內(nèi)蒙古地區(qū)豬圓環(huán)病毒Ⅱ型感染的血清學調(diào)查

薛江東　馬德慧　劉鍇　楊明霞　姚春雨

摘 要：本實驗應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）方法對內(nèi)蒙古地區(qū)部分未經(jīng)PCV-2免疫的豬場豬只780份血樣進行抗體陽性檢測，結(jié)果顯示，不同豬場均有PCV-2感染，PCV-2抗體平均陽性率為38.6%（301/780），經(jīng)產(chǎn)母豬陽性率為38.3%（51/133），后備母豬陽性率為38.7%（46/119）， 種公豬陽性感染率為23.5%（8/34），哺乳仔豬陽性率為42.8%（80/187）， 斷奶仔豬陽性率為40.9%（70/171），育肥豬陽性率為33.8%（46/136）。結(jié)果表明，內(nèi)蒙古地區(qū)養(yǎng)豬場普遍存在豬圓環(huán)病毒II型（PCV-2）感染。

關(guān)鍵詞：豬圓環(huán)病毒2型；內(nèi)蒙古；ELISA；抗體檢測

Abstract： 780 serum samples from Inner mongolia were collected and detected for antibodies against PCV2 by ELISA.The results showed that the positive samples were detected in all pig farms. The average positive rate of the antibodies against PCV-2 was 38.6%（301/780）， the positive rates of sow， replacement gilt， boar， suckling pig， weaning pig and finishing pig were 38.3%（51/133）， 38.7%（46/119）， 23.5%（8/34）， 42.8%（80/187）， 40.9%（70/171）， 33.8%（46/136）， respectively. The results indicated that PCV-2 prevalence was relatively severe in pig herds in Inner Mongolia.

Key words： procine circovirus Type II； Inner Mongolia； ELISA； antibody testing

豬圓環(huán)病毒（Porcine circovirus， PCV）屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，是一種二十面體對稱、無囊膜、環(huán)狀單股DNA病毒[1]。 PCV可分為PCV-1和PCV-2兩個基因型。PCV-1是從PK-15細胞系上得到的分離株，無致病性[2]；PCV-2具有致病性，能引起斷奶仔豬發(fā)生多系統(tǒng)衰竭綜合征（Post-weaning multisystemic wasting syndrome， PMWS）[3]。我國學者先后通過血清學調(diào)查及PCR方法證實PCV-2在國內(nèi)豬場的存在[4，5]。

PCV-2多為隱性感染，主要侵害機體的免疫系統(tǒng)，導致感染豬免疫抑制，降低對其他病原體的抵抗力，從而繼發(fā)其他病毒和細菌性疾病，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。目前國內(nèi)部分省市和地區(qū)均對PCV-2進行了血清學調(diào)查，并顯示PCV-2呈普遍感染。本試驗利用ELISA方法，對內(nèi)蒙古地區(qū)的豬血清進行了PCV-2抗體檢測，以調(diào)查內(nèi)蒙古地區(qū)PCV-2的流行情況。

1 材料與方法

1.1 待檢血清來源

血樣分別采自內(nèi)蒙古呼和浩特市、錫林郭勒盟等10個地區(qū)共20個豬場，通過前腔靜脈或耳靜脈采集未免疫PCV-2疫苗的種豬和各齡段豬靜脈血共780份，分離血清后置于冰箱-20℃保存待用。

1.2 主要試劑和儀器

豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體酶聯(lián)免疫檢測試劑盒（PCV-Ⅱ Antibody ELISA kit）購自北京世紀元亨動物防疫技術(shù)有限公司，生產(chǎn)批號： PCV20100629E。離心機，37℃恒溫箱，自動洗板機（well wash 4MK2，芬蘭），酶標儀（Anthos2010，奧地利），微量移液器（Gilson，法國）稀釋用96孔細胞培養(yǎng)板。

1.3 PCV-2抗體ELISA檢測

具體操作程序和結(jié)果判定均按試劑盒說明書進行。

1.4 統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)運用SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 不同豬群感染PCV-2的情況

通過對內(nèi)蒙古地區(qū)20個豬場共780份血清進行PCV-2抗體ELISA檢測，共檢出陽性血清301份，總陽性率為38.6%，其中，哺乳仔豬血樣共187份，陽性血清80份，檢出的陽性率最高，為42.8%，種公豬34份血樣中只有8個血樣為陽性，檢出率最低，為23.5%，具體結(jié)果見表1。

2.2 不同豬場豬血清PCV-2抗體檢出率

本次檢測血清來自內(nèi)蒙古地區(qū)共20個豬場，每個豬場均有PCV-2感染，檢出率為100%，其中，興安盟71個樣本中檢出45份陽生血清，陽性率達到63.4%，相對其他地區(qū)最高，巴彥淖爾市78個血樣中有27份為陽性，陽性率為30.7%，相對其他地區(qū)為最低，其他地區(qū)見表2。

3 討論

對PCV-2感染血清學調(diào)查的前提是未免疫PCV-2疫苗。目前，我國對PCV-2的預(yù)防多依賴進口疫苗，造價極高，國產(chǎn)PCV-2疫苗尚處于研制期，部分“國產(chǎn)”疫苗也無切實有效的免疫效果，一般豬場選擇不注射疫苗以控制成本的增加，因此，通過對血清中PCV-2抗體的檢測即可了解PCV-2在豬群中感染的情況，以便切斷傳染源凈化豬群。

PCV-2在我國普遍存在，多數(shù)省、市和自治區(qū)均有人做了血清學調(diào)查和病毒核酸的檢測，有的地區(qū)相當嚴重，李超等對安徽各地PCV-2抗體進行檢測，其中皖南地區(qū)的PCV-2感染率高達91.5%[6]；曹正等用PCR方法調(diào)查江蘇省部分地區(qū)PCV-2感染情況，結(jié)果顯示淮安地區(qū)部分豬場PCV-2感染率達到91.67%[7]，如此高的感染率將對養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失。

本試驗調(diào)查了內(nèi)蒙古地區(qū)20個豬場PCV-2感染情況，PCV-2抗體陽性率平均為38.6%，這與其他地區(qū)調(diào)查結(jié)果相比偏低。本試驗中，種公豬的感染率最低，與其他豬群有顯著差異；哺乳仔豬和斷奶仔豬的感染率較高，但除了種公豬外，與其他豬群在統(tǒng)計學上并無差異。從地域來看，本試驗結(jié)果顯示興安盟感染率最高，與其他地區(qū)有顯著差異；其他地區(qū)無統(tǒng)計學上無差別，但明顯提示內(nèi)蒙東部地區(qū)PCV-2感染率較西部地區(qū)嚴重。馬德慧等2006年對內(nèi)蒙古部分地區(qū)PCV-2感染的血清學調(diào)查結(jié)果顯示，該地區(qū)母豬和種公豬的陽性感染率偏高，而哺乳仔豬的血清抗體均為陰性；地域上顯示呼和浩特市、錫林郭勒盟豬血清抗體陽性率高，本試驗與之相比，結(jié)果有明顯差別，我們推測造成這樣的原因可能是采集的樣本量仍然有限，不能代表具體情況；此外，2006年到2010年的這幾年中，內(nèi)蒙古地區(qū)的PCV-2在各豬群中的感染可能產(chǎn)生了變化，變化的原因有待于進一步研究分析[8]。

PCV-2多為隱性感染，造成機體的免疫抑制可能導致其他傳染病疫苗免疫失敗而繼發(fā)其他傳染病，臨床上PCV-2多與其他病原聯(lián)合感染，最常見的是與豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus， PRRSV）。在PCV-2與豬細小病毒（Porcine parvovirus， PPV）或PCV-2與PRRSV聯(lián)合感染豬體時，不僅提高了PCV-2的增殖，也促進了PCV-2相關(guān)病變的產(chǎn)生[9]；Hans等用PCV-2和PRRSV人工感染豬實驗，發(fā)現(xiàn)PCV-2可加重PRRSV引起的支氣管肺炎病理變化[10]，彭長凌等通過實驗證實，PCV-2和PRRSV聯(lián)合感染引起的病變比PRRSV單獨感染要嚴重[11]。

對疫病進行流行病學調(diào)查目前一般采用分子生物學方法，即對病原核酸進行PCR檢測，血清學調(diào)查由于受到注射疫苗后的干擾而具有局限性，在沒有注射疫苗的情況下，這兩種方法各有優(yōu)缺點，李超等對安徽PCV-2流行情況調(diào)查同時將這兩種方法進行了同步對比，檢測結(jié)果的符合率為99. 37%，PCR法比ELISA法多檢出一個樣本，顯示PCR方法似乎更靈敏些[6]。本試驗僅采用血清學方法進行檢測，用PCR法有可能會檢出更高陽性率。

本次調(diào)查涵蓋了內(nèi)蒙古地區(qū)生豬養(yǎng)殖相對發(fā)達的所有盟市，調(diào)查結(jié)果具有較高參考價值，為建立PCV-2陰性豬場提供參考資料。（編輯：狄慧）

參考文獻：

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