血栓與止血檢驗研究進展

摘要：隨著科技的不斷發(fā)展，對于血栓和止血檢驗研究已經(jīng)獲得了很大的突破。其中，這方面的研究主要有該疾病的學(xué)科、止血機制以及凝血機制等。實際上，實驗室檢驗的用處是多種多樣的，比如可以指導(dǎo)抗凝治療患者如何用藥；可以評價易栓癥；可以診斷出某些出血性疾??；可以對彌散性血管內(nèi)凝血，又叫做DIC，進行實驗診斷；可以預(yù)測血栓前狀態(tài)等。因此，開展血栓與止血檢驗研究在臨床方面有著不可小覷的作用。筆者就自身的從醫(yī)經(jīng)驗以及查閱相關(guān)資料，對血栓與止血檢驗研究進展情況進行分析，希望能對相關(guān)研究起到參考作用。

關(guān)鍵詞：止血；實驗室檢驗；血栓；研究

Research Progress of Thrombosis and Hemostasis

XIE Ke-liang

(clinical Laboratory，The second people's Hospital of Baise，Baise 533000，Guangxi，China)

Abstract：With the continuous development of technology，testing for Thrombosis and Hemostasis Research has gained a great breakthrough. Among them，the research in this area are mainly academic，bleeding and clotting mechanism，the mechanism of the disease.In fact，the usefulness of a variety of laboratory tests，such as how to guide anticoagulation therapy in patients with medication;thrombophilia can be evaluated;can diagnose certain bleeding disorders;can be disseminated intravascular coagulation，also known as DIC conduct laboratory diagnosis;predict prothrombotic status.Therefore，to thrombosis and hemostasis testing has underestimated the role of research in clinical areas.The author's own experience as well as access to relevant information on a career in medicine，research on thrombosis and hemostasis tests to analyze the progress，hoping to play a reference role in research.

Key words：Bleeding;Laboratory testing;Thrombosis;Research

1常用的幾種先進的血栓與止血檢驗方式

在目前的階段來說，我們通常有以下的一些方法對血栓與止血實驗進行檢驗：①生物芯片技術(shù)；②生物化學(xué)法，這一方法又被叫做產(chǎn)色底物法；③免疫學(xué)法；④分子生物學(xué)技術(shù)；⑤生物學(xué)方法，這一方法也被叫做凝固法；⑥流式細胞術(shù)，也被簡稱為FCM；⑦生物傳感器技術(shù)；⑧質(zhì)譜技術(shù)；⑨干化學(xué)技術(shù)；⑩物理學(xué)方法。我們可以通過以下的一覽表簡要了解這些檢驗方法的檢驗項目和用途，并詳細介紹了幾種檢測方法。見表1。

2新的檢驗技術(shù)的出現(xiàn)

2.1生物芯片技術(shù)這一技術(shù)主要是把抗原和抗體、寡核苷酸、基因組DNA、cDNA以及肽固定在類如玻璃片、硅片等一些固相介質(zhì)之上，這樣就組合為生物分子點陣，等到生物芯片當中的探針分子和測物里面的生物分子產(chǎn)生相互作用或者雜交作用時，再開展分析雜交信號的工作，選用儀器室共聚焦顯微掃描儀。我們的分類標準是按照生物芯片之上的分子種類進行劃分，一類是蛋白芯片，它能夠檢測蛋白水平，另一類則是基因芯片，它則能夠檢測基因水平[1]。這種檢測技術(shù)有著非常明顯的優(yōu)點，它在篩查臨床大量標本方面有著巨大優(yōu)勢。

Almavi進行了一項實驗，即對數(shù)量為198例深靜脈血栓患者以及697例正常對照的5、10-甲基四氫葉酸還原酶，C677T、凝血酶原（PRT）G20210A和FV-Leiden突變對于深靜脈血栓患者發(fā)病中產(chǎn)生的作用通過生物芯片技術(shù)開展研究。所得出的結(jié)果是：相比于MTHFRC677T突變來說，PRT G 20210以及FV-Leiden G 1691 A對于深靜脈血栓患者來說屬于一種危險性更加高的因素。

本著讓生物芯片在臨床上發(fā)揮更大的作用，Abbott創(chuàng)造性地開展了一項檢測，即對數(shù)量為296的靜脈血栓患者以及數(shù)量為163的正常對照的PRTG 20210A突變借助于微粒子酶免疫分析（MEIA）開展監(jiān)測，所用儀器是LCx分析儀。所檢測出的結(jié)果和被這一行業(yè)認可的聚合酶鏈反應(yīng)-限制性長度片段多態(tài)性，也被叫做（PCR-RFLP）的結(jié)果是相吻合的。這也就說明了精準、迅速、敏感已經(jīng)是LCx MEIA非常顯著的優(yōu)點，它能夠篩查臨床PRTG 20210A 等相關(guān)的突變基因[2]。針對DVT比較常見的PRTG20210A、MTHFRC677T以及FV一LeidenG169lA，Erali等通過羅氏公司名叫LightcydeSNP分析儀的芯片以及另一公司，即Nanogen公司的電子芯片開展檢驗，所測驗的結(jié)果顯示出電子芯片具有以下幾項有點：如重復(fù)性以及精確性等。

2.2流式細胞術(shù)（FCM）除了生物芯片技術(shù)，流式細胞術(shù)在血栓與止血性疾病方面的研究也是同樣不甘落后的，它的研究內(nèi)容主要有兩大方面，一方面是血管內(nèi)皮細胞，另一方面是血小板。值得一提的是，流式細胞術(shù)在這方面的研究熱點也有兩大方面，分別是血小板的功能和血小板的結(jié)構(gòu)。隨著血小板的研究獲得的更大發(fā)展以及單克隆抗體標記技術(shù)獲得的進一步發(fā)展，使得流式細胞術(shù)在血小板的研究方面越來越廣泛。以前流式細胞術(shù)只用于血栓和止血性疾病的科研型研究，現(xiàn)在這種研究已經(jīng)臨床應(yīng)用研究。時至今日，血栓和止血性疾病中應(yīng)用了許多新的參數(shù)進行實驗診斷，比如說這對于GPnb/Illa位點定量分析，再如血小板微顆粒(PMP)等。

3血栓與止血檢驗研究的發(fā)展情況

3.1血凝分析儀呈現(xiàn)新的發(fā)展趨勢老的方法大多數(shù)是通過手工操作開展血栓與止血檢驗的，這種方法有著較多的缺陷，如消耗更多的人力、物力以及時間，更重要的是這種檢驗方法所得出的檢驗結(jié)果精密度與準確度都不是很高，這種檢驗方法已經(jīng)逐漸退出人們的視線。在現(xiàn)在，血凝分析儀成為了這方面的新寵。我國先后引進了數(shù)量眾多的技術(shù)領(lǐng)先的血栓與止血檢驗儀器，比如血小板功能分析儀、血漿（全血）血小板聚集儀等，所引進的儀器有著簡便、精確的優(yōu)點，很好地適應(yīng)了臨床治療的需求。

血凝分析儀有下述幾個發(fā)展特點：首先是趨于全自動化方向發(fā)展?，F(xiàn)在，我們的視線中已經(jīng)出現(xiàn)了非常先進的能夠全自動化工作的凝血分析工作站系統(tǒng)。這一套系統(tǒng)主要由以下幾方面儀器組成：①MDA180全自動凝血分析儀；②離心器;③是移動式機器人。這種發(fā)展趨勢能夠大大節(jié)省檢驗的人力物力，還能提高效率和準確性。

其次是趨于多功能化方向發(fā)展。在現(xiàn)代，很多的血凝分析儀都已經(jīng)可以通過不同原理的方式同時開展分析，比如說可以在開展檢測的時候同時運用如下的方法方法進行檢測：如免疫學(xué)、干化學(xué)、生物學(xué)、超聲分析以及物理化學(xué)等。

再次是趨于自動化方向發(fā)展?，F(xiàn)在的血凝分析儀已經(jīng)能夠自動化處理一系列動作，不管是標本的前處理，還是分析檢測檢測結(jié)果，亦或是完成檢測之后對標本進行自動拆卸，或者是對儀器進行清理，都實現(xiàn)了自動化。

最后是趨于智能化方向發(fā)展。自動血凝分析儀不僅能夠同時檢測各個不同的項目，還可以對這些項目開展任意的組合，這就使得標本的隨時插入成為現(xiàn)實，檢測也變得更加簡便。除此之外，儀器當中還含有質(zhì)量控制系統(tǒng)，這能夠提升檢測結(jié)果的精確度。

3.2血栓與止血檢驗臨床應(yīng)用有新特點就現(xiàn)在來說，我們可以總結(jié)出血栓與止血檢驗臨床應(yīng)用有著以下幾方面的特點。

首先是新的參數(shù)以及致病基因正在陸續(xù)地涌現(xiàn)出來。Hamilton等曾經(jīng)進行過研究，發(fā)現(xiàn)若是血小板中沒有足夠的蛋白酶激活受體4的話，則會造成出血時間延長的后果，除此之外還會血栓的形成產(chǎn)生阻礙作用。造成這種狀況主要有以下幾方面的原因：①蛋白酶激活受體4的作用是在血小板中對它本身和凝血酶的信號傳導(dǎo)進行介導(dǎo)，若是蛋白酶激活受體4含量不足，那么血小板將不再會對凝血酶做出應(yīng)答反應(yīng)；②蛋白酶激活受體4還有另外一個作用，那就是其還是血管細胞壁對于凝血酶反映的信號進行傳導(dǎo)的時候參與其中，這個過程使得止血以及血栓都會受其影響。

其次是傳統(tǒng)參數(shù)有了新的參考意義。我們知道，血小板檢測有很多項數(shù)據(jù)，其中的一項重要的傳統(tǒng)參數(shù)就是平均血小板體積，也稱MPV。這一數(shù)據(jù)的作用是對平均血小板體積的大小做出反應(yīng)。在近段時間，有很多的研究表明平均血小板體積心腦血管疾病有著非常緊密的聯(lián)系。研究結(jié)果顯示：平均血小板體積能夠作為心肌梗死這一疾病的獨立的預(yù)測標志物，心肌梗死患者的平均血小板體積要比正常人的值要高出比較多的數(shù)值(P<0.001)(oR=2.6，95%CI1.3~5.1)；除此之外，研究者還選取了新西蘭、澳大利亞等10個國家的3000多名人員隨機進行對照實驗。實驗結(jié)果表明：①腦血管疾?。X卒中）患者的平均血小板體積相比于要比正常人的值要高出相當多的數(shù)值(P<0.001)(OR=2.6，95%Cl1.3~4.1)；②腦血管患者的平均血小板體積大幅度升高和其本身預(yù)后較差有著很大的關(guān)系。因此，平均血小板體積能夠作為腦卒中這一疾病的獨立的預(yù)測標志物。

3.3對尚不成熟的技術(shù)提出質(zhì)疑曾經(jīng)有研究人員聯(lián)合了意大利、美國等多個國家以及很多的中心評估了血小板功能分析儀（PFA-100）所具有的實際臨床應(yīng)用價值。這項研究結(jié)果顯示：血小板功能分析儀固然能夠?qū)σ徊糠值难“寮膊〉漠惓＝Y(jié)果做出顯示，它同樣能夠?qū)ρ“宓暮Y查具備相當程度的特異度以及靈敏度[3]。然而，血小板分析儀阻塞時間作用在治療檢測血小板疾病之上，目前還沒有確切的結(jié)論。研究人員所得出的結(jié)論為：血小板分析儀阻塞時間可以有選擇性地作為評估血小板功能以及血小板疾病的參考數(shù)據(jù)，這一數(shù)據(jù)能不能產(chǎn)生治療血小板疾病中對血小板進行檢測的作用，這到目前還不能得出確切的結(jié)論。

4結(jié)論

綜上所述，我們可以清楚地看到血栓與止血檢驗研究獲得了很大的進步，在臨床應(yīng)用上也有了新的突破，特別是檢測技術(shù)和方法越來越先進，檢驗項目也趨于多樣化，甚至檢驗過程也逐漸向簡易化、自動化方向發(fā)展?？偠灾@方面的檢驗水平分子化趨勢越來越明顯，伴隨此變化的還有臨床應(yīng)用的系統(tǒng)化以及定量化，這些進步受到世人關(guān)注。然而，我們也必須要面對一個問題，那就是在血栓和止血檢驗項目標準化方面還存在著一些明顯的問題，比如說儀器不同，但是所檢測的項目相同，那么所檢測出的不同結(jié)果進行對比，也會存在一定的問題。這個問題還需要相關(guān)的人員進行進一步研究解決。

參考文獻：

[1]周紅. 血栓與止血檢驗診斷的發(fā)展趨勢[J]. 臨床檢驗雜志，2008，01:74-75.

[2]王鴻利. 血栓與止血檢驗進展[J]. 臨床內(nèi)科雜志，2004，01:57-60.

[3]于水，倫語，倫立民. 血栓與止血檢驗研究進展[J]. 國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，22:2743-2745.

編輯/哈濤