依達拉奉聯(lián)合尼卡地平對肝臟缺血再灌注影響的臨床研究

杜學(xué)柯 黃 冰 彭丹暉 顧永輝 林 飛

（廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，廣西 南寧 530021）

依達拉奉聯(lián)合尼卡地平對肝臟缺血再灌注影響的臨床研究

杜學(xué)柯 黃 冰 彭丹暉 顧永輝 林 飛

（廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，廣西 南寧 530021）

目的探討依達拉奉聯(lián)合尼卡地平對肝癌患者肝臟缺血再灌注損傷的保護作用的臨床研究。方法80例患者隨機分為四組，A組：肝阻斷前20 min恒速靜脈輸入生理鹽水250 mL。B組：阻斷前20 min輸入尼卡地平。C組：阻斷前20 min恒速靜脈輸入依達拉奉。D組：阻斷前20 min靜脈輸入尼卡地平和依達拉奉。于手術(shù)前（T0）和肝切除后30 min（T1）、1 h（T2）、術(shù)后1 d（T3）和2 d（T4）取靜脈血行丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）測定，取切下肝臟組織相對正常的肝組織測定丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）的含量。結(jié)果肝細胞勻漿中的MDA水平在C、D組比對照組A組比較低，差異有顯著性（P＜0.05）。SOD含量C、D組比對照組A組比較高，差異有顯著性（P＜0.05）。在肝切除后30 min（T1）、1 h（T2）、術(shù)后1 d（T3）和2 d（T4）各時間點血清中ALT、AST含量B、C組與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），D組與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論依達拉奉聯(lián)合尼卡地平使用對肝臟缺血再灌注損傷有一定保護作用，且具有協(xié)同效果。

尼卡地平；依達拉奉；肝臟；缺血再灌注損傷

近年來對肝臟缺血再灌注損傷的保護作用已是研究熱點，而藥物性預(yù)處理是其主要途徑。肝臟缺血再灌注損傷的主要病理生理過程是鈣超載及氧自由基增多等。尼卡地平是一種二羥吡啶類鈣通道阻斷藥，有較高的脂溶性和較低的PKa，易于分布于缺血的細胞膜。依達拉奉（edaravone，MCI-186，ED）是一種新型的自由基清除劑，已有動物研究表明依達拉奉對缺血再灌注臟器損傷有保護作用[1]，但是對肝臟缺血再灌注損傷的研究和臨床報道比較少。此兩種藥聯(lián)合用于肝臟缺血再灌注損傷的臨床效果尚未見報道。本研究探討依達拉奉聯(lián)合尼卡地平對肝臟缺血再灌注損傷是否有保護作用，是否有協(xié)同作用。總結(jié)分析報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究已獲本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準，并與患者或其家屬簽署知情同意書。選擇2011年7月至2013年6月在我院行擇期肝葉切除的原發(fā)性肝癌ASA分級Ⅰ～Ⅱ級，術(shù)前肝功能評估均為Child-Pugh A級排除肝硬化的患者80例，男57例，女23例，年齡35～68歲，隨機分為對照組（A組），尼卡地平組（B組），依達拉奉組（C組）和尼卡地平聯(lián)合依達拉奉組（D組）。病例排除標準：①術(shù)前合并貧血、糖尿病、原發(fā)性高血壓、門靜脈高壓、心功能異常、肺部感染、肝腎功能異常、凝血功能障礙等者；②術(shù)中出血量超過800 mL。四組患者均為同一組外科醫(yī)師和麻醉醫(yī)師完成手術(shù)，肝切時均于Pringle手法阻斷第一肝門。術(shù)后患者標本常規(guī)病理，確診肝癌患者。

1.2 方法

所有患者常規(guī)氣管插管靜脈麻醉。A組：肝阻斷前20 min恒速靜脈輸入生理鹽水250 mL（30 min內(nèi)完成）；B組：肝門阻斷前20 min開始按照0.05～0.5 μg/（kg·min）靜脈輸注尼卡地平維持平均動脈壓＞60 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa），若MAP＜60 mm Hg，給予輸液沖擊治療（30 min后結(jié)束）；C組：生理鹽水250 mL內(nèi)加入30 mg依達拉奉，肝門阻斷前20 min恒速靜脈輸入（30 min內(nèi)完成）；D組：肝門阻斷前20 min開始按照0.5～1 μg/（kg·min）靜脈輸注尼卡地平維持平均動脈壓＞60 mm Hg，同時恒速靜脈輸入依達拉奉（方法同C組）。手術(shù)方式為肝段切除或局部切除，患者術(shù)后入ICU觀察復(fù)蘇，術(shù)后使用相同的抗生素、護肝藥及靜脈營養(yǎng)支持治療。

1.3 測定指標

于手術(shù)前（T0）和肝切除后30 min（T1）、1 h（T2）、術(shù)后1 d（T3）和2 d（T4）取靜脈血行丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST），送本院檢驗科全自動生化分析儀測定；取切下肝臟組織相對正常的肝組織300 mg，剪碎后制備成10%肝組織勻漿10 mL，測定超氧化物歧化酶（SOD）（南京建成生物工程公司試劑盒）及丙二醛（MDA）（巴比妥酸法）的含量。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示，用SPSS14.0醫(yī)用統(tǒng)計軟件分析進行統(tǒng)計學(xué)處理，組間差異采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 一般資料比較

四組患者一般情況，年齡、性別、腫瘤大小、阻斷時間、出血量和手術(shù)時間均無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。見表1。

表1 各組一般情況比較

表3 各組不同時間點血清中ALT、AST含量的比較

2.2 各組術(shù)后肝組織內(nèi)MDA、SOD含量的比較

MDA水平C、D組比A組低，差異有顯著性（P＜0.05）。SOD含量C、D組比A組高，差異有顯著性（P＜0.05）。見表2。

表2 各組肝組織內(nèi)MDA、SOD含量的變化

2.3 各組血清不同時間點ALT、AST含量的變化

在T1、T2、T3、T4時間點血清中ALT、AST含量B、C組與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），D組與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表3。

3 討 論

肝臟缺血再灌注損傷是復(fù)雜的病理生理過程，其影響因素是多方面的，包括：細胞內(nèi)鈣超載；氧自由基；細胞因子；一氧化氮與內(nèi)皮素；細胞凋亡；核因子κB；Kupffer細胞的激活；中性粒細胞的生成增加；內(nèi)毒素；微循環(huán)障礙等[2-6]。其中細胞內(nèi)鈣超載和氧自由基是HIRI主要的病理生理機制，改變線粒體膜通透性，導(dǎo)致肝臟細胞缺氧再灌注損傷[7，8]。導(dǎo)致肝功能損害程度的血清酶指標AST和ALT增高。因此本研究通過測定血清中AST和ALT的活性來評價肝功能損傷程度。

目前，預(yù)防肝臟缺血再灌注的措施包括藥物預(yù)處理、缺血預(yù)處理、局部熱應(yīng)預(yù)處理、熱休克預(yù)處理、臭氧氧化預(yù)處理和缺氧預(yù)處理等。在這些措施中常用方法是藥物預(yù)處理。對肝臟缺血再灌注損傷具有預(yù)處理效果的藥物主要有鈣通道阻斷藥、自由基清除劑，改善微循環(huán)或細胞能量代謝的藥物等。由于肝臟缺血再灌注損傷是主要的病理生理過程是細胞內(nèi)鈣超載和氧自由基。本研究選用尼卡地平和依達拉奉這兩種藥物。尼卡地平可以抑制跨膜鈣離子內(nèi)流。有研究表明其對腦、心臟缺血再灌注損傷有一定的保護作用[9]，尼卡地平選擇性擴張動脈血管，保護心腦腎等靶器官，血流動力學(xué)平穩(wěn)，在控制性降壓中越來越受到關(guān)注，而在肝切除的手術(shù)過程中需要控制性降壓和低中心靜脈壓。從本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)對肝臟缺血再灌注損傷是有一定的保護作用，此作用機制可能與抑制跨膜鈣離子內(nèi)流有關(guān)。依達拉奉是一種小分子量的自由基清除劑，穿透性比較強[10]。具有獨特的清除自由基和抑制脂質(zhì)過氧，減輕再灌注損傷的作用[11]。本研究結(jié)果顯示對肝臟缺血再灌注損傷是有一定的保護作用，其機制可能是清除氧自由基，穩(wěn)定肝細胞膜、線粒體膜以及溶酶體膜等，防止發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，防止產(chǎn)生大量有毒的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物。由于肝臟缺血再灌注損傷機制是一個層層遞進，環(huán)環(huán)相扣、多因素參與的復(fù)雜過程，其防治應(yīng)該采用針對性聯(lián)合用藥。

本實驗探討聯(lián)合應(yīng)用尼卡地平和依達拉奉對肝臟缺血再灌注損傷的保護作用。結(jié)果顯示聯(lián)合應(yīng)用尼卡地平和依達拉奉能更好的明顯降低血清中ALT、AST水平。此外聯(lián)合應(yīng)用可以降低肝組織內(nèi)MDA、水平，增加SOD含量。因此，我們認為尼卡地平和依達拉奉預(yù)處理可以對肝臟缺血再灌注損傷有保護作用，聯(lián)合起來應(yīng)用具有協(xié)同作用。

[1] Erqenoqlu M,Erbas O,Akdemir A,et al.Attenuation of Ischemia/ Reperfusion-Induced Ovarian Damage in Rats: Does Edaravone Offer Protection?[J].Eur Surq Res,2013,51(1/2):21-32.

[2] Liu XH,Aksan A,Menze MA,et al.Trehalose loading through the mitochondrial permeability transition pore enhances desiccation tolerance in rat liver mitochondria[J].Biochim Biophys Acta,2005,1717(1): 21-26.

[3] Demirbilek S,Karaman A,Gürünlüo?lu K,et al.Polyenylphosp hatidylcholine pretreatment protects rat liver from ischemia/ reperfusion injury[J].Hepatol Res,2006,34(2): 84-91.

[4] Sun K,Liu ZS,Sun Q,et al.Role of mitochondria in cell apoptosis during hepatic ischemia-reperfusion injury and protective effect of ischemic postconditioning[J].Gastroenterol,2004,10(13):1934-1938.

[5] Crow MT,Mani K,Nam YJ,et al.The mitochondrial death pathway and cardiac myocyte apoptosis[J].Circ Res,2004,95(10):957-970.

[6] Lisa FD,Bernardi P.Mitochondria and ischemia-reperfusion injury of the heart: fixing a hole[J].Cardiovasc Res,2006,70(2):191-199.

[7] Sasaki M,Joh T.Oxidative stress and ischemia-reperfusion injury in gastronintestinal tract and antioxidant,protective agents[J].J Clin Biochem Nutr,2007,40(1):1-12.

[8] Lichtman SN,Lemasters JJ.Role of cytokines and cytokineproducing cells in reperfusion injury to the liver[J].Semin Liver Dis,1999,19(3):171-187.

[9] 王天龍,于德水,張京范.小劑量尼卡地平對心臟外科圍術(shù)期心肌缺血再灌注損傷的保護作用[J].中華麻醉學(xué)雜志,2002,22(4):203-206.

[10] Tomatsuri N,Yoshida N,Takagi T,et al.Edaravone,a newly developed radical scavenger,protects against ischemia-reperfusion injury of the small intestine in rats[J].Int J Mol Med,2004,13(1):105.

[11] 宋德靜,孔連寶,盧思聰,等.依達拉奉對大鼠肝臟缺血再灌注損傷保護作用的實驗研究[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2008, 28(7):881-884.

Clinical Study of the Protective Effect of Thenicardipine Combined with Edaravone on Hepatic Ischemia-reperfusion Injury

DU Xue-ke, HUANG Bing, PENG Dan-hui, GU Yong-hui, LIN Fei
(Affiliated Cancer Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021, China)

ObjectiveTo investigate the protective effects of nicardipine combined with edaravone on hepatic ischemia-reperfusion injury.MethodsSelected 80 patients, and they were randomly divided into four groups, pretreatment with saline (A); pretreatment with nicardipine (B); pretreatment with edaravone (C); pretreatment with nicardipine combined with edaravone (D). The concentrations of alanine transaminase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) in serum were measured. Hepatic cell homogenate levels of MDA, SOD were measured.ResultsHepatic cell homogenate levels of MDA were lower in C, D than that in group A(P＜0.05), and SOD were higher (P＜0.05). In the T1, T2, T3and T4, the plasma levers of ALT, AST were lower in group B, C than that in group A (P＜0.05), those were remarkably lower group D than that in group A (P＜0.01).ConclusionThe nicardipine combined with edaravone in the treatment for hepatic ischemia-reperfusion injury has protective effects, and has obvious synergies.

Nicardipine; Edaravone; Liver; Ischemia-reperfusion injury

R333.4

B

1671-8194（2014）24-0016-02