兩種藏錦雞兒中總黃酮的含量測定

張幸福

(青海省食品藥品檢驗所，西寧 810016)

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兩種藏錦雞兒中總黃酮的含量測定

張幸福

(青海省食品藥品檢驗所，西寧 810016)

目的：建立二種藏錦雞兒(鬼箭錦雞兒和昌都錦雞兒)的定量測定方法。方法：采用紫外-分光光度法對其總黃酮進行含量測定。結(jié)果：線性回歸方程為Y=0.014X-0.010 9，相關(guān)系數(shù)r=1.000 0。結(jié)論：所建立的方法可為藏錦雞兒中總黃酮的含量測定提供參考。

鬼箭錦雞兒；昌都錦雞兒；蘆??；總黃酮；紫外分光光度法

藏錦雞兒為豆科植物鬼箭錦雞兒Caraganajubata(pall.)Poir.及昌都錦雞兒(Caraganachangduensisfiauf)的木部心材，具破血、化瘀、降壓功效[1-2]。黃酮類化合物是藏錦雞兒中的藥效學成分[3-5]。本研究在文獻 [6-8]基礎(chǔ)上減少樣品的取樣量，縮短處理時間，以蘆丁為對照品，采用紫外分光光度法測定了總黃酮的含量。研究結(jié)果可為藏錦雞兒的質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與試藥

島津紫外分光光度計(UV-2450)，OHAUS AR5120電子天平(奧豪斯公司)，HANGPING FA1004電子天平(上海天平儀器廠)，KQ5200B超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

液相用甲醇、乙腈均為色譜純，水為蒸餾水的超純水；其余試劑為分析純(市售)。蘆丁對照品(批號100080-200707，供含量測定，使用前不需干燥處理，供UV法測定，純度為92.5%，購于中國藥品生物制品檢定研究院)。收集藏錦雞兒藥材共10批，經(jīng)青海省食品藥品檢驗所駱桂法主任鑒定為鬼箭錦雞兒及昌都錦雞兒的木部心材。見表1。

表1 藏錦雞兒樣品來源

2 方法與結(jié)果

2.1 對照品溶液的制備

取蘆丁對照品適量，精密稱定，加75%乙醇使溶解，制成含蘆丁0.238 9 mg·mL-1的溶液 (必要時超聲處理或置水浴上微熱使溶解)。

2.2 供試品溶液的制備

取本品粗粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%乙醇50mL，密塞，稱定重量，放置30分鐘，置水浴上加熱回流1h，放冷，用75%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，即得，備用。

2.3 標準曲線的制備

精密量取蘆丁對照品溶液1mL、2mL、4mL、6mL、8mL與10mL，分別置50mL 量瓶中，各加75%乙醇至10mL，搖勻，加5%亞硝酸鈉溶液1.0mL，搖勻，放置6min，加10%硝酸鋁溶液1.5mL，搖勻，放置6min，再加10%氫氧化鈉溶液10mL，加75%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，放置15min，以相應的試劑為空白，采用紫外-可見分光光度法，在510nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。其線性方程為:Y=0.014X- 0.010 9，相關(guān)系數(shù)r=1.000 0。

2.4 精密度試驗

取蘆丁對照品溶液，按“2.3”項條件處理，連續(xù)6次測定其吸光度A值， 結(jié)果吸光度的RSD為0.1%，表明儀器精密度良好。

2.5 重復性試驗

分別精密稱取樣品(7號)0.5 g，共6份，按“2. 3”項下方法操作制備供試品備用溶液，然后精密量取1.0～2.0mL，置50mL量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“各加75%乙醇至10mL”起，依法測定吸光度，計算含量，結(jié)果總黃酮的平均含量為7.83%，RSD為1.8%，表明本方法重復性好。

2.6 穩(wěn)定性試驗

取供試品溶液(7號)，分別在0、5、10、20、30、40、50min依法測定吸光度， 結(jié)果表明樣品溶液在50min內(nèi)穩(wěn)定，吸光度的RSD為1.5%。

2.7 回收率試驗

取蘆丁對照品約20～25mg，扣除純度，共6份，精密稱定，置具塞錐形瓶中，每瓶中再精密稱取已知含量的錦雞兒樣品(7號樣品，含量為7.823 7%)0.25g， 依次精密加入75%乙醇50mL，密塞，稱定重量，放置30min，置水浴上加熱回流1h，放冷，用75%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2.0mL，置50mL量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“各加75%乙醇至10mL”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的量，計算回收率，平均回收率為100.4%，RSD=2.6%。

2.8 樣品測定

取藏錦雞兒樣品，按“2.2”項下方法制備供試品備用溶液，精密量取1.0～2.0mL，置50mL量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“各加75%乙醇至10mL”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的量，計算，結(jié)果見表2。

表2 樣品中總黃酮含量 (%)

3 討論

取蘆丁對照品溶液依法顯色并測定溶液的紫外光譜，結(jié)果該溶液在510nm處有最大吸光度值，故選擇510nm作為紫外-分光光度法的檢測波長。經(jīng)考察，10%氫氧化鈉溶液的用量為10mL，10%硝酸鋁溶液用量為1.5mL時，測得的吸光度值最佳。分別在室溫、20℃、35℃時測定溶液的吸光度值，結(jié)果表明溫度對測定無影響， 所以選擇室溫下進行測定。

該研究所建立的方法取樣方便，處理簡單，可為藏錦雞兒的質(zhì)量控制提供參考。

[1] 衛(wèi)生部藥典委員會.衛(wèi)生部藥品標準[S] .藏藥第一冊.1995:136.

[2] 青海省衛(wèi)生廳.青海省藏藥標準[S].1992:42.

[3] 宋萍,李小娟,賈巖巖.鬼箭錦雞兒化學成分的研究[J].中成藥,2011(11):1934-1936.

[4] 宋萍,楊新洲,于軍.鬼箭錦雞兒中紫檀烷類化合物抗真菌活性研究(英文)[J].中國現(xiàn)代應用藥學,2009(9):691-694.

[5] 宋萍,馬歡,田婭.藏藥鬼箭錦雞兒化學成分及藥理作用的研究進展[J].中國藥物與臨床,2009(12):1149-1151.

[6] 鄭敏燕,魏永生. 藏錦雞兒原藥材中總黃酮含量的初步測定[J].青海大學學報：自然科學版,2001(5):10-11，14.

[7] 宋萍,李存仁,于軍.分光光度法測定藏藥鬼箭錦雞兒中總黃酮的含量[J].時珍國醫(yī)國藥,2008(9):2076-2077.

[8] 魏永生.正交試驗法研究藏藥鬼箭錦雞兒總黃酮含量[J]. 咸陽師范學院學報,2005(2):27-29.

(責任編輯：宋勇剛)

2014-01-06

國家藥品標準提高項目(民族藥N0.427)

張幸福，男，青海省食品藥品檢驗所副主任藥師，研究方向為中藏藥質(zhì)量控制。

R285.2

A

1673-2197(2014)09-0010-01