趨化因子受體CXCR7在非小細胞肺癌中的表達及意義

袁 軍，張勝超，鄭如恒

趨化因子受體CXCR7在非小細胞肺癌中的表達及意義

袁 軍，張勝超，鄭如恒

（復旦大學附屬中山醫(yī)院青浦分院胸外科，上海201700）

目的探討非小細胞肺癌組織中趨化因子受體CXCR7的表達及其臨床意義。方法采用免疫組織化學法檢測經(jīng)外科手術(shù)切除的86例非小細胞肺癌組織及34例癌旁組織標本中CXCR7的表達情況。結(jié)果全部非小細胞肺癌組織均異常表達CXCR7，高表達率達52.3%（45／86），在對照組中CXCR7均為陰性表達。CXCR7在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的高表達率為62.96%（34／54），在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的高表達率為34.38%（11／32），兩者差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；CXCR7的高表達率均隨TNM分期的增高而逐漸增高，且Ⅱ、Ⅲ期的高表達率明顯高于Ⅰ期，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結(jié)論CXCR7高表達與非小細胞肺癌的淋巴轉(zhuǎn)移及臨床分期相關，提示CXCR7與非小細胞肺癌的發(fā)生發(fā)展存在相關性。

肺癌；趨化因子受體；CXCR7

（Chin J Lab Diagn，2014，18：1954）

目前，肺癌是對人類健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。趨化因子／受體參與多種生物學過程，腫瘤、炎癥以及免疫機制等也需要趨化因子及其受體網(wǎng)絡緊密的將其聯(lián)系起來，在腫瘤的發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移等多個環(huán)節(jié)均發(fā)揮著重要的作用［1］。過去認為，趨化因子CXCL12的唯一受體是CXCR4，然而，最近的研究發(fā)現(xiàn)尚存在CXCR7這一新的受體，在腫瘤發(fā)展過程中，CXCL12／CXCR7生物軸起著重要作用［2］。本文通過檢測非小細胞肺癌（NSCLC）組織中的CXCR7表達情況，探討CXCR7在NSCLC發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1材料

收集我院2011年1月至2013年6月接受手術(shù)治療的NSCLC患者標本86例，術(shù)前均未接受化療。其中男52例，女34例，年齡38－80歲，平均年齡（59.3±11.6）歲；肺鱗癌51例，肺腺癌23例，肺腺鱗癌12例；伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的54例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的32例；按WHO肺癌TNM標準分級、分期：低分化42例，中分化33例，高分化11例；I期28例，Ⅱ期24例，Ⅲ期34例。另取34例患者的癌旁組織（距癌組織5cm以上）作為對照組。

1.2方法

1.2.1 免疫組織化學染色

采用免疫組織化學SP法，由福州邁新公司提供SP試劑盒。所獲標本經(jīng)10%甲醛溶液固定后，常規(guī)石蠟包埋，切片，厚度為4μm。高壓抗原熱修復，3%H2O2阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，滴加1∶100小鼠抗人單克隆抗體，4℃過夜，PBS沖洗，滴加生物素標記二抗工作液，室溫孵育10min；滴加鏈霉菌抗生物素－過氧化物酶溶液，室溫孵育10min，PBS沖洗；DAB顯色，蘇木素復染。陽性對照用已知的陽性切片，陰性對照采用PBS代替一抗。

1.2.2 結(jié)果判定標準

以細胞質(zhì)和（或）細胞膜出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒為陽性。評定和分析標準：每例均隨機觀察≥5個高倍視野（＞400），每個視野計數(shù)100個細胞，陽性細胞率＝陽性細胞數(shù)／觀察細胞數(shù)×100%。陽性細胞率計分標準：0分為＜5%，1分為6%－25%，2分為26%－50%，3分為51%－75%，4分為75%以上。染色強度：1分為淺黃色，2分為棕黃色，3分為棕褐色。陽性細胞率乘以染色強度即為最后得分：0分為陰性（－），1－2分為弱陽性（＋），3－6分為中度陽性（＋＋），超過6分為強陽性（＋＋＋）。低表達為（－）和（＋），高表達為（＋＋）和（＋＋＋）。

1.3統(tǒng)計學方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，兩樣本率的比較釆用四格表資料的χ2檢驗，多樣本率的比較采用行×列表資料的χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1CXCR7在非小細胞肺癌組織和正常組織中的表達

全部NSCLC組織均異常表達CXCR7蛋白，NSCLC組織中的高表達率達52.3%（45／86）；在對照組中CXCR7均為陰性表達。

2.2CXCR7與NSCLC臨床病理特征的關系

組間差異比較結(jié)果顯示，CXCR7高表達率與入組患者的年齡、性別、腫瘤大小、組織學分型及分化程度無關（P＞0.05）。CXCR7在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的高表達率為62.96%（34／54），在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的高表達率為34.38%（11／32），兩者差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；CXCR7的高表達率均隨TNM分期的增高而逐漸增高，且Ⅱ、Ⅲ期的高表達率明顯高于Ⅰ期，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.0 5）。見表1。

3 討論

趨化因子指的是具有趨化作用的細胞因子，能將免疫細胞吸引至免疫應答部位，參與免疫調(diào)節(jié)和免疫病理反應。一般認為，不同的器官由于不同趨化因子的存在，因此產(chǎn)生不同的趨化或募集作用，驅(qū)使腫瘤細胞向相應器官選擇性地轉(zhuǎn)移。CXCL12／CXCR4軸可通過活化胞內(nèi)信號通路使得多種腫瘤細胞的生長和增殖加快。在未發(fā)現(xiàn)CXCR7時，認為在某些情況下，CXCL12和CXCR4功能和分布的匹配尚不能做到，即當CXCLl2發(fā)揮作用時，CXCR4的有效濃度不是很高［3］。CXCR7屬于趨化因子受體家族CXCR類的成員之一，在正常的細胞表面基本不表達或僅有微弱的表達，但在腫瘤細胞的表面的表達明顯的上調(diào)。在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中，CXCR7同樣起著重要的作用［4］。Miao［5］等通過免疫組織化學法檢測出人類大多數(shù)常見腫瘤，比如肺癌、乳腺癌、宮頸癌、腎癌和橫紋肌肉瘤，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在各種腫瘤組織中均有CXCR7表達。

表1 不同臨床病理指標的NSCLC中CXCR7蛋白的表達

本實驗運用免疫組化方法觀察到，在NSCLC組織中CXCR7呈異常表達，CXCR7的高表達率達52.3%，而在癌旁組織中未見CXCR7表達，提示CXCR7可能與NSCLC的發(fā)生有關。Hartmann等［6］研究表明，癌細胞上的CXCR4－CXCR7在跨膜轉(zhuǎn)移過程中首先與CXCLl2相互作用，產(chǎn)生并激活整合LFA－l和VLA－4，再黏附到CXCL12＋內(nèi)皮細胞上，CXCR4和CXCR7均獨立發(fā)揮作用。本研究還發(fā)現(xiàn)，CXCR7的高表達也與NSCLC的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關，提示通過檢測CXCR7有助于了解NSCLC的淋巴轉(zhuǎn)移、臨床分期等情況，可能成為判斷病人預后的指標之一。Grymula等［7］對橫紋肌肉瘤研究發(fā)現(xiàn)，在CXCL12的激活下，高表達的CXCR7可以使（M A PK）p42／44及AKT磷酸化通路激活，使細胞的移動能力、遷移方向、細胞黏附力及金屬蛋白酶（M M P）的表達量受到調(diào)節(jié)。在免疫缺陷小鼠體內(nèi)經(jīng)CXCR7轉(zhuǎn)染的人肺癌細胞株能長成較大的腫瘤，siRNA下調(diào)CXCR7表達的細胞株腫瘤體積則相對較小，說明CXCR7能夠使腫瘤細胞的存活和增殖加快。研究發(fā)現(xiàn)，在非小細胞肺癌中CXCR7高表達者腫瘤轉(zhuǎn)移、復發(fā)率明顯增高［8］。

總之，CXCR7的高表達與NSCLC的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移均有著十分密切的關系，有望成為評估NSCLC進展和判斷預后的一個重要的指標。在今后，應加強在NSCLC中CXCR7與腫瘤轉(zhuǎn)移的具體作用機制及信號通路的實驗研究。

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Expression and significance of chemokine receptor CXCR7 in non small cell lung cancer

YUAN Jun，ZHANG Shengchao，ZHENG Ru－h(huán)eng.（Department of Thoracic Surgery，Zhongshan Hospital Affiliated to Fudan University Qingpu Branch，Shanghai 201700，China）

ObjectiveTo investigate the expression of chemokine receptor CXCR7in non small cell lung cancer and its clinical significance.MethodsImmunohistochemistry was used to detect the expression of 86cases of non small celllung cancer surgical operation excision and 34cases of paracancerous tissues in CXCR7.ResultsAll the non small cell lung cancer tissues were abnormal expression of CXCR7，the high expression rate was 52.3%（45／86）.There had negative expression of CXCR7in the control group were.The high expression of CXCR7in lymph node metastasis rate was 62.96%（34／54），in the absence of high expression of lymph node metastasis rate was 34.38%（11／32），the difference was statistically significant（P＜0.05）.The high expression of CXCR7increased as the TNM staging was gradually increased，and the high expression ofⅡ，Ⅲperiod was significantly higher than that of I，the difference was statistically significant（P＜0.05）.ConclusionThe high expression of CXCR7and lymph node metastasis and clinical staging of non small cell lung cancer and correlation，suggesting that CXCR7in non small cell lung cancer and had significant correlation development.

lung cancer；chemokine receptor；CXCR7

R734.2

：A

袁軍（1974－），男，主治醫(yī)師，研究方向：肺癌綜合治療。

2014－02－15）

1007－4287（2014）12－1954－03