肝素化血漿標(biāo)本對(duì)偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定結(jié)果的影響分析

葉章發(fā)　張超

【摘要】 目的 觀察分析肝素化血漿標(biāo)本進(jìn)行偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定時(shí)， 對(duì)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果有無(wú)影響。方法 采集血液標(biāo)本， 分別使用肝素化血漿和血清標(biāo)本， 進(jìn)行偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定， 兩組檢測(cè)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 肝素化血漿血鈣測(cè)定結(jié)果：2.71 mmol/L， 血清血鈣測(cè)定結(jié)果：2.31 mmol/L。 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示：兩組數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 肝素化血漿標(biāo)本對(duì)偶氮胂Ⅲ法血鈣測(cè)定結(jié)果具有嚴(yán)重影響， 不宜使用肝素化血漿標(biāo)本進(jìn)行偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定。

【關(guān)鍵詞】 肝素化血漿；偶氮砷Ⅲ法；血鈣測(cè)定

在臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理中， 分析前質(zhì)量保證有重要意義， 不同標(biāo)本處理方式， 可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。作者觀察分析肝素化血漿和血清標(biāo)本， 使用偶氮砷Ⅲ法測(cè)定血鈣的結(jié)果， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1. 1 一般資料 門(mén)診、住院患者隨機(jī)血液標(biāo)本105例（剔除嚴(yán)重脂血、溶血及黃疸標(biāo)本）， 年齡1.0～78.0歲， 其中男50例， 女55例。

1. 2 儀器 OLYMPUS AU-2700全自動(dòng)生化分析儀。

1. 3 試劑及相關(guān)用品 江蘇康健醫(yī)療用品有限公司提供一次性真空采血管（肝素管、普通管）， 其中肝素管（肝素鈉）每支抗凝血液5.00 ml。

RANDOX （Human-Sera分析用人血清基質(zhì)）定值凍干質(zhì)量控制血清。

偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定試劑盒（國(guó)內(nèi)某品牌），試劑主要成分：偶氮砷Ⅲ（ARSENAZO Ⅲ）：0.20 mmol/L； 咪唑： 75 mmol/L。

1. 4 實(shí)驗(yàn)方法 采集患者清晨空腹靜脈血液， 分別注入一次性真空采血管肝素管（5.00 ml）和普通管（3.00～5.00 ml）中， 待普通管血液收縮后， 再一起進(jìn)行標(biāo)本離心處理。于此同時(shí)， 將5支同一批號(hào)的定值凍干質(zhì)控血清嚴(yán)格按照使用說(shuō)明進(jìn)行充分溶解、混勻后， 每支再分別分配到6支檢測(cè)管中， 共30份， 與檢測(cè)標(biāo)本一起上機(jī)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。

1. 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 檢測(cè)數(shù)據(jù)處理采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析， 使用配對(duì)資料組間差異 t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

肝素化血漿與血清標(biāo)本血鈣測(cè)定結(jié)果， 兩組檢測(cè)數(shù)據(jù)配對(duì)資料組間差異t檢驗(yàn)， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；所用定值凍干質(zhì)控血清參考值（ARSENAZO Ⅲ法 ）：2.30 mmol/L。

3 討論

血鈣或者血液總鈣測(cè)定， 一般是指使用血液血清標(biāo)本進(jìn)行總鈣含量測(cè)定。關(guān)于血鈣測(cè)定， 雖然已經(jīng)使用過(guò)許多鈣結(jié)合染料， 其中鄰-甲酚酞絡(luò)合酮和偶氮砷Ⅲ（ARSENAZO Ⅲ）， 至今一直在廣泛應(yīng)用， 當(dāng)然， 鈣離子與偶氮砷Ⅲ結(jié)合力還受到緩沖液， Ph和鈉濃度的影響[1]。血鈣檢測(cè)作為臨床一般常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目， 目前較多使用偶氮砷Ⅲ比色法， 而且已經(jīng)有文獻(xiàn)證明， 該方法是較為理想的方法[2]。按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的具體要求[1]， 應(yīng)該使用血清標(biāo)本進(jìn)行血鈣的測(cè)定。但在實(shí)際工作中， 使用肝素化血漿標(biāo)本進(jìn)行血鈣測(cè)定的情況確實(shí)存在。亦有文獻(xiàn)報(bào)道血清與肝素化血漿標(biāo)本，血鈣測(cè)定結(jié)果差異不具顯著性[3]， 但其未提供具體的實(shí)驗(yàn)方法以及試劑具體配方。在購(gòu)買的試劑盒， 一般都有生產(chǎn)廠家提供的詳細(xì)產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)， 對(duì)標(biāo)本處理有具體的要求。我們選擇國(guó)內(nèi)一家較為知名的試劑生產(chǎn)商提供的偶氮砷Ⅲ法血鈣檢測(cè)試劑盒， 廠家在使用說(shuō)明上明確這樣注明樣本要求：血清、肝素化血漿、尿。血清或肝素化血漿中的鈣， 在2～8℃下可穩(wěn)定10 d。但在實(shí)際工作中， 發(fā)現(xiàn)有一定問(wèn)題， 故進(jìn)行了此次實(shí)驗(yàn)。通過(guò)此次實(shí)驗(yàn)的觀察、分析。可以從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出， 肝素化血漿與血清標(biāo)本， 偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定結(jié)果差異甚大， 足以影響臨床醫(yī)生對(duì)患者病情的分析以及治療措施的制定。特別是對(duì)于那些低清蛋白血癥、慢性腎功能衰竭、甲狀腺功能減退、維生素D缺乏、電解質(zhì)代謝紊亂等低鈣血癥患者， 可能產(chǎn)生嚴(yán)重后果[4]。而另一家國(guó)內(nèi)試劑生產(chǎn)商提供的偶氮砷Ⅲ法血鈣試劑盒， 試劑主要配方為偶氮砷Ⅲ（ARSENAZO Ⅲ）： 0.10×10-3 mol/L，磷酸鹽緩沖液（pH7.0）：50×10-3 mol/L。則明確要求使用血清標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定， 此次實(shí)驗(yàn)未使用次家試劑。臨床生化檢測(cè)， 一般要求使用血清進(jìn)行， 尤其對(duì)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中要求使用血清進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的項(xiàng)目， 改為血漿進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)， 必須進(jìn)行大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)， 方可使用， 以免影響實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性， 影響臨床的診斷與治療。臨床醫(yī)生亦應(yīng)依據(jù)檢驗(yàn)科采集標(biāo)本的具體要求， 嚴(yán)格督促工作人員采集合格的標(biāo)本， 保障醫(yī)療工作的順利開(kāi)展。

參考文獻(xiàn)

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[2] 張莉.偶氮砷Ⅲ發(fā)鈣試劑盒不確定度的分析.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2012，11（20）：1661-1662.

[3] 蘇少華.肝素抗凝血漿用于急診生化檢驗(yàn)的研究.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生， 2007，45（6）：13-14.

[4] 周新.涂植光.臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn).北京：人民衛(wèi)生出版社， 2006：43-44.endprint