不同再礦化處理對(duì)HP漂白后釉質(zhì)表面性能影響的研究

謝森森，李繼遙

(1.上海市長(zhǎng)海醫(yī)院口腔科，上海 200433；2.四川大學(xué)華西口腔醫(yī)院牙體牙髓科，四川 成都 610041)

不同再礦化處理對(duì)HP漂白后釉質(zhì)表面性能影響的研究

謝森森1，李繼遙2

(1.上海市長(zhǎng)海醫(yī)院口腔科，上海 200433；2.四川大學(xué)華西口腔醫(yī)院牙體牙髓科，四川 成都 610041)

目的探討體外條件下不同再礦化方式處理漂白后的牙釉質(zhì)對(duì)牙釉質(zhì)表面物理性能變化的影響。方法選取適當(dāng)牛牙釉質(zhì)塊，隨機(jī)分為四組。A組：人工唾液組；B組：0.09%氟化鈉溶液組；C組：護(hù)牙素組；D組：含氟護(hù)牙素組。測(cè)量漂白前、漂白后即刻，再礦化一周及再礦化兩周各時(shí)間點(diǎn)硬度（KHN）和顏色（L，a，b值），并進(jìn)行單因素方差分析。結(jié)果漂白后各組顯微硬度顯著降低，再礦化處理階段，A組顯微硬度基本不變，B、C組再礦化兩周，顯微硬度值升高（P＜0.05），D組再礦化一周即出現(xiàn)差異（P＜0.05），兩周時(shí)再礦化效果增加。各組ΔE值漂白后升高7.22～7.85，再礦化1周降低1.35～1.69，除C組降低值與漂白后即刻無(wú)差異外，其余各組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論使用護(hù)牙素及含氟護(hù)牙素能減少顏色回復(fù)程度，使牙齒顏色更亮。

再礦化處理；牙漂白；過(guò)氧化氫；釉質(zhì)

盡管關(guān)于漂白劑對(duì)釉質(zhì)表面性能的影響目前研究尚有爭(zhēng)議，但多數(shù)研究均表明高濃度的過(guò)氧化氫可造成釉質(zhì)顯微硬度的降低[1-3]、表面形態(tài)的改變以及礦物質(zhì)含量的丟失[4]。在口腔環(huán)境中，天然唾液有可能形成一層保護(hù)性膜，抵抗漂白劑的攻擊，從而減少漂白劑對(duì)釉質(zhì)顯微硬度的影響[5-6]。但高濃度HP漂白劑聯(lián)合加熱漂白過(guò)程中以及漂白完成后的牙齒敏感率高于家庭漂白劑[7]，因此HP漂白的風(fēng)險(xiǎn)不容忽視。漂白過(guò)程中，盡可能減輕漂白的副反應(yīng)，減少危害是非常有必要的[8]。本研究擬采用再礦化制劑對(duì)漂白后牙釉質(zhì)進(jìn)行再礦化處理，觀察制劑的再礦化效果以及對(duì)漂白后牙色的影響。

1 實(shí)驗(yàn)與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 儀器 硬組織切割儀(StruersMinitom，丹麥)，體視顯微鏡(Nikon，日本)，Inspect F場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡及EDS(FEI，荷蘭)，PR-650光譜掃描色度儀(Photo Research公司，美國(guó))，恒溫培養(yǎng)搖床(ZHWY-103B，上海智程分析儀器制造有限公司)，顯微硬度儀(Struers Duramin-2，丹麥)。

1.1.2 溶液及試劑 人工唾液：根據(jù)Eisenburger[2]的配方，在去離子水中加氯化鈣(CaCl2·2H2O) 0.7 mmol/L；氯化鎂(MgCl2)0.2 mmol/L；KH2PO44.0 mmol/L；HEPES緩沖液(acid form)20.0 mmol/L；氯化鉀(KCl)30.0 mmol/L，調(diào)節(jié)pH至7.0。HP(分析純，成都科龍化工有限公司)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)本準(zhǔn)備 選取新鮮拔除的牛切牙，去除根部軟組織，硬組織切割儀冠根分離，去盡牙髓和冠部牙結(jié)石，超聲清洗10 min，體視顯微鏡觀察無(wú)齲損、裂紋、缺損等，置于去離子水中-4℃冰箱保存?zhèn)溆?。將備用的牙冠用硬組織切割儀切割成5 mm×5 mm大小的牙體組織塊。牙釉質(zhì)表面用640-2400grit砂紙磨平，磨除約200 μm釉質(zhì)，無(wú)色自凝樹(shù)脂包埋，指甲油涂布留4 mm×4 mm開(kāi)窗區(qū)。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及處理 根據(jù)VITA比色板，選取A2～A1的釉質(zhì)塊，測(cè)量標(biāo)本的顯微硬度儀，及顏色L、a、b值，選取硬度值400～440、L值72～80的釉質(zhì)塊，30%HP漂白1 h，選取硬度值為300～360、L值75～83的釉質(zhì)塊40個(gè)，隨機(jī)分為四組。A組：人工唾液組；B組：0.09%氟化鈉溶液組；C組：護(hù)牙素組(在牙釉質(zhì)表面涂抹2 mm厚的護(hù)牙素)；D組：含氟護(hù)牙素組(在牙釉質(zhì)表面涂抹2 mm厚的含氟護(hù)牙素)。再礦化處理處理前，用干棉球擦拭釉質(zhì)表面，干燥后進(jìn)行再礦化處理，每天5 min，連續(xù)兩周。處理完成后用蒸餾水沖洗，置于人工唾液中。所有樣本均在37℃搖床中保存，每日清洗樣本并更換保存液。

1.2.3 顯微硬度測(cè)量 選擇Knoop硬度記錄法，在每個(gè)樣本的中心位置，使用25 g的壓力，持續(xù)5 s，作為測(cè)量的標(biāo)記點(diǎn)。在該標(biāo)記點(diǎn)下，每間隔50 um選取一個(gè)測(cè)量點(diǎn)，壓力10 g，持續(xù)時(shí)間為15 s，測(cè)量5點(diǎn)，取平均值。測(cè)量時(shí)間點(diǎn)為漂白前，漂白后即刻，再礦化處理一周，再礦化處理兩周。計(jì)算各組再礦化階段顯微硬度變化ΔKHN=KHNx-KHN0(KHNx代表再礦化過(guò)程中各時(shí)間點(diǎn)的硬度值，KHN0代表漂白前基線硬度值)。

1.2.4 顏色測(cè)量 牙齒顏色測(cè)定采用PR-650掃描光譜色度儀，以CIE-LAB顏色系統(tǒng)記錄各組漂白前，漂白后即刻、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d、28 d的牙齒顏色L、a、b值。光源為標(biāo)準(zhǔn)A光源(色溫2 856 K)，通過(guò)PHO2T-O RESEARCH顏色分析軟件轉(zhuǎn)換為D65光源(色溫6 500 K)。工作波段為400～760 nm，間隔4 nm掃描一次，照度為2 000，1x，10°視場(chǎng)，45/0光學(xué)幾何結(jié)構(gòu)，探頭對(duì)擬測(cè)定部位直徑1.5 mm黑色區(qū)域進(jìn)行測(cè)量，工作距離95 mm，工作環(huán)境溫度18℃～25℃，相對(duì)濕度50%～60%。每次測(cè)量前蒸餾水清洗待測(cè)樣本，并用干棉球拭干牙面，測(cè)量時(shí)間點(diǎn)為漂白前，漂白后即刻，再礦化一周，每個(gè)樣本測(cè)量3次取平均值。

1.2.5 掃描電鏡觀察 再礦化完成后，每組選取兩個(gè)標(biāo)本，超聲沖洗10 min，干燥箱干燥，離子濺射儀(JFC-1100型，JEOL)噴金后，20 kV加速電壓下，掃描電鏡(JSM-840型，JEOL)觀察表面微觀結(jié)構(gòu)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。各組內(nèi)基線KHN、L、a、b值采用單因素方差分析進(jìn)行均值比較，并進(jìn)行組間比較，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 顯微硬度值 各組顯微硬度在不同時(shí)間點(diǎn)的均值和標(biāo)準(zhǔn)差見(jiàn)表1。漂白后再礦化處理階段，A組顯微硬度基本不變，B、C組再礦化兩周，顯微硬度值升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，D組再礦化一周即出現(xiàn)差異，兩周時(shí)再礦化效果增加(P＜0.05)。各組間比較，再礦化在一周時(shí)，D組與A組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余組間兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B組有再礦化傾向(P=0.050)。處理兩周，各處理組與A組均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B組與C組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。再礦化一周和再礦化兩周時(shí)，與A組比較，B組、C組與D組硬度值均顯著升高(P＜0.05)。

表1 漂白后各觀測(cè)點(diǎn)硬度值列表()

表1 漂白后各觀測(cè)點(diǎn)硬度值列表()

注：與各組漂白前比較，aP＜0.05；與A組各時(shí)間段比較，bP＜0.05。

A組B組C組D組420.92±8.92 420.23±8.40 421.94±13.85 420.98±8.96 336.03±23.23a335.46±16.98a336.83±21.28a336.63±15.78a335.14±19.87a354.36±29.01ab349.98±14.16ab373.29±19.01ab335.63±26.11a378.10±26.26ab369.10±11.37ab401.37±9.97ab

2.2 表面形態(tài) 各組掃描電鏡結(jié)果見(jiàn)下圖所示，主要觀察10 000倍和30 000倍下牙釉質(zhì)表面的形態(tài)改變。A組可見(jiàn)明顯釉柱結(jié)構(gòu)，釉柱間隙脫礦明顯，孔隙較寬，表面孔隙率最大(見(jiàn)圖1)。B組釉質(zhì)表面比A組更加規(guī)則、均勻，釉柱間隙縮小，間隙及釉柱表面有細(xì)小沉積物(見(jiàn)圖2)。護(hù)牙素組低倍鏡下仍可見(jiàn)釉柱結(jié)構(gòu)，釉柱間裂隙減少，高倍鏡下見(jiàn)釉柱間隙縮小，釉柱間隙及釉柱表面粗超，有沉積物(見(jiàn)圖3)。含氟護(hù)牙素組低倍鏡下釉柱結(jié)構(gòu)基本消失，高倍鏡下，釉質(zhì)表面有一層似膜狀的結(jié)構(gòu)形成，釉柱結(jié)構(gòu)變得不明顯，間隙明顯縮小(見(jiàn)圖4)。

圖1 人工唾液釉質(zhì)表面SEM觀察(A，×10 000；B，×30 000)

圖2 氟化鈉再礦化釉質(zhì)表面SEM觀察(A，×10 000；B，×30 000)

圖3 護(hù)牙素再礦化釉質(zhì)表面SEM觀察(A，×10 000；B，×30 000)

圖4 含氟護(hù)牙素再礦化釉質(zhì)表面SEM觀察(A，×10 000；B，×30 000)

2.3 顏色值 漂白后各組ΔE、L、a、b均值及變化趨勢(shì)分別見(jiàn)表2和表3，漂白后即刻各組ΔE、L間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。顏色總的改變?chǔ)值，各組數(shù)值漂白后升高，再礦化一周有降低，降低值1.35～1.69，除C組降低值與漂白后即刻無(wú)差異外，其他各組降低均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩周時(shí)數(shù)值與再礦化一周無(wú)差異，ΔE＞4，漂白效果明顯。重復(fù)測(cè)量方差分析顯示：各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；不同再礦化組與A組無(wú)差異。各組L值漂白后即刻增加明顯，再礦化一周數(shù)值降低，與漂白后即刻比較，A、B組降低差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，C、D組降低差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。a、b值漂白后數(shù)值降低，再礦化過(guò)程數(shù)值略有恢復(fù)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。L、a、b值在不同組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 不同再礦化處理組各時(shí)間點(diǎn)的ΔE變化()

表2 不同再礦化處理組各時(shí)間點(diǎn)的ΔE變化()

注：與各組漂白后即刻比較，aP＜0.05。

組別A組B組C組D組再礦化兩周ΔE 5.72±1.15a5.78±0.01a5.96±1.26a5.67±0.05a漂白后即刻ΔE 7.85±1.46 7.63±0.94 7.42±1.99 7.22±0.60再礦化一周ΔE 6.36±1.57a5.96±0.86a6.07±1.80 5.71±1.15a

表3 不同再礦化組各處理時(shí)間點(diǎn)L、a、b變化()

表3 不同再礦化組各處理時(shí)間點(diǎn)L、a、b變化()

注：與各組漂白前比較，aP＜0.05。

組別A組漂白前即刻1周2周B組漂白前即刻1周2周C組漂白前即刻1周2周D組漂白前即刻1周2周L值a值b值73.45±1.49 80.53±2.00a78.84±2.06a78.38±1.77a1.70±1.17 1.17±1.11a1.31±1.33a1.27±1.17a10.25±2.57 7.15±2.71a7.54±2.47a7.45±2.57a73.30±1.39 80.18±1.89a78.45±1.56a78.51±1.39a1.70±0.88 1.20±0.85a1.39±0.78a1.44±0.88a10.48±2.24 7.46±1.80a7.69±1.64a7.99±2.24a73.23±2.03 79.94±2.42a78.50±1.81a78.53±2.38a1.69±0.72 1.18±0.66a1.30±0.61a1.40±0.70a10.43±1.97 7.43±1.68a7.85±1.35a8.09±1.49a73.57±2.27 80.04±2.00a78.72±2.19a79.00±2.27a1.69±0.78 1.19±0.82a1.33±0.73a1.48±0.78a10.05±2.78 7.01±2.39a8.08±2.61a8.43±2.78a

2.4 硬度變化與顏色變化相關(guān)性 各組漂白后再礦化階段，硬度變化及顏色變化的相關(guān)性及相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表4。A組兩指標(biāo)變化無(wú)相關(guān)性(P=0.312)；B、C、D組硬度變化與顏色變化均具有相關(guān)性(P＜0.05)。B組低度負(fù)相關(guān)，C、D組中度負(fù)相關(guān)，當(dāng)ΔKHN(負(fù)值)升高，硬度值增加時(shí)，顏色ΔE降低。即在漂白后再礦化過(guò)程中，顏色ΔE向基線回升，而顯微硬度值增加。

表4 各組ΔKHN與ΔE的相關(guān)性分析

3 討論

本實(shí)驗(yàn)采用30%HP溶液漂白60 min以達(dá)到脫礦的效果。氟化鈉是臨床常用的再礦化制劑，再礦化效果已有大量文獻(xiàn)報(bào)道[9]。漂白中氟化鈉的使用可以與漂白劑混合使用，也可以在漂白后使用氟化鈉凝膠等。酪蛋白磷酸肽(CPP)是牛奶酪蛋白酶解得到的生物活性肽，添加無(wú)定形磷酸鈣(ACP)可結(jié)合成酪蛋白磷酸肽鈣磷復(fù)合體(CPP-ACP)。本實(shí)驗(yàn)顯微硬度變化，氟化鈉及護(hù)牙素再礦化一周時(shí)，尚無(wú)明顯再礦化效果，但氟化鈉已表現(xiàn)出再礦化的趨勢(shì)，兩周時(shí)再礦化效果明顯，顯微硬度增加，兩種制劑效果相同。掃描電鏡結(jié)果顯示含氟護(hù)牙素再礦化效果最為明顯，釉柱結(jié)構(gòu)基本消失，釉質(zhì)表面有一層膜狀的結(jié)構(gòu)形成，釉柱間裂縫基本消失。本實(shí)驗(yàn)掃描電鏡結(jié)果證實(shí)三種制劑均有再礦化效果，含氟護(hù)牙素的效果優(yōu)于其他兩種結(jié)論與顯微硬度相同。本實(shí)驗(yàn)顯微硬度及掃描電鏡均證實(shí)了氟化鈉及護(hù)牙素在漂白中的再礦化作用，結(jié)果類(lèi)似于以往文獻(xiàn)[10]。再礦化處理后各組ΔE一周內(nèi)數(shù)值降低，除護(hù)牙素組外，其他各組與漂白后即刻相比有差異，顏色有恢復(fù)，一周后基本穩(wěn)定，漂白后雖然出現(xiàn)顏色恢復(fù)，但是仍具有漂白效果ΔE＞4。各組L值漂白一周內(nèi)降低，護(hù)牙素及含氟護(hù)牙素的降低值與漂白后即刻比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明護(hù)牙素及含氟護(hù)牙素可減少漂白后顏色L值的恢復(fù)。

關(guān)于再礦化制劑是否影響漂白后的牙體顏色的變化，結(jié)果尚無(wú)定論。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，顏色各指標(biāo)雖然在再礦化處理與人工唾液數(shù)值無(wú)差異，但護(hù)牙素和含氟護(hù)牙素再礦化處理后L值與漂白后即刻相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即護(hù)牙素及含氟護(hù)牙素能減少亮度的恢復(fù)程度?？赡苁亲o(hù)牙素和含氟護(hù)牙素再礦化處理后，釉柱孔隙縮小，被吸收的光線減少，反射增強(qiáng)，亮度增加。因此臨床上漂白后使用護(hù)牙素能促進(jìn)釉質(zhì)再礦化，減少釉質(zhì)表面白斑，使牙齒顏色均勻而又光澤。相關(guān)性分析結(jié)果顯示各實(shí)驗(yàn)組ΔE與Δ KHN有輕到中度負(fù)相關(guān)。由于ΔE與ΔKHN都是隨著時(shí)間變化而變化，因此此相關(guān)關(guān)系不代表因果，說(shuō)明漂白后的再礦化處理階段，各組顏色ΔE回復(fù)，而此過(guò)程中顯微硬度值升高。

綜上所述，漂白后使用氟化鈉，護(hù)牙素及含氟護(hù)牙素均有良好礦化效果，含氟護(hù)牙素再礦化效果更快更好。使用護(hù)牙素及含氟護(hù)牙素能減少顏色的回復(fù)程度，使牙齒顏色更亮。

[1]樊明文.牙體牙髓病學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:128.

[2]趙 奇,哈 慶,馮朝華,等.冷光美白技術(shù)對(duì)人牙釉質(zhì)硬度的影響[J].現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志,2008,22(3):260-262.

[3]劉 峰,徐明明,張 峰,等.漂白對(duì)人牙釉質(zhì)與樹(shù)脂粘接強(qiáng)度的影響[J].中華口腔醫(yī)學(xué)雜志,2008,43(6):360-361.

[4]程 琳,程 敏,馮志遠(yuǎn).不同濃度漂白劑對(duì)牙釉質(zhì)表面微觀形態(tài)影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)藥物與臨床,2012,12(8):990-992.

[5]錢(qián)海馨,張修銀,楊丹苓.IPS-EMPRESSⅡ全瓷修復(fù)變色牙的臨床效果[J].國(guó)際口腔醫(yī)學(xué)雜志,2011,38(3):274-276.

[6]蘇柏華,佘 林,王錦鋒,等.不同濃度過(guò)氧化物漂白劑對(duì)人牙釉質(zhì)表面硬度和粘結(jié)強(qiáng)度的影響[J].福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2012,46 (5):344-346.

[7]王曉玲,徐 娟,趙信義,等.過(guò)氧化脲漂白劑對(duì)樹(shù)脂修復(fù)體邊緣微滲漏影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,31(1): 216-218.

[8]鄭曉昇.牙齒漂白劑的臨床效果評(píng)價(jià)[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2012,33(9):344-346.

[9]曹立群,趙 蕾,沈志英.再礦化療法對(duì)新型漂白術(shù)后釉質(zhì)顯微硬度影響及牙齒增白的效果[J].中華醫(yī)學(xué)美學(xué)美容雜志,2010,16 (1):29-32.

[10]王林虎,王虎中,何 艷.Beyond冷光美白儀治療氟斑牙臨床評(píng)價(jià)[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué),2006,15(9):1073-1074.

Effects of remineralization procedures on the surface physical properties of enamel after HP bleaching

.XIE Sen-sen1,LI Ji-yao2.
1.Department of Stomatology,Shanghai Changhai Hospital,Shanghai 200433,CHINA; 2.Department of Conservative&Endodontic Dentistry,Sichuan University Dental Hospital,Chengdu 610041,Sichuan, CHINA

ObjectiveTo discuss effects of remineralization procedures on the surface physical properties of enamel after HP bleaching.MethodsAll the bovine blocks were distributed randomly among four groups:group A: artificial saliva;group B:0.09%sodium fluoride solution;group C:tooth mousse;group D:tooth mousse plus 0.09% sodium fluoride.Color(L,a,b values)and hardness(KHN)were measured at before and after bleach,and 1 week and 2 weeks after remineralization.The results were analyzed by single factor analysis of variance,and appearance of adamantine layer was observed by electron microscope after remineralization process.ResultsThe surface microhardness value got smaller after bleaching in each group.There was no significant difference in group A during remineralization process,while significant difference was observed one week after remineralization in group D(P＜0.05)and two weeks after remineralization in group B and group C(P＜0.05).There was no pittings in group D and less pittings, erosions in group B,C.ΔE increased 7.22～7.85 units after bleaching,decreased 1.35～1.69 units one week after remineralization and remained the same in the rest time,there was significant difference one week after remineralization in groups A,B,D except group C.Conclusion Using tooth mousse with or without sodium fluoride could decrease the relapse of tooth color,thus increase the aesthetic effect.

Remineralization;Tooth bleaching;Hydrogen peroxide;Enamel

R782

A

1003—6350（2014）09—1252—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.09.0487

2013-11-19)

國(guó)家自然科學(xué)基金（編號(hào)：81170958）

謝森森。E-mail：13823824555@163.com