羊妊娠診斷的研究進(jìn)展

魏紅芳，權(quán) 凱，聶芙蓉，辛?xí)粤?/p>

(1.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院，河南 鄭州450011; 2.河南省農(nóng)科院，河南 鄭州450002)

隨著人工授精與胚胎移植等技術(shù)的推廣與應(yīng)用，養(yǎng)羊業(yè)逐漸向工廠化方向發(fā)展。母羊繁殖力的高低直接影響著養(yǎng)羊業(yè)的生產(chǎn)效率和經(jīng)濟(jì)效益。早期妊娠診斷，不僅能減少母羊空懷所造成的經(jīng)濟(jì)損失，而且便于及時(shí)對(duì)妊娠母羊進(jìn)行合理的飼養(yǎng)和管理，同時(shí)也是提高家畜繁殖效率，促進(jìn)家畜集約化管理，提高效益的重要技術(shù)措施之一［1］。及時(shí)準(zhǔn)確的妊娠診斷，尤其是早期妊娠診斷是提高母羊生產(chǎn)力和養(yǎng)羊業(yè)生產(chǎn)效益的技術(shù)保障。母羊配種后，能盡早地進(jìn)行妊娠診斷，有利于減少空懷，縮短母羊的非繁殖天數(shù)。同時(shí)，確診妊娠的母羊要依照妊娠母羊的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行飼養(yǎng)管理，從而確保受胎和促進(jìn)胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育。對(duì)未妊娠母羊應(yīng)盡快查明原因，進(jìn)行發(fā)情處理或及時(shí)淘汰，避免母羊長(zhǎng)期處于假妊娠或乏情狀態(tài)。因此，對(duì)母羊進(jìn)行早期妊娠診斷在現(xiàn)代養(yǎng)羊業(yè)中有著重要意義。

1 外部觀察法和試情法

外部觀察法是傳統(tǒng)的妊娠診斷方法，其實(shí)質(zhì)就是通過(guò)母羊是否返情來(lái)判斷羊是否妊娠。母羊發(fā)情周期平均17 ～21 d，如果母羊配種后未妊娠，正常情況下，配種后17 ～21 d都會(huì)有前情期或發(fā)情期征狀; 如果妊娠，則這個(gè)時(shí)間不會(huì)出現(xiàn)前情期或發(fā)情期征狀。因此，在配種后的第17 ～21 天用試情法或外部觀察法檢查，觀察母羊是否有前情期或發(fā)情期征狀，如果沒(méi)有這些征狀則很可能母羊已經(jīng)妊娠，如果母羊返情，則一般認(rèn)為母羊沒(méi)有受孕。不返情時(shí)間越長(zhǎng)，不返情率與實(shí)際受胎率越接近。另外，妊娠母羊通常還會(huì)表現(xiàn)以下特征: 食欲好，嗜睡，易上膘，行動(dòng)謹(jǐn)慎，外陰部皺縮變小、蒼白、較涼。

試情與外部觀察可作為羊場(chǎng)的常規(guī)管理工作，是判斷母羊配種受胎的重要依據(jù)。但此法在某些情況下診斷的可靠性不穩(wěn)定，母羊群的生殖健康水平越高，則不返情率與受胎率越接近，反之，則相差可能越大。

2 超聲波診斷法

有關(guān)羊妊娠診斷的報(bào)道較多［1～13］，但目前羊的妊娠診斷在生產(chǎn)中依然采用配種后的第17 ～23 天用試情公羊檢測(cè)返情，第28 ～45 天采用超聲波確診的方法進(jìn)行診斷［2～10］。超聲波診斷是把超聲波的物理特點(diǎn)和動(dòng)物組織結(jié)構(gòu)的聲學(xué)特點(diǎn)密切結(jié)合的一種物理學(xué)診斷法。目前超聲波診斷儀主要有A 超、B 超和多普勒超聲三種。超聲波診斷是以高頻聲波對(duì)動(dòng)物的子宮進(jìn)行探查，然后將其回波放大后以不同的形式轉(zhuǎn)化成不同的信號(hào)顯示出來(lái)。

刁顯輝等采用超聲波儀對(duì)羊進(jìn)行了早期妊娠診斷，發(fā)情配種后35 d 以上的母羊準(zhǔn)確率接近于100 %［2］。楊冬梅等用配有7.5 MHz探頭的超聲掃描儀，以胎盤(pán)子葉作為主要的判斷依據(jù)，對(duì)310 只轉(zhuǎn)基因胚胎移植的受體山羊進(jìn)行早期妊娠診斷，胚胎移植后60 ～65 d 試驗(yàn)?zāi)秆蛉焉镌\斷陰性(B 超判斷未懷孕) 的準(zhǔn)確率為98.1%，妊娠診斷陽(yáng)性(B 超判斷懷孕) 準(zhǔn)確率為100%［3］。

武和平等對(duì)1 820 只胚胎移植后33 ～80 d的受體山羊進(jìn)行B 超妊娠診斷，妊娠羊診斷準(zhǔn)確率為99.92%(1 210/1 211) ，未妊娠羊診斷準(zhǔn)確率為99.39% (605/609)［4］。古麗莎拉等運(yùn)用懷孕聲波測(cè)定儀對(duì)工廠化養(yǎng)羊生產(chǎn)中的632 只綿、山羊進(jìn)行早期妊娠測(cè)定，試驗(yàn)結(jié)果表明: 45 ～60 d 的試驗(yàn)?zāi)秆?，妊娠診斷準(zhǔn)確率達(dá)到93.7%［5］。李福剛等應(yīng)用B 型超聲斷層掃描儀對(duì)279 只波爾山羊胚胎移植受體白山羊和87 只自然交配波爾山羊進(jìn)行早期妊娠檢查，在胚胎移植后20 ～100 d 試驗(yàn)羊妊娠診斷陰性(B 超判斷未懷孕) 的準(zhǔn)確率為100%，正常交配羊妊娠診斷陽(yáng)性(B 超判斷懷孕) 的準(zhǔn)確率為100%［6］。成鵬程等利用B 超儀與腹腔內(nèi)窺鏡對(duì)母羊群進(jìn)行早期妊娠診斷，B 超儀與腹腔內(nèi)窺鏡母羊妊娠診斷準(zhǔn)確率分別可達(dá)到92.6%(63/68) 和94.4% (33/35) ，差異不顯著(P ＞0.01)［7］。袁安文等應(yīng)用B 型超聲診斷儀對(duì)繁殖狀況不明的羊群進(jìn)行妊娠診斷，診斷山羊妊娠準(zhǔn)確率為100%(14/14)［8］。隨著肉羊養(yǎng)殖業(yè)規(guī)?；⒓s化程度的不斷提高，在肉羊繁殖領(lǐng)域，借助B 超診斷技術(shù)進(jìn)行肉羊早期妊娠診斷，有效提高了肉羊早期妊娠鑒定的準(zhǔn)確率，縮短了肉羊空懷天數(shù)，降低了空懷期飼養(yǎng)成本，進(jìn)一步提升了肉羊繁殖效率，獲得了較好的經(jīng)濟(jì)效益［9］。B 超是一種經(jīng)濟(jì)實(shí)用、操作簡(jiǎn)便、簡(jiǎn)單易學(xué)、準(zhǔn)確率高的早期妊娠診斷技術(shù)，值得大力推廣應(yīng)用［10］。

總體來(lái)看，A 型超聲波儀是一種較為廉價(jià)的妊娠診斷儀器，體積小便于攜帶。當(dāng)A超探測(cè)到子宮內(nèi)充滿液體的孕囊時(shí)，反射回來(lái)的聲波會(huì)被轉(zhuǎn)換成聲音信號(hào)，一般是發(fā)出持續(xù)的長(zhǎng)音。在配種后30 ～75 d 時(shí)，檢查的準(zhǔn)確率較高，但75 d 后，則假陰性比例增加。

便攜式B 型超聲波儀(B 超) 進(jìn)行母羊的妊娠診斷是目前最具有實(shí)用價(jià)值的方法，尤其適合養(yǎng)羊小區(qū)和規(guī)模羊場(chǎng)。

多普勒超聲是應(yīng)用多普勒效應(yīng)的原理，即超聲探頭和反射體之間作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，其回聲頻率就會(huì)發(fā)生改變，此種頻率的改變稱(chēng)為頻移。頻移的程度與相對(duì)運(yùn)動(dòng)速度成正比，當(dāng)兩者作對(duì)向運(yùn)動(dòng)時(shí)，頻率就會(huì)增加，其頻率增減的數(shù)字(頻差) 可用檢波器檢出，再用低頻放大，功率放大而推動(dòng)揚(yáng)聲器發(fā)出多普勒信號(hào)音。其準(zhǔn)確率高。但多普勒超聲診斷儀的使用要求使用者必須能夠判斷妊娠各階段的信號(hào)音，才能做出正確判斷。

3 免疫學(xué)診斷法

隨著免疫學(xué)診斷技術(shù)的發(fā)展，人們開(kāi)始利用免疫學(xué)方法，對(duì)妊娠前后母羊血清、糞便和尿液中的激素和一些未知物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)其含量來(lái)判斷母羊是否妊娠。但由于這些生殖激素在妊娠和未妊娠羊血清中，因品種、個(gè)體差異等因素的影響，目前還很難在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。

陶勇等用放射免疫分析法檢測(cè)血液中的內(nèi)分泌指標(biāo)——孕酮和雌二醇的水平，妊娠診斷的準(zhǔn)確率為75%［11］。李學(xué)斌等應(yīng)用ELISA 法測(cè)定綿羊血清中干擾體液免疫反應(yīng)的因子，在配種后48 h，以該因子的配種相對(duì)值作為超早期妊娠診斷的依據(jù)，判斷妊娠和空懷的準(zhǔn)確性分別達(dá)87.5%和84.3%［12］。

EIA、ELISA 和膠體金等免疫學(xué)技術(shù)具有快速、敏感、簡(jiǎn)便、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，目前已被廣泛用于臨床醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)、分析化學(xué)、食品分析等領(lǐng)域。這些方法對(duì)血清中、尿液和糞便中的微量物質(zhì)均可以靈敏的檢測(cè)。因此，免疫學(xué)技術(shù)將會(huì)對(duì)早孕、超早孕診斷起到積極的推動(dòng)作用。

4 其它檢查方法

鄭毛亮等采用血清酸滴定法進(jìn)行了早期妊娠診斷。在試驗(yàn)綿羊中，共檢出妊娠母羊1 128只，未妊娠羊189 只。與實(shí)際妊娠結(jié)果相比，妊娠符合率為89.88%(1 013/1 128) ，未孕符合率為96.83%(183/189) ，總符合率為90.81%(1 196/1 317)［13］。血清酸滴定法診斷時(shí)間早、方法簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確，可以用于綿羊的早孕診斷，極具實(shí)用性和推廣價(jià)值。

龐訓(xùn)勝等用“豬用妊娠診斷劑”進(jìn)行山羊早期妊娠診斷，檢出空懷準(zhǔn)確率為92%(P ＜0.01) ，檢出妊娠準(zhǔn)確率為30%，而分娩率和雙胎率分別低于對(duì)照組5.2% 和33.4%(P ＞0.05) 。綜合分析認(rèn)為，雌激素類(lèi)妊娠診斷劑不適合山羊早期妊娠診斷［14］。

總之，母羊早期妊娠診斷對(duì)于提高養(yǎng)羊生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益具有重要意義。早期妊娠診斷的方法很多，技術(shù)的要求也不同。對(duì)于采血、采尿等進(jìn)行妊娠診斷的方法，在應(yīng)用上有一定困難，而實(shí)驗(yàn)室診斷方法需要簡(jiǎn)化程序，開(kāi)發(fā)技術(shù)產(chǎn)品，從而逐步實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)診斷。B 型超聲波診斷雖然確診時(shí)間較晚些，但仍是目前較為實(shí)用一種診斷方法。如果有條件應(yīng)將不同的實(shí)用診斷方法配套使用，以相互印證，提高診斷的準(zhǔn)確性。

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