尼莫地平緩釋制劑對(duì)家兔血管刺激性試驗(yàn)

阮莉莎　谷勇

摘要[目的]采用家兔耳緣靜脈注射法考察尼莫地平緩釋制劑對(duì)家兔血管刺激性試驗(yàn)。[方法]將家兔分為陰性對(duì)照組（生理鹽水組）、尼莫地平注射液組和尼莫地平緩釋制劑組，分別通過耳緣靜脈注射，給藥劑量為0.5 mg/kg。[結(jié)果]生理鹽水組和尼莫地平緩釋制劑組沒有出現(xiàn)明顯的血管刺激現(xiàn)象，而尼莫地平注射液組出現(xiàn)強(qiáng)烈的血管刺激現(xiàn)象。[結(jié)論]尼莫地平緩釋制劑與原制劑尼莫地平注射液相比，有效降低了家兔血管刺激性，為其臨床上廣泛應(yīng)用提供了一定基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞尼莫地平緩釋制劑；血管刺激性；家兔

中圖分類號(hào)S829.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2014）23-07781-01

作者簡介阮莉莎（1981-），女，四川自貢人，講師，從事生理學(xué)方面的教學(xué)科研工作。

收稿日期20140709 目前，市售尼莫地平注射液由于含有40% 有機(jī)溶劑： 23.7% （v/v） 乙醇和17% （v/v） PEG400，在臨床使用過程中容易引起注射疼痛和在注射部位發(fā)生局部炎癥，進(jìn)而導(dǎo)致患者順應(yīng)性低，甚至導(dǎo)致靜脈炎[1]。

筆者在血管刺激性研究中主要參照文獻(xiàn)以及《化學(xué)藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》等評(píng)價(jià)了血管刺激性的癥狀，同時(shí)觀察了動(dòng)物注射部位耳緣靜脈的病理切片，綜合評(píng)價(jià)并比較了尼莫地平緩釋制劑與市售尼莫地平注射液的血管刺激性。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)儀器戴安高效液相色譜儀P680A四元低壓梯度泵、PDA-100二極管陣列檢測器、TCC-100柱溫箱、Chromeleon色譜工作站；瑞士Precisa電子天平（XR 205SM-DR）；Rota vapor R-114旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（Büchi， Switzerland）；Water bath B-480 （Büchi， Switzerland）；pH計(jì) （HSP0113R， Heroways）；RM2235型石蠟切片機(jī)（Leica， German）；Axiovert200型顯微鏡（Zeiss， German）。微量輸液泵 （成都豪乙生物科技有限公司）；一次性使用靜脈輸液針（成都市新津事豐醫(yī)療器械有限公司，國食藥監(jiān)械準(zhǔn)字2010第3150406號(hào)）。

1.2主要試劑與藥物 尼莫地平對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所，100270-200002）；尼莫地平注射液（山西亞寶藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H20034057）；氯化鈉注射液（太極西南藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H50021611，產(chǎn)品批號(hào)1191022）； 甲醇和乙腈均為色譜純，其余試劑均為分析純；水為超純水。

1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12只新西蘭大耳家兔，體重（2.0±0.5）kg，雄性由宜賓衛(wèi)生學(xué)校動(dòng)物中心提供。

1.4試驗(yàn)方法

1.4.1尼莫地平緩釋制劑的制備。參照文獻(xiàn)和預(yù)試驗(yàn)，采用共沉淀法制備尼莫地平混合膠束，具體制備方法為：稱取處方量的尼莫地平原料藥、蛋黃卵磷脂（EPC）、甘氨膽酸（SGC），置于圓底燒瓶（25 ml）中，加入一定體積的無水乙醇充分溶解，超聲分散均勻。60 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，形成1層透明薄膜。再用含一定濃度的NaOH的生理鹽水溶解，調(diào)節(jié)pH。12 000 r/min離心5 min，除去不溶解的藥物，上清液即為尼莫地平緩釋制劑的分散體溶液[2]。

1.4.2血管刺激性試驗(yàn)。設(shè)定生理鹽水為陰性對(duì)照，選用耳緣靜脈作為用藥部位。12只家兔（體重2.5～3.0 kg）隨機(jī)分為2組：Ⅰ組注射氯化鈉注射液；Ⅱ組注射尼莫地平注射液；Ⅲ組注射尼莫地平緩釋制劑。每只家兔按0.5 mg/kg給藥，按臨床上給藥方式，連續(xù)靜脈滴注7 d。尼莫地平注射劑和生理鹽水的體積一致。

每天給藥前以及最后1次給藥后48 h對(duì)家兔進(jìn)行肉眼觀察[2]。48 h后處死動(dòng)物，并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2周后繼續(xù)觀察剩余動(dòng)物，并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

處死動(dòng)物后，剪取距注射部位1 cm處兔耳。用生理鹽水清洗血跡，固定于福爾馬林溶液中約48 h。用石蠟包埋，HE染色后光鏡下觀察注射后對(duì)兔耳血管的刺激性反應(yīng)。家兔血管過敏性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為：0級(jí)，給藥部位無明顯反應(yīng)；1級(jí)，給藥部位靜脈血管輕度瘀血、紅腫；2級(jí)，給藥部位靜脈血管中度瘀血、紅腫；3級(jí)，給藥部位靜脈血管重度瘀血，周圍組織嚴(yán)重紅腫。

2結(jié)果與分析

2.1肉眼觀察結(jié)果在尼莫地平輸注過程中動(dòng)物出現(xiàn)深度呼吸，且極度掙扎；氯化鈉注射和尼莫地平緩釋制劑過程中呼吸平緩，均未出現(xiàn)此現(xiàn)象。