針灸對阿爾茨海默患者海馬的影響

張海峽 郭宇森 陜西渭南職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院針灸推拿教研室(渭南714000)

阿爾茨海黙病(AD)以認(rèn)知功能障礙，日常生活能力喪失及精神行為異常為主要表現(xiàn)。而海馬是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中參與學(xué)習(xí)和記憶貯存的重要器官，因此在對阿爾茨海默病的研究過程中，海馬區(qū)成為了眾多學(xué)者關(guān)注的重點(diǎn)之一。近年來，實(shí)驗(yàn)研究者運(yùn)用針灸對該病的海馬區(qū)進(jìn)行了多方探索，并取得了一定進(jìn)展，現(xiàn)將近年來，針灸對阿爾茨海默病人海馬的影響做以闡述，旨在探討針灸對AD患者的治療機(jī)理和作用。

1 針灸對海馬傳導(dǎo)途經(jīng)以及相關(guān)酶的影響Wnt信號傳導(dǎo)通路是一個(gè)細(xì)胞水平調(diào)節(jié)的信號系統(tǒng)，在細(xì)胞間粘附、增殖、分化、代謝和神經(jīng)干細(xì)胞的維持等方面都起著重要作用Wnt信號系統(tǒng)由Wnt特異性跨膜受體巻曲蛋白(Frrizled)、糖原合成酶激酶-3(GSK-3)，散亂蛋白(Dishevelled)，β-連環(huán)蛋白(β-Catenin)等多種蛋白共同參與。正常時(shí)，Wnt在大腦皮層、海馬、內(nèi)嗅層都有較高表達(dá)。細(xì)胞外Wnt作用于Frizzled受體，使Dishevelled活化，激活PKC或PKB，抑制GSK-3的活性，使β-Catenin磷酸化減弱，從而使細(xì)胞質(zhì)β-連環(huán)蛋白含量增加，游離β-連環(huán)蛋白大量轉(zhuǎn)移入核內(nèi)與DNA結(jié)合蛋白T細(xì)胞因子淋巴增強(qiáng)子結(jié)合，細(xì)胞增殖反應(yīng)增強(qiáng)，細(xì)胞凋亡活動受制［1］。AD腦內(nèi)Wnt信號通路中的GSK-3活性異常增加早有報(bào)道，提示AD腦內(nèi)Wnt信號系統(tǒng)異常減弱［2］。當(dāng)Wnt信號傳導(dǎo)異常減弱時(shí)可引起GSK-3活性增加，β-Catenin磷酸化增強(qiáng)，從而使β-Catenin過度降解導(dǎo)致神經(jīng)元死亡，tau蛋白磷酸化及相關(guān)的神經(jīng)元纖維纏結(jié)的形成，Aβ堆積形成老年斑。這些均為AD的病理變化。周華等研究發(fā)現(xiàn)［3］在正常大鼠中Wnt信號相對較強(qiáng)，而模型組中Wnt信號明顯減弱，針刺組、艾灸組和針刺艾灸組大鼠Wnt信號表達(dá)比模型組均有不同程度的增強(qiáng)，說明針刺艾灸預(yù)處理可能通過調(diào)節(jié)Wnt信號系統(tǒng)相關(guān)酶GSK-3等的活性，調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白β-catenin的表達(dá)，抑制tau蛋白磷酸化，對預(yù)防和延緩神經(jīng)細(xì)胞的退行性變性、改善學(xué)習(xí)記憶功能具有重要意義。孫國杰等［4］進(jìn)一步用酶聯(lián)免疫法證實(shí)，AD模型組大鼠GSK-3含量明顯增高，證明其活性明顯增強(qiáng)與正常組比較有極顯著差異(P＜0.001)，而電針、艾灸后GSK-3含量顯著降低。進(jìn)一步證實(shí)針刺調(diào)節(jié)Wnt信號系統(tǒng)預(yù)防治療AD。

2 對海馬蛋白激酶信號通路的影響在細(xì)胞的信號傳導(dǎo)過程中，蛋白激酶和蛋白磷酸酶是細(xì)胞內(nèi)主要的信號傳導(dǎo)蛋白。蛋白磷酸酶2A(PP2A)具有多種生物活性，能使蛋白質(zhì)脫磷酸，在細(xì)胞的凋亡，增生，分化，代謝中起重要作用.PP2A活性降低可能是導(dǎo)致AD腦中Tau蛋白和β-Catenin過度磷酸化的原因［5］。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，AD患者腦中磷酸酶PP2A、PP活性均明顯低于正常腦組織，特別是PP2A的活性丟失嚴(yán)重［6］.

孫國杰等研究也發(fā)現(xiàn)［4］模型組大鼠(PP2A)含量顯著降低，活性明顯下降，而預(yù)電針，艾灸組，預(yù)電針加艾灸組PP2A含量顯著上升，與模型組相比有明顯差異，由此認(rèn)為，預(yù)電針和艾灸對PP2A的改變可能是針灸預(yù)處理防治AD的作用機(jī)制之一。

另外，海馬蛋白激酶(PKC)與突觸可塑性及長時(shí)程增強(qiáng)效應(yīng)(LTP)的形成也密切相關(guān)。激活的PKC可使多種蛋白的絲氨酸，蘇氨酸發(fā)生磷酸化，從而影響到細(xì)胞內(nèi)生物信息的代謝［7］。人體中許多生長因子受體具有酪氨酸蛋白激酶(PTK)活性，受體PTK的主要生理功能是將生長因子信號轉(zhuǎn)化為細(xì)胞內(nèi)信號［8］，以維持細(xì)胞正常代謝，增殖，生長等。唐勇等［9］用電針刺激“百會”、“涌泉”、“太溪”、“血?！焙蠓琶夥y定大鼠海馬組織細(xì)胞膜(PKC)和(PTK)的含量發(fā)現(xiàn):模型組癡呆大鼠PKC和PTK含量明顯降低，電針組PKC和PTK含量明顯升高，說明老年癡呆大鼠可能存在海馬蛋白激酶信號通路的抑制，而給予電針治療后可能激活膜受體通過相應(yīng)的信號傳導(dǎo)途徑激活PKC和其相連的胞內(nèi)PTK，促進(jìn)與學(xué)習(xí)記憶形成所必需的蛋白合成或相關(guān)基因表達(dá)，從而改善老年癡呆的學(xué)習(xí)記憶功能障礙。

3 對海馬細(xì)胞凋亡的影響14-3-3ε蛋白主要參與對細(xì)胞凋亡的抑制作用，14-3-3ε蛋白參與了阿爾茨海默病(AD)患者海馬神經(jīng)原纖維纏結(jié)(NFT)的形成與調(diào)節(jié)，并與調(diào)節(jié)Tau蛋白磷酸化密切相關(guān)，杜艷軍等［10］研究發(fā)現(xiàn)14-3-3ε蛋白隨著增齡有明顯下降趨勢;而艾灸百會、腎俞后均能改善這一現(xiàn)象，增強(qiáng)14-3-3ε蛋白的表達(dá)，故艾灸可抑制老年大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡，可能是通過抑制14-3-3ε蛋白的隨年齡減少。

近幾年有研究顯示，線粒體介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的重要細(xì)胞器，并可能引發(fā)衰老和疾病的基礎(chǔ)原因。而線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡效應(yīng)階段早期一個(gè)不可逆的特征。線粒體膜電位下降甚至喪失表現(xiàn)為線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運(yùn)開放，線粒體膜電位崩解，呼吸鏈斷裂，線粒體膜間腔內(nèi)的凋亡誘導(dǎo)因子，細(xì)胞色素C，Bcl-2家族蛋白等的釋放，激活細(xì)胞“殺手”Caspase酶，最終引起細(xì)胞凋亡和死亡。杜艷軍等［11］通過流式細(xì)胞儀檢測手段發(fā)現(xiàn)老年組大鼠海馬線粒體膜電位陽性百分比率明顯較艾灸組，青年組增高，亞二倍體峰向右移動;老年組大鼠海馬神經(jīng)元凋亡數(shù)量明顯較艾灸組，青年組增多，而艾灸老年組大鼠百會，腎俞后線粒體膜電位陽性百分比率明顯下降(P＜0.05)，明顯減少神經(jīng)元凋亡數(shù)量。另外劉業(yè)松等也發(fā)現(xiàn)養(yǎng)血清腦顆?？梢种拼俚蛲龌駼ax的表達(dá)，發(fā)揮其抑制Aβ海馬內(nèi)注射誘導(dǎo)AD模型大鼠神經(jīng)細(xì)胞的凋亡［12］。

從以上看，針灸對AD患者的海馬的影響是多靶點(diǎn)的，具體這些靶點(diǎn)之間如何相互影響還待于進(jìn)一步研究。解決這一問題對治療AD患者具有重要的意義，也是迫切需要研究的。

［1］Jeffrey DA.Science，1996，271:1826-1832.

［2］De Ferrari GV.Brain Res Rev，2000，33:1-12.

［3］周 華，孔立紅，沈 峰，等.針灸預(yù)處理對Alzheimer大鼠 Wnt1表達(dá)的［J］.中國老年學(xué)雜志，2010，7(30):2019-2024.

［4］孫國杰，周 華，杜艷軍，等.針灸處理對AD大鼠海馬組織GSK-3和PP2A影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2011，22(3):732-733.

［5］Gong CX，LiuF，Grundke-IQBAL I，et al.Poet-translational modifications of Tan proten.in Alzheimers Dlzheimers Disenase［J］.J Nental Transm，2005，112(6):813.

［6］Jolinson Gvw etal.Alzheimers Disease［J］.Review，1998，3:125.

［7］魏小龍，張永詳.蛋白激酶與阿爾采未?。跩］.生理科學(xué)進(jìn)展，1999，30(4):359-362.

［8］Pazin.MJ，williams LT.Triggering signaling cascades by receptor tyrosine kinases［J］.Trends Biochem Sci，1992，17:374-378.

［9］唐 勇，余曙光，劉旭光，等.電針激活老年癡呆大鼠海馬蛋白激酶信號通路的作用［J］.中國臨床康復(fù)，2005，1(7):124-125.

［10］杜艷軍，孫國杰，田 青.艾灸對老年大鼠海馬14-3-3 蛋白的影響［J］.中國針灸，2007(增刊):101-103.

［11］杜艷軍，孫國杰.艾灸對老年大鼠海馬線粒體膜電位神經(jīng)元調(diào)亡的影響［J］.針刺研究，2005，30:212-214.

［12］劉業(yè)松，李雪梅，王英杰.養(yǎng)血清腦顆粒對阿爾茨海默病模型大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響［J］.陜西中醫(yī)，2011，32(10):1419-1421.