高效液相色譜法測(cè)定黃瓜中2，4—二氯苯氧乙酸的含量

【摘要】本實(shí)驗(yàn)利用高效液相色譜法對(duì)黃瓜中2，4-二氯苯氧乙酸的含量進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)條件：色譜柱ODSHypersil C18，流動(dòng)相：甲醇+1%磷酸水溶液，柱溫：30℃，流速1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)280nm，回收率為94.13%～103.67%，檢出限為18μg/kg。

【關(guān)鍵詞】高效液相色譜法；2，4-二氯苯氧乙酸

2，4-二氯苯氧乙酸，簡(jiǎn)稱2，4-D。目前被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)和林業(yè)中的雜草控制。2，4-D吸附性很強(qiáng)，用過(guò)的噴霧器如果未清洗干凈，其殘留量對(duì)蔬菜等敏感作物造成藥劑危害，直接影響到人畜安全。長(zhǎng)期食用藥物殘留的蔬菜，會(huì)導(dǎo)致血壓調(diào)節(jié)能力下降，昏迷，嗜睡，胃炎等疾病，本實(shí)驗(yàn)以黃瓜味檢測(cè)對(duì)象，利用高效液相色譜法對(duì)黃瓜中2，4-二氯苯氧乙酸進(jìn)行檢測(cè)。

1、材料與方法

1.1儀器與試劑

LC-20A高效液相色譜儀（日本島津），LCsolution工作站，水為純凈水，甲醇為色譜純，2，4-二氯苯氧乙酸標(biāo)樣購(gòu)自國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。其他試劑為分析純。

1.2色譜條件

色譜柱ODSHypersil（5μs，150×2mm）；流動(dòng)相A：甲醇，流動(dòng)相B：1.0%磷酸水溶液；梯度洗脫；流速：1ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20μL。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置：精確稱取0.2、0.5、1.0mg2，4-二氯苯氧乙酸，用甲醇溶解并稀釋至100ml，配制成2.0、5.0、10.0μg/ml標(biāo)準(zhǔn)液。1.3.2樣品的預(yù)處理。稱取由搗碎機(jī)搗碎的黃瓜5.00g，放入離心管中，4000r/min，離心10min，取上清液至分液漏斗中，用1mol/l磷酸調(diào)節(jié)PH至2.5，加入20ml二氯甲烷，震蕩15min，靜置，待分層后，將下層溶液轉(zhuǎn)移至燒杯中，待濃縮。再加入5ml二氯甲烷，再次萃取，待分層后，將下層溶液轉(zhuǎn)移至燒杯中，將兩次溶液合并。40℃下，氮吹至干，加入2.0ml流動(dòng)相混合液，渦旋，超聲。過(guò)0.45μml慮膜，備用上機(jī)。

2、結(jié)果與分析

2.1色譜條件的選擇

2.1.1流動(dòng)相：分別對(duì)乙腈-水、甲醇-水、甲醇-磷酸水溶液不同配比，在不同的PH進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明甲醇-磷酸水溶液分離效果最好。2.1.1.1磷酸水溶液PH值對(duì)測(cè)定的影響。采用0.2%，0.5%，1%，1.5，1.75%，2%的磷酸水溶液作為流動(dòng)相B，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2

從表2可知，1%磷酸水溶液做為流動(dòng)相時(shí)，靈敏度最高，峰面積最大，故采用1%的磷酸水溶液作為流動(dòng)相緩沖溶液。2.1.2波長(zhǎng)的選擇：在270-300nm波長(zhǎng)進(jìn)行選擇，結(jié)果表明280nm靈敏度最高。

2.2線性關(guān)系

按濃度由低到高的順序，分別對(duì)2.0、5.0、10.0μg/ml標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)樣，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線y=1.897307×10-5，相關(guān)系數(shù)r=0.9999，具有良好的線性關(guān)系。圖1為標(biāo)準(zhǔn)溶液與實(shí)際樣品色譜圖：其中1為樣品色譜圖，2為標(biāo)準(zhǔn)溶液加樣品色譜圖，3為10.0μg/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖。

2.3回收率試驗(yàn)

測(cè)定黃瓜中2，4-二氯苯氧乙酸的回收率，取6份樣品（每份5.00g），在樣品中各加入標(biāo)樣2μg，5μg，10μg。所得5份樣品得平均回收率98.95%

2.4檢出限的測(cè)定

取不含2，4-二氯苯氧乙酸的黃瓜作為空白液，按1.3.2實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定，重復(fù)測(cè)定8次，以空白結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍求得定量檢出限為18μg/kg。

3、結(jié)論

在檢測(cè)條件：色譜柱ODSHypersil C18，流動(dòng)相：甲醇+1%磷酸水溶液，柱溫：30℃，流速1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)280nm的條件下利用高效液相色譜法對(duì)黃瓜中2，4-二氯苯氧乙酸的含量進(jìn)行檢測(cè)，回收率為97.88%，檢出限為18μg/kg。本方法具有靈敏度高、雜質(zhì)干擾少、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，且線性范圍良好，重現(xiàn)性好，回收率高，是一個(gè)適用性很好的測(cè)定方法。本方法對(duì)于檢測(cè)黃瓜等蔬菜中2，4-二氯苯氧乙酸殘留量的快速檢測(cè)有著重要的意義。

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