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    C反應(yīng)蛋白的臨床應(yīng)用研究進(jìn)展

    2014-04-29 00:00:00周家順
    醫(yī)學(xué)信息 2014年15期

    C反應(yīng)蛋白又稱CRP[1],是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,可由肝細(xì)胞合成[2]。當(dāng)病原體輕度刺激或組織損傷時(shí),肝細(xì)胞合成迅速啟動(dòng),6h內(nèi)C反應(yīng)蛋白濃度達(dá)到病理水平(>8mg/L),48~72h內(nèi)達(dá)到峰值,直接反映早期組織炎性壞死。CRP作為急性時(shí)相反應(yīng)的一個(gè)極靈敏的指標(biāo),具有多種生物活性,它的濃度和分泌水平不因進(jìn)食和抗炎藥物等改變。因此C反應(yīng)蛋白高低變化與疾病的炎性反應(yīng)及嚴(yán)重程度具有重要的相關(guān)性,C反應(yīng)蛋白是最有效和最通用的炎性反應(yīng)標(biāo)記物。在細(xì)菌與病毒感染、組織創(chuàng)傷、腦梗死、心肌梗塞、心血管疾病等多種疾病中[3],C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)具有一定的意義。本文對(duì)C反應(yīng)蛋白的臨床應(yīng)用研究進(jìn)展綜述如下。

    1 C反應(yīng)蛋白的生物學(xué)特性

    C反應(yīng)蛋白是一種敏感的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白[4],于1930年由Tillet和Francis在一些急性病患者的血清中發(fā)現(xiàn),多由白細(xì)胞介素-6等炎性分子刺激肝臟細(xì)胞合成,能和肺炎鏈球菌的夾膜C多糖起沉淀反應(yīng),它由5個(gè)多肽蓮亞單位以非共價(jià)鍵結(jié)合而成,CRP的分子量約105500道爾頓,沉降系數(shù)為7.58,等電點(diǎn)為5.7~6.0。每個(gè)分子含有5個(gè)相同的未糖基化的多肽亞單位,每個(gè)亞單位由1條206個(gè)氨基酸殘基,分子量23017道爾頓的多肽鏈組成[5],是全身性炎性反應(yīng)的極靈敏的非特異標(biāo)志物。CRP可以引發(fā)對(duì)侵入細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)和吞噬作用,結(jié)合的的復(fù)合物具有補(bǔ)體系統(tǒng)的激活作用,表現(xiàn)為炎性反應(yīng)。健康人血清中C反應(yīng)蛋白含量極微。在炎性疾病、組織損傷等情況下幾小時(shí)內(nèi)C反應(yīng)蛋白濃度迅速升高,升高幅度、持續(xù)時(shí)間都與感染程度呈正相關(guān)[6]。鑒于其較高的準(zhǔn)確度和靈敏度,臨床上將CRP作為最有效和最通用的炎性反應(yīng)標(biāo)記物。

    2 C反應(yīng)蛋白生理變異及參考范圍

    成人和兒童C反應(yīng)蛋白0.068~8.2mg/L,新生兒血漿C反應(yīng)蛋白較少,小于或等于0.6mg/L,出生后第4d~1個(gè)月的嬰兒C反應(yīng)蛋白小于或等于1.6mg/L,分娩母親小于或等于47mg/L,炎癥刺激時(shí)C反應(yīng)蛋白大于8mg/L。中國(guó)人的CRP水平明顯低于白種人,未發(fā)現(xiàn)CRP與吸煙、飲酒、體育鍛煉有關(guān)。另外,鞠曉紅[7]調(diào)查高海拔地域居住的裕固族表面健康人群,C反應(yīng)蛋白生理指標(biāo)明顯高于國(guó)內(nèi)參考區(qū)以及本室參考范圍;健康人群[8]CRP水平呈偏態(tài)分布,男性中位數(shù)為1.92 mg/L,女性為2.97 mg/L,女性高于男性,差異具有顯著性,50歲以上年齡組CRP水平明顯高于其他年齡組(P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此,各實(shí)驗(yàn)室室根據(jù)不同區(qū)域、不同人群、民族、不同檢測(cè)方法及不同標(biāo)準(zhǔn)品來源制定參考范圍。

    3 C反應(yīng)蛋白檢測(cè)的臨床實(shí)驗(yàn)室

    臨床上最早測(cè)定CPR的方法是基于凝集反應(yīng)的原理,目前,檢測(cè)CPR的實(shí)驗(yàn)室方法很多。常用的方法有如下幾種。

    3.1單向免疫擴(kuò)散法(簡(jiǎn)稱單擴(kuò)法)單擴(kuò)法基本原理是在瓊脂膠中混入一定量的抗體,使待測(cè)抗原溶液從局部向瓊脂內(nèi)自由擴(kuò)散,在沉淀區(qū)域內(nèi)形成可見的沉淀環(huán),沉淀環(huán)直徑或面積的大小與抗原量相關(guān)。單擴(kuò)法作為簡(jiǎn)易抗原定量檢測(cè)方法有特異性高,重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),因而一些中小型醫(yī)院應(yīng)用得較多。但此法最大的缺點(diǎn)是在抗原過量時(shí),反應(yīng)體系不出現(xiàn)沉淀,CRP濃度過高時(shí),會(huì)出現(xiàn)較高的假陰性,制約了其臨床上的廣泛應(yīng)用。

    3.2膠乳凝集法膠乳凝集法是臨床較常用的血清學(xué)方法,原理是膠乳試劑用純化的抗人CRP抗體致敏,能和患者血清中CRP發(fā)生特異性反應(yīng),數(shù)分鐘內(nèi)呈現(xiàn)清晰的凝集顆粒,出現(xiàn)凝集者為陽性,未出現(xiàn)凝集者為陰性。此方法操作簡(jiǎn)單,敏感性、特異性較高。但易受補(bǔ)體、類風(fēng)濕因子等因素的干擾,產(chǎn)生假陽性結(jié)果。因此檢測(cè)時(shí)應(yīng)對(duì)待測(cè)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理,除去干擾因素。

    3.3速率散射比濁法速率散射比濁法用一定波長(zhǎng)的光沿水平軸照射,碰到小顆粒的免疫復(fù)合物可導(dǎo)致光散射,散射強(qiáng)度與抗原抗體免疫復(fù)合物的含量成正比。此法是一種抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的動(dòng)態(tài)測(cè)定法,可快速、準(zhǔn)確地測(cè)量樣品中抗原的含量,并且可在多種自動(dòng)化檢測(cè)儀上測(cè)定結(jié)果。速率散射比濁法在臨床上已作為CRP常規(guī)檢測(cè)手段。有研究顯示:速率散射比濁法在檢測(cè)結(jié)果精確度、重復(fù)性、靈敏度方面均優(yōu)于單擴(kuò)法。在靈敏度、準(zhǔn)確度上與膠乳凝集法相比也具有顯著性差異(P<0.05)。

    3.4免疫透射比濁法免疫透射比濁法是實(shí)驗(yàn)室常用檢測(cè)CRP的方法,測(cè)定透過溶液的吸光度來反映待測(cè)抗原的含量。當(dāng)光線透過反應(yīng)體系時(shí),溶液中的抗原抗體免疫復(fù)合物可對(duì)光線加以吸收和反射,使透射光減少。免疫復(fù)合物越多,吸收的光線越多,透射光越少,這種變化可用吸光度表示。若抗體量固定,所測(cè)吸光度與免疫復(fù)合物的量成正比,也與待測(cè)抗原的量成正比。以一系列已知濃度的抗原標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照,即可以測(cè)出受檢物含量。研究表明,在回收率、重復(fù)性方面多點(diǎn)法優(yōu)于二點(diǎn)法。溶血、黃疸對(duì)CRP檢測(cè)的干擾不大,但多點(diǎn)法的干擾明顯低于二點(diǎn)法。作者認(rèn)為,原因主要是由于免疫比濁法其濁度與免疫復(fù)合物的濃度不能呈很好的線性關(guān)系。因此,不能按傳統(tǒng)的比色方法進(jìn)行測(cè)定,為確保結(jié)果可靠,建議用全自動(dòng)檢測(cè)儀測(cè)定CRP時(shí),應(yīng)采取多點(diǎn)定標(biāo)方式測(cè)定。

    4 C反應(yīng)蛋白檢測(cè)的臨床應(yīng)用

    4.1區(qū)別細(xì)菌與病毒感染大量臨床資料證實(shí)[9],在鑒別細(xì)菌與病毒感染方面[10],C反應(yīng)蛋白同白細(xì)胞計(jì)數(shù)一樣靈敏。當(dāng)機(jī)體被細(xì)菌感染時(shí),血清中C反應(yīng)蛋白濃度明顯上升,升高的幅度同細(xì)菌感染的程度相符合;當(dāng)被病毒感染時(shí),C反應(yīng)增高不明顯,血清濃度正?;蜉p度升高。作為診斷指標(biāo)之一,檢測(cè)C反應(yīng)蛋白可在感染早期可靠的判斷是細(xì)菌感染或者是病毒感染,以決定是否進(jìn)行抗生素治療,從而有效的避免不必要的抗生素治療,減少抗生素濫用導(dǎo)致的一系列問題[11]。

    4.2組織創(chuàng)傷術(shù)后感染大面積組織嚴(yán)重?fù)p傷時(shí),如燒傷患者[12],C反應(yīng)濃度顯著升高,如果沒有并發(fā)癥感染,3d后C反應(yīng)蛋白濃度逐漸下降,如期間并發(fā)癥感染,C反應(yīng)濃度又會(huì)升高,所以可用C反應(yīng)蛋白監(jiān)測(cè)整個(gè)病程。C反應(yīng)蛋白顯著升高,可警示燒傷患者合并敗血癥,應(yīng)及時(shí)治療。手術(shù)后6h內(nèi)C反應(yīng)蛋白濃度升高,如果沒有并發(fā)癥時(shí),C反應(yīng)蛋白應(yīng)在2~3d后下降至正常,如術(shù)后出現(xiàn)感染,則C反應(yīng)蛋白濃度長(zhǎng)時(shí)間不下降。

    4.3急性腦梗死文獻(xiàn)報(bào)道[13]進(jìn)展型卒中與完全型卒中患者血清C反應(yīng)蛋白水平高于對(duì)照組,進(jìn)展型卒中患者血清C反應(yīng)蛋白水平亦高于完全型卒中患者,這也說明炎癥反應(yīng)參與了急性腦梗死的發(fā)生。

    4.4器官移植器官移植[14]后,C反應(yīng)蛋白是一個(gè)很有用的監(jiān)測(cè)指標(biāo),在器官移植后的前3d,C反應(yīng)蛋白升高,然后開始下降。如C反應(yīng)蛋白濃度下降,可懷疑存在排異反應(yīng)。

    4.5抗生素療效觀察,療程監(jiān)測(cè)肝臟合成CRP有6~12h時(shí)的延遲期,在感染發(fā)生后的前幾個(gè)小時(shí)內(nèi)用CRP來檢測(cè)是否存在細(xì)菌感染,通常做法是給予抗生素治療。隨著感染被控制,CRP很快下降,1d內(nèi)可降至原有濃度的50%。如果CRP濃度下降,則說明治療有效;如降到正常范圍內(nèi),即開始停藥。對(duì)疑有敗血癥的新生兒,在24~48h內(nèi)進(jìn)行CRP的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè),可作為是否使用抗生素治療的的可靠依據(jù)[15,16]。

    4.6風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡一般認(rèn)為C反應(yīng)蛋白水平是X線骨浸蝕進(jìn)展最有意義的指標(biāo)之一,C反應(yīng)蛋白與疾病的嚴(yán)重程度,關(guān)節(jié)的咬合程度及受累的關(guān)節(jié)數(shù)相關(guān),所以可用來判斷類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)病程。在系統(tǒng)性紅斑狼瘡[17]中,不管病情是否嚴(yán)重,C反應(yīng)蛋白濃度僅輕度升高,甚至不升高。

    4.7心肌梗塞急性心肌梗塞時(shí)C反應(yīng)蛋白濃度升高,在無溶栓治療時(shí)與梗死呈正相關(guān)。近年研究表明,冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂及伴隨附壁血栓可能是急性冠狀動(dòng)脈綜合癥(ACS)的主要發(fā)病機(jī)制,而炎性反應(yīng)的激活可能是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣斑塊不穩(wěn)定的主要因素。

    4.8直腸癌風(fēng)險(xiǎn)研究表明[18]結(jié)腸直癌風(fēng)險(xiǎn)隨著炎癥反應(yīng)而增加,患者慢性腸病特別是潰瘍性結(jié)腸炎的個(gè)體發(fā)生結(jié)直腸癌的風(fēng)險(xiǎn)顯著高于未患病者,并且發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)隨著病性延長(zhǎng)而升高。實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn),炎癥反應(yīng)能促進(jìn)結(jié)腸腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化為腺癌細(xì)胞。

    4.9血管疾病風(fēng)險(xiǎn)和代謝綜合癥的的有用標(biāo)志目前22項(xiàng)前蟾性流行病學(xué)研究表明C反應(yīng)蛋白是預(yù)測(cè)心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)[19]和代謝綜合癥的有用標(biāo)志;六項(xiàng)對(duì)研究顯示檢測(cè)C反應(yīng)蛋白對(duì)心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)的價(jià)值超過了Framingham危險(xiǎn)性積分的價(jià)值;同時(shí)8項(xiàng)對(duì)列研究結(jié)果顯示,C反應(yīng)蛋白檢測(cè)為代謝綜合癥和2型糖尿病增加了預(yù)示信息。

    4.10支氣管炎和肺炎的區(qū)別由于許多下呼吸道感染是混合感染,結(jié)合病吏及物理檢查,同時(shí)測(cè)定C反應(yīng)蛋白濃度有助于鑒別診斷。C反應(yīng)蛋白濃度大于60mg/L提示為細(xì)菌性肺炎。急性支氣管炎很少于細(xì)菌性感染,也很少導(dǎo)致C反應(yīng)蛋白濃度顯著升高,所以測(cè)定C反應(yīng)蛋白有助于鑒別支氣管炎和肺炎[20]的發(fā)病原因。

    4.11屎路感染C反應(yīng)蛋白在區(qū)分一般的下尿道感染(膀胱炎)及嚴(yán)重的上尿道感染(腎盂腎炎)時(shí),是一個(gè)可靠的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。C反應(yīng)蛋白濃度大于100~400mg/L,提示存在細(xì)菌性腎盂腎炎。

    4.12惡性腫瘤和良性腫瘤區(qū)別有文獻(xiàn)報(bào)道,在惡性腫瘤時(shí)C反應(yīng)蛋白定量反應(yīng)極為敏感,其測(cè)定值明顯高于良性腫瘤,表明C反應(yīng)蛋白對(duì)惡性腫瘤及各種良性腫瘤的鑒別診斷具有一定的臨床價(jià)值。

    綜上所述,CRP作為一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,使其不僅成為最有效和最通用的炎性反應(yīng)標(biāo)記物,也對(duì)感染、組織創(chuàng)傷、腦梗死、心肌梗塞、心血管疾病等多種疾病的輔助診斷有很重要的參考價(jià)值。

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