改良的腦卒中后抑郁大鼠模型的建立

【中圖分類號(hào)】Q983+.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1002-3763（2014）06-0007-02

腦卒中后抑郁（post—stroke depression，PSD）約占腦卒中患者的1/3，是指腦卒中后出現(xiàn)以快感缺失為核心癥狀的不同程度的抑郁狀態(tài)，且癥狀持續(xù)14d以上，患者中5-25%表現(xiàn)為憂郁（melancholia）。75～95%表現(xiàn)為抑郁（depression o PSD輕者可見食欲喪失、體重偏輕、信心缺乏、睡眠紊亂和早醒；重者有精神運(yùn)動(dòng)遲滯現(xiàn)象及軀體不適。PSD為腦血管病常見并發(fā)癥，腦卒中后第一年發(fā)病率為20—50%，有抑郁的腦卒中患者更容易有注意力、學(xué)習(xí)能力和記憶功能的損害，不僅影響患者的生活質(zhì)量和腦神經(jīng)功能恢復(fù)，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)霈F(xiàn)自傷、自殺等后果[1]。，但腦卒中后抑郁基礎(chǔ)研究相當(dāng)薄弱，有關(guān)腦卒中后抑郁動(dòng)物模型研究更是少見，本文在國(guó)內(nèi)外研究的基礎(chǔ)上改良了腦卒中、孤養(yǎng)和應(yīng)激處理因素復(fù)合制備腦卒中后抑郁大鼠模型[2]。

1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

清潔級(jí)健康成年雄性sD大鼠（鼠齡l2～15月），體質(zhì)量（320±30）g。由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供并飼養(yǎng)，飼養(yǎng)期間給予大鼠標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料及純凈飲水。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 改良的腦卒中后抑郁大鼠模型的建立：大鼠用10%水合氯醛腹腔注射（3ml/kg），麻醉后仰臥固定四肢與頭部，頸正中去毛，酒精消毒后行正中切開，仔細(xì)分離肌肉，找出雙側(cè)頸總動(dòng)脈，并小心分離迷走神經(jīng)，模型組及用藥組用9號(hào)絲線永久性結(jié)扎頸總動(dòng)脈，縫合切口，假手術(shù)組僅做頸正中切口即予縫合。手術(shù)后每天用青霉素4萬(wàn)單位腹腔注射以抗感染，連用3 天。腦卒中后抑郁大鼠模型的復(fù)合制備：局灶性腦缺血大鼠清醒后移人小鼠籠內(nèi)進(jìn)行16 天孤養(yǎng)，在術(shù)后1周相繼給予7 天的中度隨機(jī)的應(yīng)激處理。應(yīng)激因素包括：電擊腳底，寒冷刺激，熱刺激，搖晃，夾尾，禁水、禁食，晝夜顛倒。以上刺激一天一至兩種隨機(jī)抽選。以達(dá)到復(fù)合制備出腦卒中后抑郁大鼠模型。動(dòng)物分組將3O只動(dòng)物隨機(jī)分為3組，每組10只。正常組每籠5只；模型組術(shù)后每籠一只，術(shù)后1周進(jìn)行慢性溫和刺激；卒中組每籠5只飼養(yǎng)。

2.2 行為學(xué)測(cè)試

2.2.1 蔗糖水試驗(yàn)在慢性應(yīng)激前以及6、13天禁水，次日進(jìn)行蔗糖水試驗(yàn)，即測(cè)定斷水24 h后飲用l%蔗糖溶液的量。蔗糖溶液的飲用量反映了大鼠快感反應(yīng)。

2.2.2 曠野試驗(yàn)所用敞箱為立柱體，長(zhǎng)寬均80 cm、高4Ocm，周壁為黑色，地面劃分為面積相等的25塊，以動(dòng)物穿越地面方塊數(shù)（四爪跨入）作為水平得分，以直立次數(shù)（兩前肢離地1cm 以上）為垂直得分，慢性刺激7天，14天后每只動(dòng)物進(jìn)行1次測(cè)定，每次3 min，室內(nèi)隔音。曠野試驗(yàn)的水平活動(dòng)反映了大鼠的運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性水平；垂直活動(dòng)的多少則反映其興趣高低。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 11.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用x±s表示，三組間差異采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK法。

2.4 結(jié)果

表1 各組大鼠蔗糖水消耗量的變化（ml/d，x±s）

與正常組相比。*P<0.05

表2 各組大鼠敞箱試驗(yàn)比較（次/3min，x±s）

與正常組相比。*P<0.05

3 討論

腦卒中后抑郁動(dòng)物模型目前多采用卒中伴抑郁的復(fù)合模型，根據(jù)模型的制備方法分為線栓（或結(jié)扎）后抑郁模型和開顱腦損傷后抑郁模型，但不管哪種模型，均需要先引起動(dòng)物腦卒中造成腦神經(jīng)損傷，然后對(duì)卒中動(dòng)物進(jìn)行孤養(yǎng)和慢性不可預(yù)見性應(yīng)激等行為學(xué)干預(yù)從而引發(fā)抑郁的發(fā)生。應(yīng)激模型采用反復(fù)給大鼠施加不可逃避的刺激，可造成大鼠出現(xiàn)抑郁狀態(tài)，但動(dòng)物耐受性較差。孤養(yǎng)模型主要通過(guò)將原來(lái)群養(yǎng)的大鼠分開單獨(dú)喂養(yǎng)，可模擬人類抑郁癥快感缺乏的核心癥狀，表現(xiàn)出自發(fā)性活動(dòng)減少，興趣快感缺乏，食欲減退體重減輕，探索行為減少，易絕望等特點(diǎn)，具有高度的有效性，并可持續(xù)幾個(gè)月，較符合臨床抑郁模型的要求，是目前國(guó)外文獻(xiàn)中廣泛使用的模型[3]。臨床上腦卒中患者住院已經(jīng)基本離開親友，近似獨(dú)居狀態(tài)，而腦卒中后患者所經(jīng)受的各種社會(huì)、心理改變等于給其施加了不同程度的慢性應(yīng)激刺激。而海馬也是應(yīng)激易累及損傷的主要靶區(qū)，許多資料表明，過(guò)強(qiáng)、持久的應(yīng)激可使機(jī)體免疫功能低下，也影響和改變中樞神經(jīng)系統(tǒng)中與行為相關(guān)的神經(jīng)元的形態(tài)和功能[4]。因此本實(shí)驗(yàn)采用的改良的腦卒中后抑郁模型可以很好地模擬臨床腦卒中后抑郁。腦卒中后抑郁患者存在學(xué)習(xí)記憶能力的降低。

參考文獻(xiàn)

[1] 張偉駿，陳眉，裘濤.活血祛癬解郁法對(duì)卒中后抑郁癥大鼠海馬基因BDNF表達(dá)的研究叨-中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2007，25（7）：1410.

[2] 司銀楚，朱培純，吳海霞.等去大腦皮層血管癡呆模型的建、及評(píng)價(jià)[J]中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2001.7（2）：184—5

[3] 唐啟盛，裴清華，侯秀娟，等.腦卒中后抑郁狀態(tài)動(dòng)物模型的建立田.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，27（3）：33—34.

[4] 包新民，舒斯云.大鼠腦立體定位圖讖MHE京：人民衛(wèi)生出版社，1991：1—3.