HPLC法測(cè)定25%福.腐可濕性粉劑含量方法改進(jìn)

董素云 （河北威遠(yuǎn)生化有限公司 石家莊 050031）

HPLC法測(cè)定25%福.腐可濕性粉劑含量方法改進(jìn)

董素云 （河北威遠(yuǎn)生化有限公司 石家莊 050031）

以乙腈+水+三氟乙酸為流動(dòng)相，使用C18反相色譜柱和紫外吸收檢測(cè)器，對(duì)25%福.腐可濕性粉劑（福美雙20%、腐霉利5%）的含量進(jìn)行進(jìn)行液相色譜分離，外標(biāo)法定量。本方法線性范圍寬，精密度好，準(zhǔn)確度高，簡(jiǎn)單快速，是企業(yè)生產(chǎn)控制和產(chǎn)品監(jiān)督檢驗(yàn)的理想方法。

福美雙；腐霉利；HPLC；含量

福美雙屬二硫代氨基甲酸酯類殺菌劑，（thiram）保護(hù)作用強(qiáng)，抗菌譜廣，對(duì)種子傳染和苗期土壤傳染的病害有良好的防治效果，另一個(gè)重要用途是作為內(nèi)吸殺菌劑復(fù)配的伴藥，即與多種內(nèi)吸治療劑復(fù)配制成混合殺菌劑。 腐霉利（ procymidone），是新型殺菌劑，屬于低毒性殺菌劑。主要是抑制菌體內(nèi)甘油三酯的合成，具有保護(hù)和治療的雙重作用，國(guó)內(nèi)報(bào)道的使用帶電子捕獲檢測(cè)器的氣相色譜儀和氣相色譜—質(zhì)譜儀，要求高，操作復(fù)雜，時(shí)間長(zhǎng)。25%福.腐可濕性粉劑含量檢驗(yàn)方法試驗(yàn)，使用H PLC方法，具有方法操作快速簡(jiǎn)單、線性范圍寬、精密度好，準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn)，是產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程檢驗(yàn)和監(jiān)督檢驗(yàn)的理想方法。

一、試驗(yàn)部分：

1.儀器與試劑

島津高效液相色譜儀：具有可變波長(zhǎng)的紫外檢測(cè)器，色譜工作站；

色譜柱：150mm× 4.6mm(i.d.)，內(nèi)裝5μm C18填充物的色譜柱（或等同效果的其它色譜柱）；微孔過(guò)濾：濾膜孔徑0.45μm；微量注射器：25μL。

甲醇、乙腈：色譜純； 一級(jí)蒸餾水； 三氟乙酸（分析純）

福美雙、腐霉利標(biāo)準(zhǔn)品：已知準(zhǔn)確質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.0%

2.色譜操作條件

溫度：室溫（溫度變化不大于2℃）；流動(dòng)相：乙腈+水（0.04%三氟乙酸）=45+55（V/V）；流速：1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm；進(jìn)樣量：10ul。

3.試驗(yàn)方法

（1)溶液的制備

標(biāo)樣溶液的制備：

稱取福美雙標(biāo)準(zhǔn)品約0.05g、腐霉利標(biāo)準(zhǔn)品0.01g（準(zhǔn)確至0.0002g），于100ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。

試樣溶液的制備

稱取約含福美雙0.05g、腐霉利0.01g（精確至0.0002g）的樣品于100ml的容量瓶中，用甲醇溶解并定容，搖勻。

(2）測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直到相鄰兩針福美雙及腐霉利峰面積相對(duì)變化小于1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

（3)計(jì)算

福美雙（或腐霉利）含量X（%）按（1）式計(jì)算：

式中：A1－標(biāo)樣中福美雙（或腐霉利）面積的平均值；

A2－試樣中福美雙（或腐霉利）峰面積的平均值；

m1－福美雙（或腐霉利）標(biāo)樣的稱樣量，g；

m2－樣品的稱樣量，g；

P－福美雙（或腐霉利）標(biāo)樣的含量，%。

二、結(jié)果與討論

1.色譜分離結(jié)果（見圖1）

圖1 25%福.腐可濕性粉劑含量的液相色譜圖

2.色譜分離條件的選擇

經(jīng)過(guò)大量探索、改進(jìn)和優(yōu)化，選擇不同比例的乙腈、水，從經(jīng)濟(jì)實(shí)用、出峰時(shí)間等多方面考慮，最后選擇了乙腈和水的比例為45+55，但此時(shí)出現(xiàn)了峰形拖尾，加入適量的三氟乙酸很好地矯正了峰形。

3.分析方法線性關(guān)系試驗(yàn)

準(zhǔn)確配制了0.05～5mg/ml之間的5個(gè)福美雙標(biāo)樣溶液和0.01～1mg/ml之間的5個(gè)腐霉利標(biāo)樣溶液，在1.2色譜條件下測(cè)定?？芍谏鲜鰸舛确秶鷥?nèi)，福美雙峰面積（y）與其質(zhì)量(x)呈線性關(guān)系，線性方程為Y=7.6051X-0.055，其相關(guān)系數(shù)γ=0.9998。腐霉利峰面積（y）與其質(zhì)量(x)呈線性關(guān)系，線性方程為Y=14.058X-0.06，其相關(guān)系數(shù)γ=0.9995

圖2 福美雙、腐霉利外標(biāo)法測(cè)定線性關(guān)系曲線

4.方法的精密度試驗(yàn)

在1.2色譜條件下，對(duì)同一樣品平行測(cè)定8次，統(tǒng)計(jì)分析測(cè)定值，并求得方法的標(biāo)準(zhǔn)偏差（S）分別為福美雙0.18、腐霉利0.061，變異系數(shù)（CV）為福美雙0.72%、腐霉利1.21%。

表1 福美雙精密度測(cè)定結(jié)果

5.方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)、

分別將福美雙、腐霉利標(biāo)樣，定量地加入到已準(zhǔn)確測(cè)知含量的福美雙和腐霉利的試樣中，在1.2色譜條件下測(cè)定，測(cè)的方法的回收率在98.9%～100.5%之間。

表2 福美雙的準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果

結(jié)論

試驗(yàn)表明，本文所建立的25%福.腐可濕性粉劑（福美雙20%、腐霉利5%）H PLC分析方法，具有線性范圍寬，精密度好，準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn)。此方法適合25%福.腐可濕性粉劑及原藥含量的測(cè)定。