恩諾沙星對水生動物作用的研究進展

韓 飛張 曼張 周王晶鈺

（1.楊凌職業(yè)技術(shù)學院，陜西楊凌 712100；2.西北農(nóng)林科技大學 動物醫(yī)學院，陜西楊凌 712100）

恩諾沙星對水生動物作用的研究進展

韓 飛1張 曼1張 周1王晶鈺2

（1.楊凌職業(yè)技術(shù)學院，陜西楊凌 712100；2.西北農(nóng)林科技大學 動物醫(yī)學院，陜西楊凌 712100）

恩諾沙星是獸醫(yī)臨床上廣泛使用的抗微生物藥物之一。本文通過綜述恩諾沙星的理化性質(zhì)以及在水生動物體內(nèi)的藥動學和殘留檢測方法，闡述恩諾沙星在水生動物體內(nèi)代謝消除規(guī)律，對水生動物的影響，為臨床用藥提供參考。

恩諾沙星；水生動物；殘留檢測

恩諾沙星（Enrofloxacin）又名乙基環(huán)丙沙星、恩氟沙星。系統(tǒng)命名為：1-環(huán)丙基-7-（4-乙基-1-哌嗪基）-6-氟-1，4-二氫-4-氧代-3-喹啉羧酸。本品目前被國家指定為動物專用藥。是第三代氟喹諾酮類藥物，由德國拜耳公司于1987年首創(chuàng)并投放市場，是畜禽專用的抗菌藥物[1]。

1 理化性質(zhì)

本品為微黃色或淡橙黃色結(jié)晶性粉末；無臭，微味苦；遇光會漸變成為橙紅色。在水和甲醇中微溶，在醋酸、鹽酸或氫氧化鈉溶液中易溶。其鹽酸鹽及乳酸鹽均易溶于水，一般酸鹽比較穩(wěn)定，鈉鹽溶解的較高，在空氣中易吸潮結(jié)塊[2]。恩諾沙星由于化學分子結(jié)構(gòu)獨特具有廣譜的抗菌和殺菌的機理，其抗菌能力強，藥效好，易吸收，在動物體內(nèi)的分布較廣，與其他抗生素之間無交叉耐藥性，因此對于預防和治療畜禽和水生動物的細菌性疾病具有良好的效果。

2 藥動學

恩諾沙星，對于多數(shù)單胃動物來說內(nèi)服吸收迅速和較安全，0.5～2h可達血藥峰濃度。肌內(nèi)注射吸收迅速而完全，血清蛋白結(jié)合率為20%～40%。畜禽應用恩諾沙星后，體內(nèi)分布很廣泛，除了中樞神經(jīng)系統(tǒng)外，幾乎所有的組織的藥物濃度都高于血漿，這有利于全身感染和深部組織感染的治療。本品通過腎和非腎方式進行消除，約15%～50%的藥物原形通過尿排泄。肝臟代謝是次要消除方式，主要是脫去7-位哌嗪環(huán)的乙基生成環(huán)丙沙星，其次為氧化及葡萄糖醛酸結(jié)合[3]。

近年來，恩諾沙星在動物體內(nèi)的藥代動力學研究越來越廣泛，而水生動物不同于其他動物之處在于水生動物是變溫動物。因此，水生動物體內(nèi)的藥代動力學研究更加復雜。

汪文選等[4]在20℃和25℃兩種溫度下測定了恩諾沙星在鯽魚體內(nèi)的藥動學。結(jié)果表明：兩種水溫條件下鯽魚血漿中的恩諾沙星的分布半衰期和達峰時間基本相同。消除半衰期和藥時曲線下面積在20℃時明顯大于25℃時；腎臟和肝臟中20℃時藥物的清除率明顯小于25℃，而分布半衰期、達峰時間、消除半衰期、藥時曲線下面積則明顯大于25℃。

李春雨等[5]研究了不同給藥方式下恩諾沙星在鯉魚體內(nèi)的藥動學，結(jié)果表明，通過腹腔注射和口灌鯉魚肝臟、腎臟、血漿、和肌肉組織中的藥時曲線符合一級消除二室模型。通過比較血漿動力學參數(shù)，表明口灌比腹腔注射給藥吸收慢，達峰濃度低，血

藥達峰時間長。

錢云云等[6]報道了恩諾沙星在羅氏沼蝦體內(nèi)的藥代謝動力學。結(jié)果表明，羅氏沼蝦以10 mg/ kg劑量單次肌注給藥后，蝦血液中的藥物濃度即刻就能達到峰值，并迅速向組織中分布。恩諾沙星在肝胰腺、血淋巴、肌肉中的平均回收率可達到85.43%±2.75%、86.54%±2.39%、95.01%±1.99%。

3 殘留檢測

有資料表明，恩諾沙星大劑量使用時會在動物體內(nèi)產(chǎn)生一定程度的蓄積。主要蓄積物是其代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星。其主要的表現(xiàn)是對肝腎的毒性，并且其毒性的大小與腎臟的受損程度相關(guān)。相關(guān)的研究資料也表明，恩諾沙星的毒副作用還包括：致癌性、腎功能不全、神經(jīng)毒性、幼畜關(guān)節(jié)炎、過敏反應等。因此，對恩諾沙星在動物性食品中的殘留檢測是非常有必要的。我國農(nóng)業(yè)部公告（第235號）附錄2中規(guī)定，水產(chǎn)品中恩諾沙星的殘留量為100μg/kg。目前對恩諾沙星殘留量的檢測一般有一下幾種方法：

3.1 微生物法

微生物法檢測時間短，樣品處理簡單，成本低，適用于對畜禽組織中藥物殘留的快速篩選并且適用于不同基質(zhì)的樣品檢測，具有很好的重復性和再現(xiàn)性，方法準確可靠。

沈翠香等[7]用增敏微生物抑制法來檢測恩諾沙星藥物殘留，由于紅四氮唑的顯色效果方便，因而用來定性判斷恩諾沙星的藥物殘留，檢測限低到10μg/kg。實驗結(jié)果表明：未添加恩諾沙星的結(jié)果呈紅色；恩諾沙星的標準品濃度在5μg/L時結(jié)果呈微紅，10μg/L及以上時，結(jié)果呈無色。

胡鯤等[8]對銀鯽肌肉中殘留的恩諾沙星進行檢測，選擇紅四氮唑顯色培養(yǎng)基上，分別以滕黃八疊球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌和熒光假單孢菌作為指示菌，檢測異育銀鯽肌肉中ENR殘留的最低檢測分別50μg/kg、120μg/kg、100μg/kg、75μg/kg和100μg/kg。實驗檢測限可達50μg /kg。

3.2 酶聯(lián)免疫法（ELISA）

ELISA法被廣泛應用于抗菌藥物的殘留測定中，此法適用于大量樣品的同時檢測以及殘留的快速篩選，優(yōu)點是簡單，快速。該法以抗原和抗體的特異性結(jié)合的原理得到檢測結(jié)果。

蔣興東等[9]用制備免疫抗原和包被抗原的方法，免疫新西蘭大白兔得到恩諾沙星的多克隆抗體，建立了恩諾沙星間接的競爭ELISA的方法。其結(jié)果表明：抗恩諾沙星的血清效價達達1：212以上，最低檢測限（LOD）為10ng/mL。批內(nèi)RSD為3.18%～7.64%，批間RSD為9.69%～11.94%。

劉紅等[10]用紫外掃描分析和以及EL ISA 方法鑒定，采用ENRHRP 與游離的恩諾沙星相競爭的模式來建立檢測恩諾沙星殘留的EL ISA 檢測方法，其標準曲線在 0. 423～1000ng/mL之間時線性關(guān)系良好，其IC50為33.76ng/mL。用ELISA檢測方法批內(nèi)RSD為5. 75%，批間RSD為10. 69%，重復性較好。

3.3 高效液相色譜法（HPLC）

目前對于恩諾沙星的檢測多用液相色譜法。采用高效液相色譜法時應配備不同的檢測器，保證了高效液相色譜法的定量準確、特異性強等優(yōu)點?？梢杂么朔ǚ治鰟游镄允称分卸髦Z沙星的殘留。

陳雪昌等[11]用高效液相色譜法測定水產(chǎn)品中恩諾沙星的殘留量，在測定方法下得到恩諾沙星的標準色譜圖和樣品的加標色譜圖，其中保留時間約為6.4min，在0.005～0.20 μg/mL 范圍內(nèi)線性顯著。恩諾沙星的峰面積（A）與標準液濃度X（μg/mL）相關(guān)系數(shù)是0.9983。

陳向丹[12]建立了恩諾沙星有效成分含量的HPLC測定法。結(jié)果顯示，恩諾沙星在10.0～200.0 μg／mL的范圍內(nèi)含量與峰面積線性關(guān)系良好，平均回收率101.3%，相關(guān)系數(shù)為0.9999（n=6），RSD為2.0%。

4 臨床應用

恩諾沙星是一類應用廣泛，療效確切的抗菌藥。在臨床應用中其不良反應的發(fā)生與給藥途徑、藥物劑量、用藥速度、用藥時間及個體的差異有關(guān)。應該嚴格掌握適應癥，注意配伍禁忌，療程不宜過長。其與青霉素類、慶大霉素、卡那霉素、粘菌素等合用時具有協(xié)同作用，組成復方則會提高療效并且降低成本。還應注意的是恩諾沙星和利福平等有拮抗作用，在臨床使用中應避免合用。

臨床上，恩諾沙星制劑廣泛地應用于淡水魚類的疾病防治：腸炎病、爛鰓病、赤皮病、出血性敗血癥、打印病；鰻愛德華氏病、鰻弧菌性腸炎、鰻赤鰭；對蝦立克次氏體病、對蝦白斑病毒病、紅鰓病、黃鰓病、爛眼病；黃鱔出血病；蟹甲殼潰瘍病、爛鰓病、細菌性抖抖病等。而且，恩諾沙星對于一般的常規(guī)藥所不能治療的或久治不愈的爛鰓病、赤鰭病、腸炎病、爛尾病及各類水產(chǎn)動物的疾病都具有較好的療效。

5 小結(jié)與展望

恩諾沙星在對水生動物病原體的藥效學和水生動物的藥動學特征上有相當?shù)膬?yōu)越性，具有組織分布廣、抗菌譜廣、生物利用度高、不易產(chǎn)生耐藥性、抗菌活性強、口服吸收好不良反應相對較少等優(yōu)點，同時毒副作用較小。其在體內(nèi)的藥動力學特征：體內(nèi)分布廣泛，消除半衰期長，表現(xiàn)分布容積大；肌注和內(nèi)服后吸收迅速。治療水生動物細菌性疾病此藥物是較好的選擇，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中有較好的應用前景，可以在漁業(yè)生產(chǎn)中合理推廣應用。同時也應該注意供食用的魚的休藥期。

[1] 楊先樂，陸承平，戰(zhàn)文斌.新編漁藥手冊[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2005：208-209.

[2] 中華人民共和國獸藥典2010版[M]中國農(nóng)業(yè)出版社，2010：412-413.

[3] 陳杖榴.獸醫(yī)藥理學[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社.2009：274-276.

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[5] 李春雨，李繼昌，盧彤巖，等.不同給藥方式下恩諾沙星在鯉體內(nèi)的藥動學研究[J].集美大學學報，2009，14（3）：8-13.

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[8] 胡鯤，李怡，朱澤聞. 微生物顯色法快速檢測水產(chǎn)品中恩諾沙星殘留[J].上海海洋大學學報，2009，18（7）：04-07.

[9] 蔣興東，陳玉飛，涂健，等.恩諾沙星在雞肉組織中殘留的ELISA檢測方法研究[J]. 畜牧與獸醫(yī)，2008，40（8）：30-33.

[10] 劉紅，曾振靈，陳杖榴，等.恩諾沙星 ELISA快速檢測方法的建立[J].中國獸藥雜志2006，40（11）：13-15.

[11] 陳雪昌，鄭代明，金彩杏.高效液相色譜法同時測定水產(chǎn)品中鹽酸環(huán)丙沙星和恩諾沙星殘留量[J].中國科技信息，2005，（14）：16-17.

[12] 陳向丹，曾勇. 高效液相色譜法測定恩諾沙星、鹽酸小檗堿粉中兩種有效成分含量[J].中國獸藥雜志，2012，46（5）：31-33.

楊凌職業(yè)技術(shù)學院科學研究基金項目（A2012041）。

韓飛（1977-），男，陜西漢中人，碩士，講師，主要從事生物制藥與藥物制劑方向的研究。