增強(qiáng)二硝基氯苯所致正常及環(huán)磷酰胺所致免疫抑制小鼠的遲發(fā)型過敏反應(yīng)；增強(qiáng)正常小鼠外周血淋巴細(xì)胞ANAE陽性百分率，此外，板藍(lán)根多糖還能明顯增強(qiáng)抗體形成細(xì)胞功能，增強(qiáng)小鼠靜脈注射碳粒廓清速率。

4.2麻黃：麻黃（Ephedrae Herba）為麻黃科植物草麻黃（Ephedra sinica Stapf），中麻黃（Ephedra intermedia Schrenk et C. A. Mey）或木賊麻黃（Ephedra equisetina Bge）的干燥草質(zhì)莖。別名為龍沙，卑相，卑監(jiān)，狗骨，色道麻，結(jié)力根，麻黃草，草麻黃，中麻黃，木賊廓黃，山麻黃，川麻黃，田麻黃，華麻黃，木麻黃，西麻黃，朱芯麻。性溫，味辛，微苦，歸肺、膀胱經(jīng)。具有解表散寒，宣肺平喘，利水消腫之功效，主治外感風(fēng)寒、咳嗽、氣喘、水腫。應(yīng)置通風(fēng)干燥處防潮保存。曾收載于《本經(jīng)》《別錄》《神農(nóng)本草經(jīng)》《湯液本草》《本草經(jīng)疏》《本草通玄》《藥品化義》《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》《本草正義》《藥性論》《日華子本草》《珍珠囊》《滇南本草》《綱目》《科學(xué)的民間藥草》《現(xiàn)代實(shí)用中藥》《中藥形性經(jīng)驗(yàn)鑒別法》中。草麻黃主產(chǎn)于河北省、山西省、內(nèi)蒙古自治區(qū)、新疆自治區(qū)；中麻黃主產(chǎn)于甘肅省、青海省、內(nèi)蒙古自治區(qū)、新疆自治區(qū)。秋季采割綠色的草質(zhì)莖，曬干。草麻黃莖中含有生物堿1%～2%，其生物堿中40%～90%為麻黃堿（l-Ephedrine），其次為偽麻黃堿（d-Pseudo-ephedrine）及微量的l-N-甲基麻黃堿（l-N-Methylephedrine）、d-N-甲基偽麻黃堿（d-N-Pseudo methylephedrine）、l-去甲基麻黃堿（l-Norephedrine）、d-去甲基偽麻黃堿（d-Demethyl-pseudoephedrine）、麻黃次堿（Ephedine），此外，還含有芐基甲胺（Benzyl-methylamine）、2，3，5，6-四甲基吡嗪（2，3，5，6-Tetramethylpyrazine）等；又含6%的兒茶鞣質(zhì)和揮發(fā)油， 揮發(fā)油中含有l(wèi)-α-松油醇（l-α-Terpineol）、β-萜品烯醇（β-Terpineol）、萜品烯醇-4（Terpineol-4）、月桂烯（Myrcene）、2，3，5，6-四甲基吡嗪等30余種成分；也含有黃酮類成分如白飛燕草甙元（Leucodelphinidin）、麥黃酮（Tricin）、芹黃素（Apigenin）、山萘酚（Kaempfer- ol）等；有機(jī)酸類如對(duì)-羥基苯甲酸（p-Hydroxybenzoic acid）、肉桂酸（Cinnamylic acid）、對(duì)-香豆酸（p-Coumaric acid）、香草酸（Vanillic acid）、原兒茶酸（Protocatechuic acid）。藥理作用為①發(fā)汗：其作用機(jī)理為阻礙汗腺導(dǎo)管對(duì)鈉離子的重吸收，使汗腺分泌增加，興奮中樞和外周α受體；②平喘：其作用機(jī)理為促進(jìn)Na和Adr的釋放；激動(dòng)β-受體，從而激活A(yù)c，促進(jìn)cAMP產(chǎn)生；阻止過敏介質(zhì)的釋放，促進(jìn)PGE的釋放；直接興奮α-腎上腺素受體，使血管收縮，從而黏膜腫脹減輕；抑制抗體產(chǎn)生；③利尿：其作用機(jī)理為擴(kuò)張腎血管，增加腎血流量；阻礙腎小管對(duì)鈉離子的重吸收；④抗炎、抗過敏：其作用機(jī)理為抑制過敏遞質(zhì)釋放；溶血素減少，呈抗補(bǔ)體作用；⑤鎮(zhèn)咳、祛痰；⑥解熱、抗菌、抗病毒：抗金黃色葡萄球菌、甲、乙型溶血鏈球菌、流感嗜血桿菌、肺炎雙球菌、炭疽桿菌、白喉?xiàng)U菌、大腸桿菌、奈瑟雙球菌；抗病毒抗流感病毒。

4.3陳皮：陳皮（Citri Reticulatae Pericarpium）為蕓香科植物橘（Citrus reticulate Blanco）及其栽培變種的干燥成熟果實(shí)。別名為橘皮、貴老、紅皮、黃橘皮、廣橘皮、新會(huì)皮、柑皮、廣陳皮。性辛溫味苦，歸脾經(jīng)、胃經(jīng)、肺經(jīng)。具有理氣健脾，燥濕化痰之功效，主治食欲減少，腹痛，肚脹，泄瀉，痰濕咳嗽，消化不良，咳嗽氣喘，溫能行氣，辛能發(fā)散，苦而泄水，故陳皮有導(dǎo)胸中寒邪，破滯氣，益脾胃三大類作用。主要成分為揮發(fā)油，油中主要成分為D-檸檬烯（d-limonene）、β-月桂烯（β-myrcene）α-及β-蒎烯（pinene）等，含黃酮類成分如橙皮甙、新橙皮甙、柑橘素、二氫川陳皮素及5-去甲二氫川陳皮素；含橙皮甙約8.4%，川陳皮素（nobiletin）約0.15%，另含辛弗林（對(duì)羥福林）0.28%～2.54%。臨床作用為①對(duì)胃腸道有溫和的刺激作用，可促進(jìn)消化液的分泌，排除腸管內(nèi)積氣，顯示了芳香健胃和驅(qū)風(fēng)下氣的效用；②對(duì)呼吸系統(tǒng)的作用：所含揮發(fā)油有刺激性被動(dòng)祛痰作用，使痰液易咯出。③抗炎作用：陳皮煎劑與維生素C、維生素K并用，能增強(qiáng)消炎作用。

5板陳黃口服液處方篩選和工藝考核

板陳黃口服液是根據(jù)主藥板藍(lán)根、麻黃、陳皮的性狀、主要成分理化性質(zhì)及給藥途徑和藥效，選擇了乙醇、丙二醇、純化水、注射用水、蔗糖、苯甲酸鈉、尼泊金乙酯分別進(jìn)行了性狀、澄清度、pH值、穩(wěn)定性、微生物限度等的對(duì)比和處方篩選，見表1。

由結(jié)果可以看出，應(yīng)用處方4和處方5較好，考慮到產(chǎn)品的療效和性價(jià)比，因此選處方5作為最佳組方。

6板陳黃口服液制備方法

⑴板藍(lán)根和陳皮用5倍量注射用水浸漬6 h，提取2次，第一次1.5 h，第二次1 h，收集提取液約600 mL；

⑵麻黃8倍量75%～85%乙醇溶液浸漬4 h，提取2次，每次1 h，合并提取液，過濾濃縮至相對(duì)密度為1.25～1.40；

⑶將尼泊金乙酯加入適量乙醇中，攪拌至完全溶解；

⑷將⑶加入⑵中，攪拌下加入注射用水至完全溶解并混合均勻；

⑸將⑴、蔗糖、苯甲醇、吐溫-80加入⑷中，攪拌至完全溶解，循環(huán)下攪拌20 min；

⑹加注射用水至全量，加入針用活性炭攪拌下脫色30 min，粗濾脫炭；

⑺半成品檢驗(yàn)控制pH應(yīng)為3.5～5.5；

⑻過0.8 μm微孔濾膜精濾至澄明度合格后分裝，即得板陳黃口服液。

7中試產(chǎn)品擴(kuò)大生產(chǎn)與全項(xiàng)檢驗(yàn)

按照處方2在農(nóng)業(yè)部GMP認(rèn)證的十萬級(jí)潔凈車間內(nèi)連續(xù)生產(chǎn)三批中試，并進(jìn)行全項(xiàng)檢驗(yàn)，見表2：

8產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)和有益效果

經(jīng)過長(zhǎng)期試驗(yàn)研制成功的板陳黃口服液經(jīng)多項(xiàng)指標(biāo)檢驗(yàn)，加速和長(zhǎng)期穩(wěn)定性各項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到了最優(yōu)化，口服后效果明顯優(yōu)于單方制劑。該產(chǎn)品可和其它中獸藥配伍使用、減量增效、避免繁瑣用藥、掩蓋藥物自身的苦味、增加了動(dòng)物用藥的順應(yīng)性，較注射液更適于家畜規(guī)?；B(yǎng)殖業(yè)疾病的治療。該產(chǎn)品的成功研制屬于藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，其目的是克服現(xiàn)有常規(guī)產(chǎn)品的不足，提出一種安全、綠色、天然、有效、應(yīng)用范圍廣、口感好、給藥方便、工藝簡(jiǎn)單的板陳黃口服液制備方法。該產(chǎn)品可替代部分抗生素和麻杏石甘散及清熱解毒散等中藥固體制劑，彌補(bǔ)了國(guó)內(nèi)獸藥市場(chǎng)中獸藥產(chǎn)品和劑型方面的空白，充分體現(xiàn)了板陳黃制劑在中獸藥中的優(yōu)勢(shì)，是國(guó)內(nèi)制劑產(chǎn)品加工技術(shù)的重大突破，為國(guó)內(nèi)家畜豬呼吸道疾病治療方面開辟了新產(chǎn)品新組方，促進(jìn)國(guó)內(nèi)家畜健康養(yǎng)殖新概念，同時(shí)也提升了獸藥行業(yè)的自主創(chuàng)新能力。（編輯：何芳）