不同程度頸動脈硬化患者中血清ox－LDL水平變化及意義

邢 影，張首平，李松濤，李 飛，侯玲玲＊

不同程度頸動脈硬化患者中血清ox－LDL水平變化及意義

邢 影1，張首平2，李松濤1，李 飛1，侯玲玲2＊

（1.吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)一科，吉林長春130033；2.吉林大學第四醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，吉林長春130011）

動脈粥樣硬化性疾?。ˋS）為一大類以血管病變?yōu)榛A的疾病，屬于全身血管性疾病。近來AS成了醫(yī)學研究的熱點問題，大量研究顯示氧化低密度脂蛋白（ox－LDL）的增加而非LDL的增加在動脈粥樣硬化的發(fā)生及發(fā)展中都起了關鍵性作用，ox－LDL還在AS的基礎上進一步形成動脈粥樣硬化斑塊、血管狹窄、甚至斑塊脫落及血栓形成中起到重要的促進作用。故明確ox－LDL在AS中的功能及作用機制，盡早采取有效的治療措施，對于阻止或延緩動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，一定程度上改善患者的臨床預后具有重要意義。

1 資料與方法

1.1研究對象

收集臨床病例時間為2013年1月－2013年12月期間，地點為吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)一科，病人來源為因各種神經(jīng)科疾病并伴有動脈粥樣硬化的住院病人240人和同期門診健康體檢者80人。

1.2入選與排除標準

入選標準：所有入選患者均經(jīng)頸動脈多普勒彩色超聲證實存在不同程度頸動脈粥樣硬化（CAS），并根據(jù)彩色多普勒超聲儀器檢測標準劃分結果，選取動脈內(nèi)－中膜光滑，且頸動脈內(nèi)－中膜厚度（IMT）＜1.0mm者為正常對照；1.0mm≤頸動脈內(nèi)－中膜厚度（IMT）＜1.2mm定義為頸動脈內(nèi)膜增厚；當IMT≥1.2mm或達到臨近部位IMT值的1.5倍以上，且增厚的血管內(nèi)膜向管腔內(nèi)部凸起有粥樣斑塊樣物質(zhì)形成，定義為頸動脈斑塊；根據(jù)中國CDFI診斷標準：經(jīng)頸動脈彩超檢查，頸內(nèi)動脈狹窄段收縮期峰值流速≥155cm／s，頸內(nèi)動脈狹窄段血管舒張期末流速≥60cm／s，頸內(nèi)動脈狹窄段收縮期峰值流速／頸總動脈遠段收縮期峰值流速≥2.0，頸內(nèi)動脈狹窄段收縮期峰值流速／狹窄遠段血管收縮期峰值流速≥1.6可定義為頸動脈血管狹窄率達到50%以上。狹窄組患者均經(jīng)過頸部CTA證實。軟斑表現(xiàn)為動脈內(nèi)膜突入到血管腔內(nèi)的弱回聲或混合性回聲型。硬斑表現(xiàn)為斑塊表面光滑，回聲強，且后方有明顯的聲影或聲衰減。潰瘍斑表現(xiàn)為斑塊形態(tài)不規(guī)則，表面不光滑，潰瘍邊緣回聲較低，有時呈壁龕樣影像。

排除標準：近2個月內(nèi)未應用炎癥抑制藥物如非甾體類抗炎藥、類固醇、免疫抑制劑及鴉片類藥物等可影響血清中氧化型低密度脂蛋白水平的藥物，同時除外動脈夾層、放療后頸部血管狹窄、纖維肌發(fā)育不良、動脈瘤等疾病導致的血管狹窄等疾病。

1.3分組

1.3.1 對照組 80例，為同期門診健康體檢者，其中男性40例、女性40例，平均年齡55.60±5.89歲，均無高血壓、冠心病、糖尿病、吸煙及酗酒史、卒中家族史等腦血管危險因素。

1.3.2 實驗組 240例，為伴有頸動脈硬化的各種類型神經(jīng)科疾病住院患者。實驗組患者依據(jù)頸部血管彩超進行血管內(nèi)膜增厚程度分級：分為頸動脈內(nèi)膜增厚組即1.0mm≤IMT＜1.2mm（A組80例，男女各40例，年齡平均在56.60±5.37歲）、頸動脈斑塊組即IMT≥1.2mm，但血管徑狹窄率＜50%（B組80例，其中軟斑及混合斑塊B1組40例，男女各20例，年齡平均在55.50±5.28歲；硬斑B2組40例，男女各20例，年齡平均在54.90±5.78歲）、頸動脈狹窄組即血管徑狹窄率＞50%（C組80例，男女各40例，年齡平均在56.60±5.86歲）三組。實驗組所有受試人群再次按照臨床癥狀劃分為腦血管病組及非腦血管病組。在實驗組與對照組中，年齡及性別比較后差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.4主要試劑與儀器

標準品，樣本稀釋液，檢測抗體－HRP，20x洗滌緩沖液，ELISA試劑盒（底物A，底物B，終止液，上?？婆d生物科技有限公司），恒溫箱（北京福意電器有限公司），分光光度計（上海元析儀器有限公司），Vivid7型彩色多普勒超聲儀（美國GE公司）；CTA（德國KUKA公司）.

1.5實驗方法

1.5.1 檢測部位：選取3個位點：頸總動脈的遠端（頸內(nèi)外動脈分叉連線下方1－1.5cm處），頸內(nèi)動脈起始處（分叉上方1－1.5cm處），頸動脈分叉處。

1.5.2 記錄各組患者頸內(nèi)動脈收縮期及舒張期血流速度，計算比值，判定血管狹窄的程度。

1.5.3 所有受試患者均按要求在入院后次日清晨空腹狀態(tài)下采集靜脈血約2ml，標本采集后存放于真空管中，經(jīng)離心處置，提取血清并存放于－20℃以下溫度保存，應用Elisa試劑盒進行檢測。

1.6統(tǒng)計學分析

采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，所用數(shù)據(jù)均行正態(tài)分布檢驗，正態(tài)分布的計量資料采用均數(shù)±標準差（ˉx±s）表示；兩組間比較采用t檢驗，多組間比較應用方差分析，兩兩比較采用LSD法；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.01為差異有顯著統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1血清中ox－LDL水平在不同程度動脈硬化組中的比較

研究結果顯示，頸動脈內(nèi)膜增厚組（A組）、頸動脈斑塊組（B組）、頸動脈狹窄組（C組）三組患者血清中ox－LDL水平均較對照組增高，其中，C組的ox－LDL水平高于B組，B組的ox－LDL水平高于A組，表明頸動脈硬化患者血清中ox－LDL水平隨CAS程度的加重而增高，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（見圖1）。

圖1 血清中ox－LDL水平在對照組及不同程度動脈硬化組中的比較

2.2血清中ox－LDL水平在軟斑、混合斑組（B1組）及硬斑組（B2組）的分布規(guī)律

研究結果顯示，B1組的血清ox－LDL水平高于B2組，表明血清ox－LDL水平與頸動脈斑塊的穩(wěn)定性呈負相關，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（見圖2）。

圖2 血清中ox－LDL水平在B1和B2組中的比較

2.3血清中ox－LDL水平在腦血管病組及非腦血管病組的分布規(guī)律

研究結果顯示：腦血管病組及非腦血管病組的血清中ox－LDL水平無明顯差異，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（見圖3）。

圖3 血清中ox－LDL水平在各亞組中的比較

3 討論

動脈粥樣硬化性腦卒中目前呈年輕化趨勢，發(fā)病率及死亡率逐年增高，嚴重威脅著人類的健康［1］，許多危險因素促進動脈粥樣硬化的發(fā)展，據(jù)研究發(fā)現(xiàn)在動脈粥樣硬化的形成初始階段是ox－LDL的增加起了關鍵性作用，進一步形成動脈粥樣硬化斑塊，ox－LDL甚至參與血管狹窄，斑塊脫落及血栓形成，導致相當嚴重的后果［2］。

本研究的結果顯示A、B、C三組患者血清中ox－LDL水平均較對照組增高，其中，C組高于B組，B組高于A組，說明了血清中ox－LDL增高導致內(nèi)膜損傷并進一步增厚，具有促進動脈發(fā)生粥樣硬化的作用。這一結論與大多數(shù)文獻相符。已有的研究指出了在AS發(fā)展的進程中主要的“有害的”物質(zhì)被定為ox－LDL［3］。有學者［4］用兔頸總動脈制造了LDL和ox－LDL導致血管內(nèi)膜增厚的兩種體內(nèi)模型，驗證了ox－LDL對動脈內(nèi)膜增厚起了正相關的作用。大量文獻指出：血清中ox－LDL誘導的毒性作用存在于動脈粥樣硬化的起始階段，并積極促進動脈硬化加重發(fā)展的各個階段［5］。甚至在急性冠脈綜合征及血栓事件中也起著重要的促進作用［6］。

同時研究結果顯示血清中ox－LDL在動脈狹窄組中的表達水平明顯高于健康對照組、內(nèi)膜增厚組以及斑塊組，說明了血清中ox－LDL水平增高可促進動脈狹窄的發(fā)生及加重。有研究發(fā)現(xiàn)，頸動脈狹窄患者的血漿ox－LDL水平顯著高于健康人群［7］。另外頸動脈狹窄大于50%的患者ox－LDL水平顯著高于正常人群，且更容易發(fā)生心腦血管事件［8］。還有研究者提出ox－LDL水平可能是動脈狹窄的一個度量指標［9］。有人［10］通過實驗向家兔靜脈注入放射性標記的LDL，證明了血漿中的LDL和ox－LDL可以被動脈內(nèi)膜攝取，且ox－LDL累積在內(nèi)膜的程度遠多于LDL，動脈粥樣硬化斑塊積聚大量的ox－LDL，從而促進AS的進展，甚至斑塊堵塞血管。

在B1與B2兩組中，血清中ox－LDL在前者中表達水平明顯高于后者中；這說明了血清中ox－LDL水平增高可促進動脈斑塊的形成及加重，血清中ox－LDL水平增高可加重斑塊的不穩(wěn)定性，另一方面不穩(wěn)定斑塊中也可以向血液中釋放游離的ox－LDL，導致血液中ox－LDL水平進一步增高。有學者通過實驗得出結論，早期動脈粥樣硬化病變，ox－LDL在血管平滑肌細胞有陽性的BAX表達，從而促進這些細胞發(fā)生細胞凋亡；在斑塊形成的過程中，ox－LDL陽性表達的內(nèi)膜領域表現(xiàn)出較高的BAX免疫反應，而這可能導致斑塊不穩(wěn)定和破裂［11］，由此可見ox－LDL與斑塊的性質(zhì)關系密切。

同時，為了檢測ox－LDL與腦血管病的發(fā)生有無關系，我們分析了入組患者中以腦血管病起病的患者和非血管病入院患者血清中ox－LDL的變化水平，結果顯示：腦血管病組及其他疾病組的血清中ox－LDL水平無明顯差異，無統(tǒng)計學意義。這表明血清中ox－LDL水平的增減與腦血管病癥狀無相關性，說明ox－LDL是AS的形成的促進因素，但ox－LDL水平并不能作為檢測腦血管病發(fā)病癥狀的敏感指標。因本實驗的樣本量較小，還有待于日后進一步大量臨床試驗的論證。

綜上，本研究通過測定不同程度AS與健康對照組患者的血清ox－LDL水平，結果發(fā)現(xiàn)患者血清ox－LDL水平與頸動脈粥樣硬化嚴重程度呈正相關；ox－LDL水平增高可增加動脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性，ox－LDL的升高可促進斑塊的碎裂及脫落，血清中ox－LDL水平與腦血管病癥狀無相關性。因此，它可以作為評估患者動脈粥樣硬化程度及斑塊穩(wěn)定性的一個重要指標。這些都有待于日后大樣本的實驗及臨床觀察及進一步研究驗證。

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2014－03－19）

1007－4287（2014）12－2003－03

吉林省科技支撐計劃重點科技攻關項目（20130206055SF）

＊通訊作者