小鼠高脂血癥模型的建立

摘要：目的 介紹一種簡便的小鼠高脂血癥造模方法。方法 采用高脂乳劑灌胃建立小鼠高脂血癥模型，用酶比色法測定模型組與正常組血清總膽固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量。結(jié)果 高脂模型組小鼠死亡率低，與正常組相比較，TC、TG、HDL-C及LDL-C具有顯著性差異。結(jié)論 本造模方法成功率高，切實可行。

關(guān)鍵詞：高脂血癥；總膽固醇；甘油三脂；高密度脂蛋白；低密度脂蛋白

高脂血癥是指各種原因（飲食、生活方式、遺傳等因素）導(dǎo)致的血漿中膽固醇、甘油三酯濃度含量超過正常值和低密度脂蛋白過高和高密度脂蛋白過低的一種全身脂代謝異常。大量的流行病學(xué)調(diào)查和研究表明，高脂血癥是動脈粥樣硬化和冠心病發(fā)病的最重要的脂類危險因素[1-2]。因此，建立簡便實用的動物高脂血癥模型，篩選和研究療效準(zhǔn)確的降脂藥物，對于高脂血癥等心血管疾病的治療具有重要意義。本研究在以前研究的基礎(chǔ)上[3-4]，進一步改進了高脂乳劑的配制方法，成功的建立了小鼠高脂血癥模型。

1資料與方法

1.1一般資料 健康雌雄各半小白鼠40只，22～30 d齡，體重為22～28 g。

1.2實驗主要試劑和儀器 膽固醇，膽酸鈉，丙基硫氧嘧啶，吐溫-80，丙二醇，低密度脂蛋白試劑盒，總膽固醇試劑盒，甘油三酯試劑盒，高密度脂蛋白試劑盒，全自動生化分析儀等。

1.3方法

1.3.1高脂乳劑的配制 高脂乳劑配制：取豬油35 g置于一500 mL燒杯中，在電爐上加熱融化，加入30 g膽固醇溶化，再加入2 g膽酸鈉和1g丙基硫氧嘧啶充分搖勻，然后放入20 mL吐溫-80，20 mL的丙二醇及30 mL蒸餾水，不斷攪拌。待丙基硫氧嘧啶溶解后，冷卻至室溫，再加蒸餾水至1000 mL，并充分混勻。即成30%膽固醇，35%豬油，2%膽酸鈉和1%丙基硫氧嘧啶的\"高脂乳劑\"。冰箱保存使用時，先于37℃的水浴中溶化。

1.3.2動物分組 隨機分為兩組，正常對照組、高脂血癥模型組，每組20只小鼠。

1.3.3給藥方法

1.3.3.1高脂血癥模型組 每天上午灌胃高脂乳劑20 mL/Kg，下午灌胃2%吐溫溶液20 mL/Kg，連續(xù)30 d。

1.3.3.2正常對照組 每天上午灌胃蒸餾水20 mL/Kg，下午灌胃2%吐溫溶液20 mL/Kg，連續(xù)30 d。

1.3.4測定指標(biāo)及方法[3] 總膽固醇（TC）：酶試劑CE-COD-POD法；甘油三脂（TG）：酶試劑GPO-POD法；高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）：酶試劑GPO-POD法；低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）：Friedewald公式計算。

2結(jié)果

血清指標(biāo)的檢測結(jié)果，見表1。

從表1中可看出，高脂模型組與正常對照組相比，TG的含量升高（P<0.05），TC和LDL-C的含量升高更明顯（P<0.01），而血清HDL-C的含量則明顯降低（P<0.01）。說明高脂血癥小鼠存在著明顯的血脂代謝紊亂，提示高脂血癥小鼠模型建立成功。

3討論

用于建立高脂血癥模型的動物，在血清脂蛋白構(gòu)成上、肝臟膽固醇與脂蛋白代謝酶的調(diào)節(jié)方面，應(yīng)盡可能地與人相近[5]。所以要考慮4個關(guān)鍵因素：①動物對膳食脂質(zhì)的血脂變化模式是否接近于人；②動物的膳食脂質(zhì)負荷是否接近于人；③動物肝臟合成膽固醇的量占膽固醇總合成量的比例越小越好；④動物模型的可操作性。小鼠在調(diào)血脂藥臨床前研究中應(yīng)用越來越多。此外，也有利用小鼠復(fù)制高脂血癥的報道。總之，選用高脂血癥動物模型，應(yīng)從模型的形成、實驗指標(biāo)、實驗經(jīng)費、動物成本和飼養(yǎng)以及實驗要求的時間等多方面進行綜合考慮，選擇最符合所作實驗各項要求的動物模型。

用本方法建立小鼠高血脂模型，驗證了已知降脂藥物決明子提取物的降脂作用，發(fā)現(xiàn)這種藥物均能有效的降低血清總膽固醇和甘油三脂。因此，本造模方法切實可行、簡便、經(jīng)濟，適合于影響膽固醇和甘油三脂吸收，加速其清除的藥物的初篩。

參考文獻：

[1]劉雪梅，吳符火.幾類高脂血癥動物模型的比較[J].中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報，2004，2（2）：132-134.

[2]張智，閃增郁，向麗華.大鼠實驗性高脂血癥兩種造模方法的比較[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2004，10（2）：33-4.

[3]梁紅峰，陳方.高脂血癥模型小鼠生化指標(biāo)的變化[J].廣東微量元素科學(xué)，2004，11（4）：42.

[4]單愛蓮，謝明智.介紹一種小鼠高血脂模型[J].藥學(xué)通報，1986，21（3）：141.

[5]李寶華，鄭廣娟.軟脈降脂膠囊對實驗性高脂血癥大鼠血脂及MDA、SOD、NO的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2004，2（4）：220-222.

編輯/肖慧