維藥神香草不同提取物鎮(zhèn)咳、祛痰作用比較研究

阿孜古麗·吐魯洪，努爾江·肉孜，于 洋，麥合蘇木·艾克木

(新疆醫(yī)科大學(xué) 維吾爾醫(yī)學(xué)院，烏魯木齊 830011)

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維藥神香草不同提取物鎮(zhèn)咳、祛痰作用比較研究

阿孜古麗·吐魯洪，努爾江·肉孜，于 洋，麥合蘇木·艾克木*

(新疆醫(yī)科大學(xué) 維吾爾醫(yī)學(xué)院，烏魯木齊 830011)

目的： 比較維藥神香草水、醇提物及乙酸乙酯萃取物的鎮(zhèn)咳、祛痰作用。方法：分別采用小鼠氨水引咳法、氣管酚紅排泄法考察其鎮(zhèn)咳、祛疾作用。結(jié)果：陽性對照組和神香草不同提取物給藥組對濃氨水致小鼠咳嗽反應(yīng)有明顯抑制作用，能延長小鼠咳嗽反應(yīng)的潛伏(P<0.05)，能明顯提高小鼠呼吸道酚紅排泌量(P<0.05)。其中神香草乙酸乙酯萃取物的作用更顯著，并呈劑量依賴趨勢(P<0.05)。結(jié)論：神香草乙酸乙酯萃取物鎮(zhèn)咳、祛痰作用比其水、醇提取物更顯著，推測神香草乙酸乙酯萃取物可能是其主要活性部位。

神香草；提取物；鎮(zhèn)咳、祛痰作用

維吾爾醫(yī)藥(簡稱維藥)神香草(HyssopusofficinalisL .)為唇形科(Labiatae)多年生草本植物， 在新疆維吾爾自治區(qū)北部有野生分布?！毒S吾爾藥志》中記載:“以其地上部分入藥，全草主要含黃酮、揮發(fā)油、生物堿等化學(xué)成分，常用于鎮(zhèn)咳平喘、清熱利濕。”維吾爾醫(yī)用其治療氣管炎的咳嗽、氣喘、感冒發(fā)燒和風(fēng)濕等病證[1-2]。近年在新疆維吾爾自治區(qū)人工種植神香草獲得成功[3]，為開發(fā)和利用神香草的食用價值和藥用價值提供了充足的物質(zhì)資源。因此，本實驗對維藥神香草水、醇提取物以及乙酸乙酯萃取物的鎮(zhèn)咳、祛痰作用進(jìn)行對比研究，旨在探討維藥神香草不同提取物的祛痰、鎮(zhèn)咳作用，為其臨床應(yīng)用及進(jìn)一步研究其物質(zhì)基礎(chǔ)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1 藥品與試劑

神香草全草由新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)院藥房提供，經(jīng)新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)院制劑中心質(zhì)檢部鑒定為唇形科植物硬尖神香草(HyssopusofficinalisL.)的干燥地上部分(批號：20110416)；氨茶堿(0.1g/片，四川錫成藥業(yè)有限公司，批號：11070223);急支糖漿(太極集團(tuán)重慶涪陵制藥廠有限公司，批號：20111201 )；二甲苯(天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號:100909)；酚紅(天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號:110908);濃氨水(天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號:110905)；三氯化鋁(天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號:110406)；無水乙醇、氯化鈉、無水硫酸鈉(分析純)。

1.2 實驗動物

昆明種小鼠18～22g，均為雌雄兼用，由新疆醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供[生產(chǎn)許可證：SCXK(新)2011-0004]。

1.3 儀器

EYELAN-1000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(日本EYELA公司)，DK-S24數(shù)顯電熱恒溫水浴鍋(江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠)，RE-52 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海生化儀器廠)，BL1500電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，UV-240 型分光光度計(日本島津公司)，SK8210HP型超聲波清洗器(上?？茖?dǎo)公司)；

2 方法

2.1 樣品制備

2.1.1 神香草水、醇提物 取神香草藥材適量，分別用蒸餾水、95%乙醇回流提取，減壓濃縮，干燥，得神香草水提物、神香草醇提物。

2.1.2 神香草乙酸乙酯萃取物 取神香草藥材適量，加12倍量70%乙醇加熱回流提取3 次,1h/次，過濾，合并濾液，濃縮蒸干，干膏加適量水，按1∶3比例分別用石油醚、乙酸乙酯進(jìn)行萃取3次，將乙酸乙酯部位濃縮，干燥即可。以上樣品用生理鹽水溶液溶解或混懸，備用。

2.2 神香草不同提取物對濃氨水致小鼠咳嗽反應(yīng)影響(鎮(zhèn)咳作用)

參照文獻(xiàn)[4-6]，取昆明種小鼠50只，體重(20±2)g，雌雄各半，隨機(jī)分成11組：空白對照組(0.9%生理鹽水)，陽性對照組(急支糖漿，5.0 g/kg)、高中低神香草水提物組、高中低醇提物組(6.4、3.2、1.6 g/kg)及神香草乙酸乙酯萃取物高、中、低劑量組(6.0、 3.0、1.5g/kg)；灌胃給藥1次/天，連續(xù)7天，灌胃體積均為 0.2mL/10g，末次給藥后1h，將小鼠逐一放入4L密閉干燥容器內(nèi)，恒壓噴入25%濃氨水氣霧，噴霧5 s引咳，觀察其咳嗽潛伏期及2 min內(nèi)咳嗽次數(shù)。

2.3 神香草不同提取物對小鼠氣管段酚紅排泌量影響(祛痰作用)

參照文獻(xiàn)[7-9]，取昆明種小鼠50只，體重(20±2)g，雌雄各半，隨機(jī)分成11組：空白對照組(0.9%生理鹽水)，陽性對照組(急支糖漿，5.0 g/kg)、高中低神香草水提物組、高中低醇提物組(6.4、3.2、1.6 g/kg)及神香草乙酸乙酯萃取物高、中、低劑量組(6.0、 3.0、1.5g/kg)；灌胃給藥1次/天，連續(xù)7天，灌胃體積均為 0.2mL/10g，最后一次給藥后30min，每只小鼠腹腔注射5%酚紅生理鹽水溶液0.2mL/20g體重，30min后處死小鼠，仰位固定，頸部拉直，解剖分離出氣管，將各氣管段放入預(yù)先盛有1.5mL 5% NaHCO3溶液的試管中，超聲波清洗，使氣管段中的酚紅完全釋放，清洗液離心，取上清液于分光光度計546nm處比色，測定OD值，與酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，折算成酚紅含量，根據(jù)酚紅含量和動物體重計算出校正酚紅含量。

2.4 統(tǒng)計學(xué)處理

3 結(jié)果

3.1 神香草不同提取物對濃氨水致小鼠咳嗽反應(yīng)的影響(鎮(zhèn)咳作用)

陽性對照組和神香草不同提取物組對濃氨水致小鼠咳嗽反應(yīng)有明顯抑制作用，能延長小鼠咳嗽反應(yīng)的潛伏期(P<0.05)，并減少咳嗽次數(shù)(P<0.05)，其中神香草乙酸乙酯萃取物的作用更顯著，并呈劑量依賴趨勢(P<0.05)，結(jié)果見表1和圖1。

表1 神香草不同提取物對濃氨水致小鼠咳嗽反應(yīng)影響 ±s)

注：與空白對照組比較，*P<0.05；與各劑量組之間比較，△P<0.05。

3.3 神香草不同提取物對小鼠氣管段酚紅排泌量影響(祛痰作用)

陽性對照組和神香草不同提取物給藥組能明顯提高小鼠呼吸道酚紅排泌量(P<0.05)，其中神香草乙酸乙酯萃取物作用更顯著，并呈劑量依賴趨勢(P<0.05)，結(jié)果見表2和圖2。

圖1 神香草不同提取物止咳作用比較

±s)

注：與空白對照組比較，*P<0.05；與各劑量組之間比較，△P<0.05。

圖2 神香草不同提取物祛痰作用比較

4 討論

神香草維吾爾名祖帕奇尼，是維吾爾醫(yī)常用藥材，收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·維吾爾藥分冊》中:藥用全草，含揮發(fā)油、黃酮、生物堿、多糖等化學(xué)成分，在維醫(yī)常用于治療氣管炎的咳嗽、氣喘、感冒發(fā)燒和風(fēng)濕等病證。目前神香草的人工種植已獲得成功，物質(zhì)資源豐富。因此，本研究采用溶劑提取和萃取法制備神香草水、醇提物及乙酸乙酯萃取物，通過小鼠鎮(zhèn)咳、祛痰以及平喘實驗，探討其抗炎、止咳、祛痰及平喘作用，旨在為神香草臨床應(yīng)用及治療物質(zhì)基礎(chǔ)提供科學(xué)依據(jù)。實驗結(jié)果表明，神香草不同提取物均抑制濃氨水噴霧引起的小鼠咳嗽反應(yīng)及延長咳嗽潛伏期(P<0.05)，提示神香草提取物作用于有關(guān)化學(xué)感受器, 抑制支氣管黏膜對刺激的反應(yīng)性而表現(xiàn)出鎮(zhèn)咳作用。另外，神香草不同提取物能顯著促進(jìn)小鼠氣管段酚紅排泄量(P<0.05)，其中神香草乙酸乙酯萃取物鎮(zhèn)咳、祛痰作用更明顯，并呈劑量依賴性趨勢，提示神香草乙酸乙酯萃取物可能是主要活性部位,有效成分含量可能較多。

哮喘、慢性支氣管炎等臨床呼吸系統(tǒng)常見病及多發(fā)病，主要表現(xiàn)為咳、痰、喘癥狀，對其治療應(yīng)達(dá)到鎮(zhèn)咳、祛痰、解痙、平喘的目的。神香草水、醇提取物及乙酸乙酯萃取物的鎮(zhèn)咳、祛痰作用，為維藥神香草的臨床應(yīng)用及治療物質(zhì)基礎(chǔ)提供了理論依據(jù)，至于其有效成分以及藥理作用的確定有待今后進(jìn)一步研究。

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[2] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·維吾爾藥分冊[M].烏魯木齊：新疆科技衛(wèi)生出版社,1999：78.

[3] 陳玲.和碩地區(qū)神香草的特性與栽培技術(shù)[J].新疆農(nóng)業(yè)科技,2008(2):33-34.

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(責(zé)任編輯：宋勇剛)

Constrast Research on Antitussive and Expectorant Effects of Different Extracts fromHyssopusofficinalisL.

Arzigul·Turgun, Nurjan ·Rozi,Yu Yang, Ekim· Mahsum*

(Inistitute of Traditional Uighur Medicine, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011,China)

Objective:To compare the antitussive and expectorant effects of water, ethanol and Ethly Aectate extracts fromHyssopusofficinalisL.Methods:The antitussive effect was studied by the cough model induced by ammonia inmice; the expectorant effect was studied by a mouse model of phenoled test.Results:The experimental results showed that the positive control and different extracts from Hyssopus officinalis L. groups can reduced the number of ammonia spray-induced cough in mice (P<0.05)，promoted the phenol red excretion of mousetracheal (P<0.05), in wich the Ethly Aectates groups effects were more significant (P<0.05) and it is showed Dose-dependent trend1.Conclusion:The Ethly Aectates from Uighur MedicineHyssopusofficinalisL. have obvious theantitussive, expectorant effects.

HyssopusofficinalisL.;Extracts ;Antitussive；Expectorant

2014-05-10

新疆醫(yī)科大學(xué)創(chuàng)新基金項目(2007-3)

阿孜古麗·吐魯洪(1983-)，女，新疆醫(yī)科大學(xué)助理實驗師，研究方向為維藥作用機(jī)理及新藥開發(fā)。

麥合蘇木·艾克木(1980-)男，新疆醫(yī)科大學(xué)講師，研究方向為維藥作用機(jī)理及新藥開發(fā)。E-mail:mahsum008@126.com。

R285

A

1673-2197(2014)17-0010-03