鼠誘發(fā)性肝癌模型的研究進(jìn)展

曹滌非，王 雷，王東凱，吳 瓊，李 瑤，黃國慶，姜 洋，黃婷婷，趙金海，侯婉瀅

（1.黑龍江省科學(xué)院高技術(shù)研究院，哈爾濱150020;2.建華醫(yī)院，黑龍江 齊齊哈爾 161000）

肝癌（HCC）是我國發(fā)病率較高的惡性腫瘤之一，近幾年來，肝癌的發(fā)病率呈上升狀態(tài)，已占我國惡性腫瘤的第2位［1］。肝癌的發(fā)生發(fā)展過程是多因素作用的結(jié)果，目前肝癌的致病機(jī)理尚未研究清楚，沒有安全有效的治療手段，因此深入探討發(fā)病機(jī)理是治療肝癌的重要基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物癌癥模型是人類癌癥研究中建立的能夠模擬人類癌癥表現(xiàn)的模型，可分為自發(fā)瘤型、誘發(fā)型、移植型和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等［2］。因此利用鼠模型研究肝癌的發(fā)病原因和致病機(jī)理，是對肝癌研究的重要手段，本文將對誘發(fā)性鼠肝癌模型的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 給藥途徑

主要有經(jīng)口給藥法和注射給藥法兩種。經(jīng)口給藥法又包括自動(dòng)口服給藥和強(qiáng)制灌胃給藥，自動(dòng)口服給藥是通過飲水或飼料攝取，灌胃給藥是將誘癌劑給鼠灌胃。注射法是將誘癌劑注射給藥，其中腹腔注射最常見，根據(jù)不同的誘癌劑可選擇不同的注射部位與方法。

2 誘癌劑的種類

誘癌劑有很多，本文將對以下幾種常用誘癌劑進(jìn)行論述。

2.1 二乙基亞硝胺（diethylnitrosamine，DEN）

誘發(fā)大鼠肝癌模型:第一，DEN水溶液按10 mg/kg體重用量0.25%的濃度灌胃每周1次，其余時(shí)間按0.025%的濃度飲水，約4個(gè)月可誘導(dǎo)肝癌的發(fā)生，5～6個(gè)月80%以上可發(fā)生癌癥［3］;亦可用濃度為0.05%的 DEN飲水8個(gè)月誘發(fā)肝癌［4］。第二，Solt-Farber誘癌模型的方法［5］:第1 d根據(jù)大鼠體重?fù)Q算按200mg/kg一次性腹腔注射DEN，2周后開始飼喂2－乙酰氨基芴（2－acetylaminofluorene，2-AAF）飼料含有0.02%的DEN 2周，在第3周末做2/3肝切除術(shù)，第4周末恢復(fù)標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，在第4周顯微鏡下觀察可見肝內(nèi)出現(xiàn)變異肝細(xì)胞灶。第三，選用體重200 g的雄性Wistar大鼠，根據(jù)體重?fù)Q算200 mg/kgDEN腹腔注射，然后給予濃度為0.05%的 DEN飲水，12周誘癌成功［6］。第四，選用體重200 g的雄性Wistar大鼠，通過應(yīng)用DEN 自由飲水，16 周誘癌成功［7］。

2.2 黃曲霉素B1（AflatoxinB1，AFB1）

誘癌方法:第一，用含AFB1 4～5 g的飼料連續(xù)飼喂大鼠6周，3個(gè)月誘癌率可達(dá)100% 。此方法AFB1最低劑量達(dá) 0.001 ～ 0.005 g/d［8］。第二，用二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide DMSO）溶解AFB1，根據(jù)體重?fù)Q算400 g/kg，每天腹腔注射1次，連續(xù)14 d后停注 AFB1，改飼含濃度為0.015%的2-AAF飼料30 d（實(shí)驗(yàn)第21 d開始切除大部分肝臟）;或根據(jù)體重?fù)Q算0.75～1.5 mg/kg AFB1，一次性注射，14 d后給予2-AAF加肝大部分切除，此方法建立的AFB1是肝癌的短期實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停?］。第三，用含2%的DEM水溶液和0.004%的AFB1 DMSO溶液交替灌胃7周，可誘發(fā)大鼠肝癌［10］。

2.3 亞胺基偶氮甲苯（o-aminoazotoluene，OAAT）

誘癌方法:第一，用濃度為1% 的OAAT苯溶液在鼠的兩肩胛間皮膚上涂抹2～3滴，每隔1 d 1次，大約涂100次。給藥后2個(gè)月可出現(xiàn)腫瘤結(jié)節(jié)，7個(gè)月以上可誘發(fā)小鼠肝腫瘤，誘癌率約55%［11］。第二，用濃度為2.5 mg的OAAT溶于植物油中，皮下注射4次，每次間隔2周，可誘發(fā)肝癌。此方法多用于病因?qū)W、發(fā)生學(xué)、發(fā)病機(jī)制和遺傳學(xué)方面的研究［12，13］。

2.4 二甲基氨基偶氮苯（p-dimethylaminoazobenzene，DAB）

誘癌方法:一般用濃度為0.06% 的DAB添加到飼料中喂養(yǎng)大鼠，同時(shí)限制鼠的維生素B2的攝取量（不超過1.5 ～2 mg/kg體重），經(jīng)4 ～6 個(gè)月可誘發(fā)出肝癌［14，15］。

2.5 2－乙酰氨基芴（2-acetylaminofluorene，2-AAF）

誘癌方法:以濃度為0.05% 的2-AAF添加到飼料中喂養(yǎng)SD大鼠，21 d后可出現(xiàn)癌變。顯微鏡下觀察可見細(xì)胞變性，有大小不等的增生性結(jié)節(jié)和癌巢結(jié)節(jié)形成［16］。此方法還適用于兔、狗、雞等動(dòng)物的肝癌模型［17］。

3 展望

鼠肝癌模型會(huì)隨著肝癌的治療手段的發(fā)展和臨床基礎(chǔ)研究的日益深入和發(fā)展而不斷改進(jìn)、完善。利用分子生物學(xué)技術(shù)，繼續(xù)研究更適合肝癌的多種生物學(xué)特性的鼠模型，建立更穩(wěn)定的新品種模型;減少或消除個(gè)體差異，提高實(shí)驗(yàn)的可行性和準(zhǔn)確性，尋求一種更適的模型建立方式，這些可能成為鼠肝癌模型的發(fā)展方向。

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