鱘魚嗜水氣單胞菌的分離鑒定及防治的初步研究

邱燕，梅廣海

（海安縣水產(chǎn)技術(shù)推廣站，江蘇 海安 226600）

嗜水氣單胞菌在自然界中分布廣泛，尤其是在水生環(huán)境中，一般可以和其他生物共存，但其致病性卻一直未引起重視。隨著近些年來(lái)，很多由嗜水氣單胞菌引起的疾病頻繁發(fā)生，包括食物中毒、介水傳染病、感染性腹瀉、敗血癥等，其致病性已經(jīng)受到了公眾的廣泛關(guān)注。該文就以分離的嗜水氣單胞菌為例，通過(guò)藥敏試驗(yàn)的研究，初步探究其防治方案。

1 材料與方法

1.1 病料的采集

取病死鱘魚8尾、鱘魚養(yǎng)殖池水樣15份，2014年8月20日在海安縣鱘魚養(yǎng)殖基地采集。

1.2 主要試劑

培養(yǎng)基、BD Crystal陰性板條及藥敏試驗(yàn)板條均購(gòu)自南京菲恩醫(yī)療科技有限公司。

1.3 病魚的剖檢

肉眼觀察鱘魚體表變化，解剖病死鱘魚，分析各內(nèi)臟的病癥。

1.4 病原菌的分離培養(yǎng)

無(wú)菌采取鱘魚表面和內(nèi)臟組織以及養(yǎng)殖水樣，分別接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，28℃恒溫培養(yǎng)24 h，挑取單個(gè)菌落進(jìn)一步純化。

1.5 病原菌的鑒定

根據(jù)革蘭氏染色結(jié)果，使用BD Crystal陰性板條來(lái)鑒定其生化特性，從而確定鑒定菌種。

1.6 藥敏試驗(yàn)

對(duì)分離的三株嗜水氣單胞菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，將分離菌株制成1.5×108細(xì)菌數(shù)/mL的菌懸液，取0.1 mL注入藥敏板條，28℃恒溫培養(yǎng)24 h，觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況。使用藥物為：硫酸新霉素、氟苯尼考、恩諾沙星、甲砜霉素、鹽酸環(huán)丙沙星、紅霉素、鹽酸土霉素和強(qiáng)力霉素。

2 結(jié)果

2.1 病死鱘魚的剖檢結(jié)果

病魚體表癥狀不明顯，鰓絲顏色變淺，肝臟顏色變淺，腸道腫脹充盈，剖開后內(nèi)容物較少。

2.2 病原菌鑒定結(jié)果

共分離四種菌株，其中三株為嗜水氣單胞菌，一株為大腸桿菌。

2.3 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果如表1顯示，氟苯尼考和鹽酸環(huán)丙沙星對(duì)嗜水氣單胞菌顯示出較強(qiáng)的抑菌效果，紅霉素和鹽酸土霉素抑菌效果不明顯。

表1 各種抗菌藥物對(duì)嗜水氣單胞菌的最低抑菌濃度（MIC值） mg/L

3 防治對(duì)策

對(duì)于該批鱘魚發(fā)病情況，建議主要做好病情控制計(jì)劃，結(jié)合實(shí)際情況，采取預(yù)防與治療相結(jié)合的方法。

預(yù)防方法：水質(zhì)處理與調(diào)控。定期換注新水，10～15 d一次；換水前后全池潑灑高穩(wěn)維C，每立方米水體用藥0.5～1.0 g；換水3～5 d后，施用EM菌原露，降解池水有機(jī)物濃度。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，減少環(huán)境應(yīng)激。養(yǎng)殖期間，保持養(yǎng)殖環(huán)境安靜，避免噪音、強(qiáng)光污染；在投喂飼料中適當(dāng)補(bǔ)充維生素及礦物元素，保證投喂飼料的全價(jià)營(yíng)養(yǎng)；定期消毒，及時(shí)發(fā)現(xiàn)、處置游動(dòng)異常個(gè)體，盡早診斷與治療。

治療方法：“早診斷，早治療”是有效控制鱘魚嗜水氣單孢菌病的基本原則。養(yǎng)殖場(chǎng)一旦發(fā)現(xiàn)某池鱘魚攝食強(qiáng)度減弱，立即著手檢測(cè)與治療，明顯降低了發(fā)病率與病死率。早期應(yīng)用抗生素治療鱘魚嗜水氣單孢菌病有一定的效果，實(shí)驗(yàn)室藥敏試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)鱘魚嗜水氣單孢菌的敏感抗菌藥有氟苯尼考與鹽酸環(huán)丙沙星，但生產(chǎn)實(shí)際用藥經(jīng)常與實(shí)驗(yàn)室結(jié)果出現(xiàn)差異，這可能與鱘魚嗜水氣單孢菌耐藥性、病程時(shí)期等多種因素有關(guān)。為了提高藥效，生產(chǎn)實(shí)際中可以采用：一是輪換用藥，在一定時(shí)間內(nèi)不使用同一種抗菌藥，需要注意的是變換的抗菌藥在化學(xué)上不能屬于同一類型的藥物，以免產(chǎn)生交叉抗藥性。二是穿梭用藥，是在同一個(gè)飼養(yǎng)期內(nèi)，換用二種或三種不同性質(zhì)的抗菌藥，即開始時(shí)使用一種藥物，生長(zhǎng)期時(shí)使用另一種藥物，穿梭用藥的抗菌藥在化學(xué)上也不能屬于同一類型的藥物。三是聯(lián)合用藥，將可以能配合使用的化學(xué)藥物與中藥按最佳比例配合，既可提高療效，又可降低單一藥物的使用濃度，在一定程度上延緩了抗菌藥耐藥性產(chǎn)生的速度，保持了其對(duì)抗菌藥的敏感性，減少了藥物依賴與藥物中毒的可能性。因此，生產(chǎn)中選擇藥物時(shí)不能僅靠經(jīng)驗(yàn)，而要根據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇敏感藥物，或使用經(jīng)過(guò)科學(xué)研究的復(fù)合制劑進(jìn)行治療，才能達(dá)到有效治療、減少耐藥菌出現(xiàn)的目的。