龜鹿二仙湯對非小細(xì)胞肺癌患者化療后外周血白細(xì)胞與細(xì)胞免疫功能的影響研究

錢鈞林勝友

（1.南京軍區(qū)杭州療養(yǎng)院，浙江 杭州 310007；2.浙江省中醫(yī)院，浙江 杭州 310006）

龜鹿二仙湯對非小細(xì)胞肺癌患者化療后外周血白細(xì)胞與細(xì)胞免疫功能的影響研究

錢鈞1林勝友2

（1.南京軍區(qū)杭州療養(yǎng)院，浙江 杭州 310007；2.浙江省中醫(yī)院，浙江 杭州 310006）

目的：觀察龜鹿二仙湯對非小細(xì)胞肺癌患者化療后外周血白細(xì)胞和細(xì)胞免疫功能的影響。方法：將非小細(xì)胞肺癌患者60例隨機(jī)分為治療組和對照組，治療組在化療的同時(shí)服用龜鹿二仙湯，療程14d；對照組給予單純化療。觀察2組患者治療前后外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、T細(xì)胞亞群以及中性粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）的使用率。結(jié)果：化療后第2周，治療組外周血白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞明顯高于對照組；治療組、較對照組有明顯升高，明顯降低；治療組中因白細(xì)胞過低而使用G-CSF者少于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：龜鹿二仙湯能有效減少化療對白細(xì)胞（尤其是中性粒細(xì)胞）的損傷，保護(hù)化療后機(jī)體的細(xì)胞免疫功能，保證化療順利完成，因此具有廣泛的臨床應(yīng)用前景。

非小細(xì)胞肺癌 龜鹿二仙湯 中西醫(yī)結(jié)合療法 白細(xì)胞計(jì)數(shù) 細(xì)胞免疫指標(biāo) G-CSF

目前在非小細(xì)胞肺癌的治療中化療是重要手段，但化療在抑制或殺傷癌細(xì)胞的同時(shí)對機(jī)體正常細(xì)胞同樣有毒害作用，導(dǎo)致患者出現(xiàn)近期或遠(yuǎn)期毒副反應(yīng)，其常見的毒副作用為骨髓抑制，表現(xiàn)為血三系尤其是白細(xì)胞的減少，免疫功能低下等，影響患者的生存質(zhì)量，降低生存期。中醫(yī)中藥對于化療所引起的白細(xì)胞減少和免疫功能抑制具有較好的治療作用。我們通過對龜鹿二仙湯的臨床研究，發(fā)現(xiàn)其有明顯的抗毒升白細(xì)胞，提高免疫功能等作用，現(xiàn)將臨床研究報(bào)道如下。

1 臨床資料

所有患者均來源于2007年5月～2012年5月南京軍區(qū)杭州療養(yǎng)院心肺康復(fù)科病房和浙江省中醫(yī)院腫瘤科病房，均符合非小細(xì)胞肺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)，共60例，全部病例均由病理檢查確診，按隨機(jī)數(shù)字表法分為治療組與對照組。治療組30例：男20例，女10例；年齡36～74歲，平均年齡（57.7±11.1）歲；其中Ⅱ期7例，Ⅲ期10例，Ⅳ期13例。對照組30例：男19例，女11例；年齡45～75歲，平均年齡（59.3±9.5）歲；其中Ⅱ期5例，Ⅲ期13例，Ⅳ期12例。2組患者在本研究開始時(shí)距上次化療間隔周期均在2周以上，經(jīng)齊同性檢驗(yàn)，2組病例在性別、年齡、腫瘤分期等方面，無顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。

2 治療方法

2.1 化療方案化療方案主要包括兩大類，即含鉑類的化療方案和含紫杉醇的化療方案。（1）GP方案：順鉑（DDP）30mg/m2，d1-3；健擇（GEM）1000mg/m2，d1，8；每3周為1個(gè)周期。（2）TP方案：順鉑（DDP）30mg/m2，d1-3；紫杉醇（TAXOL）175mg/m2，d1-3；每3周為1個(gè)周期。

2.2 治療組從化療第1日開始服用中藥龜鹿二仙湯。方藥組成：龜版9g，鹿角片9g，生曬參6g，枸杞12g。加水濃煎成100mL，每日2次，以治療14d為1個(gè)療程。

2.3 對照組單純化療。

3 療效觀察

3.1 觀察指標(biāo)觀察2組患者治療前后外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)（第1周、第2周）、細(xì)胞免疫功能、中性粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）的使用率。

3.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法全部數(shù)據(jù)采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料平均值采用（±s），治療前后及組間計(jì)量資料比較應(yīng)用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料比較應(yīng)用χ2檢驗(yàn)。均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.3 治療結(jié)果

3.3.1 2組化療前后外周血白

細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)變化情況2組化療前外周血白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)均無顯著性差異（P＞0.05）?；熀蟮?周，治療組與對照組外周血白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)較化療前均有明顯下降（P＜0.05），而淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)下降不明顯（P＞0.05）；組間比較均無顯著性差異（P＞0.05）?；熀蟮?周，治療組白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)均略低于化療前，但無顯著性差異（P＞0.05），略高于化療后第1周，亦無顯著性差異（P＞0.05）；而對照組外周血白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)仍略低于化療后第1周，且明顯低于化療前（P＜0.05），而淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)變化不明顯（P＞0.05）；治療組外周血白細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)要明顯高于對照組（P＜0.05），但2組淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)無明顯差異（P＞0.05）。見表1、表2、表3。

表1 治療組與對照組化療前后外周血白細(xì)胞變化情況（±s）×109/L

表1 治療組與對照組化療前后外周血白細(xì)胞變化情況（±s）×109/L

注：與本組化療前比較，*P＜0.05；與對照組同時(shí)期比較，△P＜0.05。

組別例數(shù)化療前化療后第1周化療后第2周治療組對照組27 25 5.84±1.68 5.36±1.34 4.43±1.78*4.99±1.40△3.73±1.30*3.58±1.17*

表2 治療組與對照組化療前后外周血中性粒細(xì)胞變化情況（±s）×109/L

表2 治療組與對照組化療前后外周血中性粒細(xì)胞變化情況（±s）×109/L

注：與本組化療前比較，*P＜0.05；與對照組同時(shí)期比較，△P＜0.05。

組別例數(shù)化療前化療后第1周化療后第2周治療組對照組27 25 3.82±1.63 3.54±1.89 2.72±1.56*3.12±2.27*△2.14±1.47*2.04±1.27*

表3 治療組與對照組化療前后外周血淋巴細(xì)胞變化情況（±s）×109/L

表3 治療組與對照組化療前后外周血淋巴細(xì)胞變化情況（±s）×109/L

組別例數(shù)化療前化療后第1周化療后第2周治療組對照組27 25 1.37±0.60 1.49±0.73 1.27±0.58 1.33±0.54 1.15±0.56 1.30±0.57

3.3.2 2組化療前后細(xì)胞免疫指標(biāo)變化情況2組化療前各項(xiàng)免疫指標(biāo)（、、/、NK細(xì)胞）均基本正常，組間比較無顯著性差異（P＞0.05）。化療后第2周，治療組、/較對照組有明顯升高，明顯降低，組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）；而、NK較對照組略有升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表4。

表4 治療組與對照組化療前后免疫指標(biāo)變化情況（±s）%

表4 治療組與對照組化療前后免疫指標(biāo)變化情況（±s）%

注：與對照組同時(shí)期比較，△P＜0.05。

組別治療組對照組例數(shù)時(shí)間CD3+27化療前65.81±7.01化療后65.96±14.55 25化療前65.05±10.33化療后65.83±9.51 NK 39.63±4.32 18.07±5.72 41.53±5.94△19.22±7.91 34.84±11.09 18.50±11.64 32.72±8.21 18.25±6.36 CD4+CD8+CD4+/CD8+22.68±5.02 1.85±0.56 20.46±5.33△2.14±0.54△26.76±10.44 1.65±0.65 26.26±6.88 1.34±0.56

3.3.3 2組G-CSF使用情況比較2組所有病例均完成化療方案，共有8例患者因外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)低于2.0×109/L或中性粒白細(xì)胞低于1×109/L而接受G-CSF（瑞白）皮下注射治療并終止觀察，其中治療組有3例，對照組有5例，治療組中因白細(xì)胞過低而使用G-CSF者少于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

4 討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，化療藥是一種峻毒之藥，使人體正氣受損[1]，脾胃運(yùn)化功能失常，以致氣陰兩傷，氣血虧虛，脾腎虛損，故化療后患者往往存在肺、脾、腎等臟器功能損傷，精氣血虧虛，陰陽皆虛的現(xiàn)象[2-3]。腎藏先天之精髓，脾化后天之精微，互為資生，相輔為用。若腎精虧損，則骨髓不充則精血不能復(fù)生。若脾氣虛弱則水谷不化氣血，腎精化源不足，全身失養(yǎng)，虛損衰竭皆至。

龜鹿二仙湯由龜鹿二仙膠改為湯劑，由鹿角、龜版、枸杞子、人參組成，其方首見于明代《醫(yī)便》一書[4]。方中鹿角補(bǔ)腎陽、生精血，龜版滋陰潛陽、補(bǔ)血，二者均歸肝腎二經(jīng)，為主藥；人參大補(bǔ)元?dú)舛?；枸杞子益精生血。四藥合用，性味平和，入本方既補(bǔ)先天之肝腎，又顧后天之脾胃，而使精、氣、血相依互用（精生氣血，氣生精血，血養(yǎng)精氣），以奏填精補(bǔ)髓、益氣養(yǎng)血、陰陽并補(bǔ)之功。

粒細(xì)胞與單核-巨噬細(xì)胞都起源于粒單系造血祖細(xì)胞（CFU-GM），CFU-GM膜表面有粒單系集落刺激因子（GM-CSF），機(jī)體的粒單系造血調(diào)控主要在此階段進(jìn)行?，F(xiàn)代藥理研究表明，人參總皂苷（TSPG）能促進(jìn)小鼠造血干/祖細(xì)胞的增殖分化，增強(qiáng)造血干/祖細(xì)胞GM-CSFRα的表達(dá)，還能通過促進(jìn)淋巴細(xì)胞間接合成和分泌GM-CSF從而促進(jìn)人粒單系造血[5-6]。人參皂苷Rg1可直接作用于包括造血干細(xì)胞在內(nèi)的骨髓干細(xì)胞，促進(jìn)分泌G-CSF，提高骨髓細(xì)胞向白細(xì)胞的分化[7]。枸杞多糖可能通過促進(jìn)T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生CSF，而間接影響白細(xì)胞水平[8]。龜版膠提取物證實(shí)能促進(jìn)鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）增殖分化，而MSCs的主要功能是參與造血干細(xì)胞生存和分化的微環(huán)境[9]。本研究還可以看出，龜鹿二仙湯在緩解化療病人白細(xì)胞減少（或提升白細(xì)胞）的過程中可能主要還是作用于中性粒細(xì)胞。雖然龜鹿二仙湯起效時(shí)間相對要緩慢，但維持時(shí)間比較長，G-CSF或GM-CSF注射后停用不久就會出現(xiàn)中性粒細(xì)胞回落現(xiàn)象，而龜鹿二仙湯組至少可以維持2周時(shí)間。我們設(shè)想或許它還可以維持更長的時(shí)間甚至不會出現(xiàn)中性粒細(xì)胞的回落，當(dāng)然這有待于進(jìn)一步的深入研究。

惡性腫瘤患者尤其是晚期腫瘤患者，抗腫瘤免疫以細(xì)胞免疫為主[10]。T淋巴細(xì)胞是免疫反應(yīng)中抗原遞呈的核心環(huán)節(jié)[11]，其中代表成熟T細(xì)胞，反映免疫功能，按其表面標(biāo)志和功能不同分為兩個(gè)主要的亞群，即（輔助性/誘導(dǎo)性T細(xì)胞：Th/Ti）和（抑制性/細(xì)胞毒性T細(xì)胞：Ts/Tc），/比值是反映T淋巴細(xì)胞功能狀態(tài)的主要指標(biāo)。當(dāng)機(jī)體接受化療時(shí)，T細(xì)胞亞群中亞群功能減弱，亞群功能增強(qiáng)，引起亞群間比例混亂，免疫調(diào)節(jié)紊亂，宿主免疫功能低下或受抑制。有研究表明，龜鹿二仙湯中的鹿角提取物鹿茸多糖能夠增強(qiáng)并調(diào)節(jié)免疫功能低下模型小鼠細(xì)胞免疫功能，激活免疫機(jī)制殺傷腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)抗腫瘤免疫應(yīng)答[12]。而人參皂苷Rg3也能夠促進(jìn)環(huán)磷酰胺化療患者T淋巴細(xì)胞亞群及/升高，提高其生存質(zhì)量及生存期[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，龜鹿二仙湯雖然不能明顯提高，但能有效升高輔助性T細(xì)胞Th），降低（抑制性T細(xì)胞Ts），從而提高/的比值，使免疫功能對機(jī)體抗腫瘤作用處于更有利的狀態(tài)。

綜上，本臨床研究初步顯示龜鹿二仙湯能夠減輕化療對外周血白細(xì)胞的損傷和提高免疫功能，但目前還存在起效較慢、白細(xì)胞升幅較小、個(gè)體差異較大等缺點(diǎn)，接下來可以從增加樣本量和觀察時(shí)間，調(diào)整用藥的時(shí)間和療程，改變劑量和劑型等幾個(gè)方面著手加以深入研究。

[1]李霞，尹梅，胡春泉，等.腫瘤化療后毒副反應(yīng)的中藥調(diào)理.安徽中醫(yī)臨床雜志，2002，14（2）：98

[2]艾麥花，虞輝，徐永前，等.補(bǔ)腎培元湯治療化療所致白細(xì)胞減少癥．中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2003，9（1）：18

[3]郁有貴，周建軍，朱杰．參麥注射液治療惡性腫瘤化療后毒副反應(yīng)效果觀察．實(shí)用中醫(yī)藥雜志，2011，27（12）：824

[4]洪宋貞，林毅，司徒紅林，等.龜鹿二仙丹加味治療乳腺癌化療后骨髓抑制的臨床研究.新中醫(yī)，2005，37（1）：32

[5]陳笛，王莎莉，王亞平，等.人參總皂甙誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞表達(dá)GM-CSF的實(shí)驗(yàn)研究.免疫學(xué)雜志，2003，19（6）：411

[6]王莎莉，陳笛，王亞平，等.人參總皂甙對人GM-CSF和GM-CSFR表達(dá)的調(diào)控.生理學(xué)報(bào)，2003，55（4）：487

[7]王寧元，呂傳江，陳學(xué)海，等.人參皂甙Rg1誘導(dǎo)骨髓干細(xì)胞游走分化促進(jìn)家兔心肌梗死后心肌血管內(nèi)皮細(xì)胞再生的研究.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2005，25（10）：916

[8]龔海洋，申萍，金莉，等.枸杞多糖對放療及化療引起的小鼠骨髓抑制的影響.中國中醫(yī)藥信息雜志，2005，12（7）：26

[9]周健洪，陳東風(fēng)，黎暉，等.龜版含藥血清對大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞體外增殖的影響.廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，22（1）：35

[10]任秀紅，劉莉，劉平平，等.惡性腫瘤患者T細(xì)胞亞群變化及其與腫瘤分期的關(guān)系.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，28（18）：1906

[12]唐巍然，于曉紅，聞杰，等.鹿茸多糖對免疫功能低下模型小鼠細(xì)胞免疫功能的影響.中國中醫(yī)藥科技，2000，7（4）：234

[13]李洪濱，劉瑋璐，張清媛，等.低劑量環(huán)磷酰胺聯(lián)合人參皂甙Rg3治療晚期非小細(xì)胞肺癌療效分析.實(shí)用腫瘤學(xué)雜志，2006，20（1）：18

編輯：韋杭吳寧

R734.2

A

1672-397X（2014）04-0035-03

錢鈞（1977-），男，醫(yī)學(xué)碩士，主治醫(yī)師，從事中西醫(yī)結(jié)合心肺及腫瘤康復(fù)研究。qianjun77@163.com

2013-09-10