芪芝甘草飲對(duì)蛋雞禽流感疫苗免疫效果的影響

劉琳琳 王 會(huì) （山東省棗莊市畜牧獸醫(yī)局 277800）

芪芝甘草飲對(duì)蛋雞禽流感疫苗免疫效果的影響

劉琳琳 王 會(huì) （山東省棗莊市畜牧獸醫(yī)局 277800）

為了解芪芝甘草飲對(duì)蛋雞免疫機(jī)能的影響。將400只蛋雛雞隨機(jī)分為2組，每組200只，A組為對(duì)照組；B組為芪芝甘草飲組，在飲水中加入300mg/kg的芪芝甘草飲，在每次接種H5N1禽流感雙價(jià)苗前后連續(xù)飲用7d。之后定期隨機(jī)采血檢測(cè)禽流感免疫抗體、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力、血清IgG含量，并測(cè)其脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比試驗(yàn)組的各項(xiàng)指標(biāo)均差異顯著(P＜0.05)或極顯著(P＜0.01)，表明自主研制的中草藥制劑芪芝甘草飲對(duì)蛋雞機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫有顯著增強(qiáng)作用。

芪芝甘草飲 蛋雞 免疫增強(qiáng)

近年來(lái)，大量的研究證實(shí)，許多中草藥及其復(fù)方制劑都具有增強(qiáng)畜禽的免疫力，提高抗病能力，進(jìn)而促進(jìn)生長(zhǎng)、提高生產(chǎn)性能，改善畜產(chǎn)品品質(zhì)的作用。而且它們作用廣泛、毒副作用小、無(wú)抗藥性、無(wú)藥物殘留，沒(méi)有化學(xué)藥物及抗生素的多種弊端，在畜禽養(yǎng)殖業(yè)上的應(yīng)用日趨廣泛。本試驗(yàn)以蛋雞為研究對(duì)象，探討自主研制的中草藥制劑芪芝甘草飲對(duì)蛋雞免疫機(jī)能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 電子天平(瑞士梅特勒-托利多)、離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)、恒溫培養(yǎng)箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)、微量振蕩器(廣州儀科實(shí)驗(yàn)技術(shù)有限公司)、微量移液器等(美國(guó)THERMO熱電)。

1.2 中草藥配方 芪芝甘草飲含有黨參、當(dāng)歸、柴胡、甘草、黃芪多糖和云芝多糖等多種有增強(qiáng)免疫作用的中草藥。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及分組 1日齡健康非免疫蛋雞400只(購(gòu)自棗莊市孟莊鎮(zhèn)某雞場(chǎng))隨機(jī)分成2組，每組200只。A組為對(duì)照組，B組為芪芝甘草飲試驗(yàn)組，即飲水中加入終濃度為300mg/kg的芪芝甘草飲，在每次免疫前后加入飲水中連續(xù)飲用7d。2組均飼喂相同日糧，采用舍內(nèi)籠養(yǎng)，自由采食、自由飲水。分別于20、50、110日齡3次免疫H5N1禽流感雙價(jià)苗。

1.4 檢測(cè)指標(biāo) 在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后定期采血檢測(cè)禽流感免疫抗體、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力、血清IgG含量，并宰殺后，稱其脾臟、法氏囊重量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0中的單因素方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用Dun-can法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 禽流感免疫抗體的跟蹤檢測(cè) 經(jīng)統(tǒng)計(jì)，禽流感H5N1 Re-4株抗體滴度在35d以前，試驗(yàn)組與對(duì)照組之間無(wú)明顯差異(P＞0.05)；自42d開(kāi)始抗體水平出現(xiàn)與對(duì)照組不同程度的差異；85d以后均差異極顯著(P＜0.01)?？梢?jiàn)芪芝甘草飲能顯著提高蛋雞禽流感免疫抗體水平(圖1)。

圖1 禽流感Re-4免疫抗體變化折線圖

2.2 血清中IgG含量 所有動(dòng)物都有IgG、IgM、IgA[1]，其中IgG能調(diào)理、凝集和沉淀抗原，在體液免疫中最為重要。由表1可知，芪芝甘草飲能高效提高血清IgG含量。試驗(yàn)組血清IgG含量在14d和21d時(shí)與對(duì)照組相比均差異不顯著(P＞0.05)；在28d～42d極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)。

表1 血清中IgG的比較 (mg/ml)

2.3 外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力 由表2可見(jiàn)，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力在第14d和21d時(shí)，試驗(yàn)組與對(duì)照組之間無(wú)明顯差異(P＞0.05)；第28d時(shí)試驗(yàn)組與對(duì)照組差異顯著(P＜0.05)；而到第35d和42d時(shí)2組之間差異極顯著(P＜0.01)。說(shuō)明芪芝甘草飲能增強(qiáng)淋巴細(xì)胞的增殖分化能力。

表2 淋巴細(xì)胞OD570轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的比較

表3 免疫器官指數(shù)的比較(x±S) (mg/g)

表3 免疫器官指數(shù)的比較(x±S) (mg/g)

項(xiàng)目 日齡 A組 B組14 1.36±0.12 1.48±0.09脾臟21 1.55±0.09 1.64±0.14 28 1.71±0.08a 1.86±0.08b35 1.87±0.05A 2.09±0.08B42 1.99±0.11A 2.22±0.14B14 2.52±0.07 2.45±0.09法氏囊(mg/g) 21 2.96±0.11 2.94±0.07 28 3.19±0.09a 3.42±0.13b35 3.34±0.07A 3.58±0.09B42 3.42±0.08A 3.70±0.09B

2.4 免疫器官指數(shù) 由表3可見(jiàn)，脾臟指數(shù)與法氏囊指數(shù)在14d和21d，試驗(yàn)組和對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；在28d時(shí)差異顯著(P＜0.05)；在35d和42d時(shí)差異極顯著(P＜0.01)。因此，芪芝甘草飲對(duì)蛋雞脾臟及法氏囊均有顯著促生長(zhǎng)作用。

3 討論

（1）對(duì)禽流感抗體跟蹤檢測(cè)結(jié)果顯示，到250日齡時(shí)，對(duì)照組抗體水平已降至3.6log2，低于免疫保護(hù)的最低限4log2，說(shuō)明超出疫苗免疫保護(hù)期，而此時(shí)試驗(yàn)組的抗體滴度仍在6log2左右，仍可為雞群提供有效免疫保護(hù)。由此可以合理推測(cè)，―芪芝甘草飲”一定程度上可以延長(zhǎng)疫苗的免疫保護(hù)期。（2）免疫器官指數(shù)是反映免疫器官的發(fā)育程度，間接指示機(jī)體的免疫狀態(tài)[2]的指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果表明，飲用―芪芝甘草飲”后，28日齡的脾臟指數(shù)，法氏囊指數(shù)兩組差異顯著(P＜0.05)；在35d和42d時(shí)差異極顯著(P＜0.01)。說(shuō)明―芪芝甘草飲”可以促進(jìn)蛋雞免疫器官的發(fā)育。同時(shí)，脾臟和法氏囊都是B淋巴細(xì)胞增殖分化的主要基地，臟器指數(shù)的增加，促使B淋巴細(xì)胞的數(shù)量增加，致使抗體水平明顯提高。因此，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率及抗體水平的提高，均與芪芝甘草飲具有促進(jìn)法氏囊及脾臟的生長(zhǎng)發(fā)育具有密切關(guān)系。另有研究認(rèn)為，中草藥提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能的作用可能也與其能夠促進(jìn)免疫器官發(fā)育有密切關(guān)系[3]。（3）淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率是評(píng)價(jià)機(jī)體細(xì)胞免疫功能的一個(gè)重要指標(biāo)，轉(zhuǎn)化率高低反映機(jī)體的細(xì)胞免疫水平[4]。試驗(yàn)結(jié)果表明，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力在第14d和21d時(shí)，2組之間無(wú)明顯差異(P＞0.05)，第28d時(shí)差異顯著(P＜0.05)；而到第35d和42d時(shí)兩組之間差異極顯著(P＜0.01)。說(shuō)明―芪芝甘草飲”可顯著刺激外周血淋巴細(xì)胞增殖，從而增強(qiáng)蛋雞細(xì)胞免疫功能。（4）芪芝甘草飲是一種純中藥綠色湯劑，短期使用可高效提高蛋雞的免疫機(jī)能，而且加入飲水中飲用方便。另外，由于中草藥源自天然，毒副作用小、無(wú)抗藥性，防治疾病的同時(shí)，又可避免藥物殘留，還能生產(chǎn)出安全、綠色的禽蛋產(chǎn)品，這對(duì)動(dòng)物疫病防控乃至整個(gè)畜牧業(yè)發(fā)展都是一舉多得并具有深遠(yuǎn)的意義的。

[1] 杜念興. 獸醫(yī)免疫學(xué)(第2版)[M]. 北京: 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社. 1998.

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