張世偉 (新疆昌吉市動物疾病預防控制中心 831100)
羊腸毒血癥是羊的一種急性毒血癥,是由D型魏氏梭菌在羊腸道中大量繁殖,產生毒素所引起。死后腎臟軟化,又稱為軟腎病,主要對綿羊危害較大,山羊也可感染。羊腸毒血癥主要發(fā)生于我國北方,發(fā)病多呈散發(fā)性,有明顯季節(jié)性,多發(fā)生于春末夏初和秋季牧草結實,農田谷菜收獲季節(jié),對放牧羊有較大的危害。
在昌吉地區(qū),羊腸毒血癥每年都有散發(fā)疫情,給農牧民帶來較大的損失。2007年10月昌吉市濱湖鄉(xiāng)某飼養(yǎng)戶飼養(yǎng)的200余只羊,13只羊突然發(fā)病死亡,造成了較大的損失。發(fā)病的羊多為膘肥體壯,食欲旺采食能力強的成年羊,根據臨床癥狀、病理解剖初診為羊腸毒血癥,馬上采取積極防治措施,使疫情得到控制,同時實驗室細菌學鑒定確診為羊腸毒血癥。
潛伏期短,多呈急性經過,突然發(fā)病死亡,傍晚放牧歸來未見任何癥狀,翌日臨晨已死在羊圈中;有的呈慢性經過,放牧時突然離群呆立或獨自奔跑,興奮不安,步態(tài)不穩(wěn),全身肌肉震顫,呼吸困難,磨牙,啃食泥土等異物,最后倒地或側臥,甩耳,頭頸后仰,四肢抽搐,痙攣,角弓反張,口鼻流出白沫,眼結膜蒼白,最終昏迷或呻吟,數分鐘或幾個小時內死亡;有的死前發(fā)生腸鳴,腹痛,拉黃色稀水,或深綠色或黑色稀便,一般體溫不高,死后腹部顯著膨大。
剖檢5只羊。腹腔液體增多,肝腫大,充血,質變脆;膽囊脹大約2~3倍,膽汁充盈;腎臟表面充血、出血,軟化,成泥狀,有臭味;胃腸有大量氣體,真胃黏膜發(fā)炎,有出血斑點,黏膜易脫落;小腸和大腸充血出血,尤以小腸最為嚴重,腸黏膜脫落、潰瘍;胸腔有黃色積液,肺氣腫,呈紫紅色;氣管內出血,內有大量泡沫樣黏液;心包積液,心肌擴張,松軟,心內外膜均有出血點。
由于羊腸毒血癥多為突發(fā)性死亡,病程短,癥狀不明顯,故生前診斷較為困難,但根據發(fā)病羊多死于飽食之后,死亡快,剖檢腎臟呈軟泥狀,膽囊異常腫大,胸腹腔積液,心包積液,形成出血性腸炎及潰瘍等可作出初步診斷,通過細菌學檢查及毒素中和試驗確診。
3.1 細菌學檢查 無菌操作取心、肝、腎直接觸片,革蘭氏染色,鏡檢觀察到大量、兩端鈍圓的粗大桿菌,有莢膜。
3.2 細菌培養(yǎng) 無菌操作取心、肝臟、腎臟病料接種于10%的血瓊脂平板上,經37℃24h厭氧培養(yǎng)后,可見圓形稍突起、灰白色、半透明的菌落,菌落周圍出現溶血環(huán),取菌落少許涂片,革蘭氏染色鏡檢發(fā)現革蘭氏陽性芽孢桿菌。
3.3 細菌純化培養(yǎng) 取血瓊脂平板上出現溶血環(huán)的菌落,劃線接種于綿羊血瓊脂平板上,37℃培養(yǎng)8~12h。
3.4 生化試驗 將綿羊血瓊脂平板上培養(yǎng)出的細菌分別移種于葡萄糖、乳糖、麥芽糖、果糖、甘露醇、蔗糖、淀粉發(fā)酵管及牛乳培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)8~12h后,發(fā)現該細菌能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、果糖、蔗糖,產酸產氣,不分解甘露醇、淀粉,而在牛乳培養(yǎng)基呈“暴烈發(fā)酵”現象。生化試驗反應說明該菌為產氣莢膜酸菌。
3.5 腸毒素檢查 取出病死羊回腸內容物50ml,用滅菌生理鹽水3倍稀釋、均勻、3000r/min離心10min,取上清液,分別給3只家兔耳靜脈注射3ml,另外3只家兔耳靜脈注射滅菌生理鹽水3ml。5h后,注射病死羊回腸內容物稀釋上清液的3只家兔死亡,而對照注射滅菌生理鹽水組的3只家兔健康。實驗證明腸毒素確實存在。
3.6 毒素測定 再取之前回腸內容物稀釋上清液1.5ml,分別與C型、D型產氣莢膜梭菌定型抗毒血清和滅菌生理鹽水 各0.5ml混合均勻,37℃恒溫條件下中和40min,然后各靜脈注射三組家兔,每組3只。12h后,注射C型抗毒血清+腸毒素(回腸內容物稀釋上清液)的兔子死亡,而注射D型抗毒血清和腸毒素混合液的兔子和滅菌生理鹽水的兔子均存活。最終實驗結果說明腸毒素為D型。
3.7 實驗室試驗結論 通過細菌學實驗、生化試驗和毒素測定,最終鎖定致病菌為D型魏氏梭菌,即病死羊死于羊腸毒血癥。
4.1 定期防疫 由于羊腸毒血癥病程短,突然發(fā)病死亡,必須加強防疫,每年定期(春季3~4月份,秋季9~10月)接種“羊三聯(lián)苗”。對病程長的病羊,可口服磺胺脒8~12g,連服幾日。
4.2 發(fā)病后處理 對于已發(fā)病的羊群,全群羊緊急接種“羊三聯(lián)苗”,急速轉移放牧地,從低洼陰濕地轉移至高坡干燥地,少青料,多粗料,少谷物,做好消毒隔離。對 病死羊要及時焚燒深埋,場圈內徹底清理、消毒,污染的墊草墊料焚燒徹底,糞便清理生物堆積發(fā)酵,場圈內生石灰水噴灑或用5%來蘇爾水溶液噴灑消毒。
4.3 加強飼養(yǎng)管理 保持好環(huán)境衛(wèi)生,切勿突然更換飼料,春季少搶青,秋季少搶茬,少時菜葉、根莖等多汁飼料、露水草、冰凍飼料,切忌多食谷物,放牧選高坡、陽坡地,避開低洼陰濕坡地。