鱷魚資源開發(fā)和生物活性物質(zhì)研究進(jìn)展

李海航，羅嘉玲，倪 賀

(華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣東省植物發(fā)育生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州510631)

鱷魚屬脊索動物門、脊椎動物亞門、爬行綱、鱷目，共有3科 (鱷科 Crocodylidae、長吻鱷科或食魚鱷科 Gavialidae、鼉科或短吻鱷科 Alligatoridae)8屬，世界上尚存23種．除我國的揚(yáng)子鱷和北美洲的密西西比鱷生活在溫帶外，其他鱷魚都分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)．鱷魚為肉食性卵生脊椎類兩棲爬行動物，是兩億多年前與恐龍同時代的最古老兩棲爬行動物，也是迄今生存著的最原始動物之一．鱷魚因強(qiáng)盛的生命力而生存和繁衍至今，成為地球上最古老的生物“活化石”之一．鱷魚屬于瀕危野生保護(hù)動物，被國際上列為I類保護(hù)的瀕危野生動植物．我國特產(chǎn)的揚(yáng)子鱷 (亦稱中華鱷Alligator sinensis)被列為國家一級野生保護(hù)動物．2003年國家林業(yè)局批準(zhǔn)了尼羅鱷(Crocodylus niloticus)、灣鱷 (C．porosus)和暹羅鱷(俗稱泰國鱷，C．siamensis)等3種鱷魚列入首批54種可商業(yè)利用的野生動物［1］．

鱷魚全身都是寶，鱷魚皮可制作高級皮革、鱷魚肉有很高的營養(yǎng)價值和保健功能，鱷魚的其他組織器官也都有不同的醫(yī)藥保健功能和開發(fā)利用價值．我國古代的《本草綱目》記載，鱷魚為“土龍”，“主治心腹癥瘕、濕氣邪氣”．我國和一些東南亞國家自古有食用鱷魚肉治療咳嗽哮喘的傳統(tǒng)．鱷魚自身超強(qiáng)的免疫能力和抗病與逆境能力，引起了生物醫(yī)學(xué)界的廣泛興趣．鱷作為最古老的動物之一，也是研究生物進(jìn)化、繁衍瀕危動物和保護(hù)生態(tài)環(huán)境等的重要材料．鱷魚的高經(jīng)濟(jì)價值和重要的醫(yī)學(xué)與生物學(xué)研究價值，受到養(yǎng)殖業(yè)和學(xué)術(shù)界的廣泛重視．我國從1993年開始引進(jìn)外來鱷種和大量養(yǎng)殖，逐漸成為主要的鱷魚養(yǎng)殖、加工和消費(fèi)國之一．鱷魚血等各組織器官的抗菌和抗病毒及其活性成分等研究取得了重要的進(jìn)展．美國和澳大利亞等地的科學(xué)家成立了國際鱷魚基因組工作組(The International Crocodilian Genomes Working Group，ICGWG，http://crocgenomes．org)，研究測定美洲鱷、灣鱷和印度鱷(Gavialis gangeticus)3種鱷魚的全基因組序列［2］．本文主要介紹近年來在鱷魚養(yǎng)殖和鱷魚生物活性及其活性成分方面的研究進(jìn)展．

1 鱷魚血的功能與活性成分研究

中醫(yī)古書記載，鱷魚血具有消炎、清熱解毒、消腫瘤等功效，能治療咳嗽和哮喘等疾病，對肺癌和白血病有療效．東南亞國家將新鮮鱷魚血與淘洗后的大米混勻、蒸熟，做成滋補(bǔ)甘甜的熱帶小吃“鱷魚血米飯”．現(xiàn)代研究表明，鱷魚血有兩大顯著的功能特點(diǎn)．鱷魚全血、血紅蛋白、血清、血漿和白細(xì)胞有抗細(xì)菌、真菌、病毒和抗癌活性，有可能開發(fā)出抗金黃色葡萄球菌等抗藥性強(qiáng)的“超級病菌”的抗生素和抗艾滋病毒的藥物．另一個顯著功能特點(diǎn)是，鱷魚血紅蛋白的攜氧量是其他動物的100倍以上，血紅蛋白分子中與碳酸氫根離子結(jié)合的區(qū)域有特殊氨基酸序列，與碳酸氫鹽有很高的親和力．該區(qū)域在高二氧化碳條件下可發(fā)生獨(dú)特的變構(gòu)效應(yīng)，降低血紅蛋白對氧的親和力，釋放出所攜帶的氧氣．這是鱷魚能在水下屏氣1 h以上的原因［3-4］．鱷魚血紅蛋白的這一結(jié)構(gòu)和功能特性可用于設(shè)計(jì)改造和生產(chǎn)高攜氧活性的人工血紅蛋白［5］．

1．1 鱷魚血的抗菌、抗病毒和抗癌活性

(1)抗菌活性．研究表明，鱷魚血清有較強(qiáng)的抗菌、抗病毒和抗癌活性．Merchant等［6］報(bào)道，鱷魚和人血清都表現(xiàn)出時間和濃度依賴性的抑制大腸桿菌增殖的活性．鱷魚血清處理5 min后就表現(xiàn)出顯著的抗菌活性，20min抗菌活性達(dá)到最高．鱷魚血清的抑菌活性是人血清的10倍．而且，鱷魚血清可抑制所有測試細(xì)菌，而人血清只對35%的測試菌有抑制作用．Kommanee等［7］報(bào)道，暹羅鱷血漿對4株臨床分離菌(表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌、沙門氏菌、霍亂弧菌)和6株參考菌 (金黃色葡萄球菌、傷寒沙門氏菌、大腸桿菌、霍亂弧菌、銅綠假單胞菌、表皮葡萄球菌)都有顯著的抗菌活性．其中對3株參考菌(傷寒沙門菌、霍亂弧菌、表皮葡萄球菌)和2株臨床分離菌(傷寒沙門菌、霍亂弧菌)的抗菌活性最強(qiáng)．許東暉等［8］的研究也表明，鱷魚血漿對12種菌株中的8種有一定的抑菌作用．鱷魚血清也有類似的抗變形蟲的活性［9］．

(2)抗病毒活性．Merchant等［10］報(bào)道，野生美洲鱷魚血清有抗人類艾滋病毒HIV-I、抗西尼羅河病毒W(wǎng)NV和抗單純皰疹病毒HSV-1的活性．抑制這3種病毒50%活性所需要的血清濃度(IC50)分別為0．9%、4．3%和3．45%．而用于病毒活性分析的哺乳動物細(xì)胞50%活性所需要的血清濃度分別為32．8%(HIV-1)、36．3%(WNV)和 39．1%(HSV-1)．結(jié)果表明，鱷魚血清在較低濃度時對病毒有顯著的抑制作用，而對哺乳動物細(xì)胞的抑制作用很小．但高濃度的鱷魚血清也抑制哺乳動物細(xì)胞．

(3)抗癌活性．賡迪等［11］報(bào)道，人工養(yǎng)殖的暹羅鱷血清和血漿具有抗腫瘤作用．用鱷血清和血漿處理4種體外腫瘤細(xì)胞株和體內(nèi)移植性腫瘤S180荷瘤鼠，較高濃度的鱷魚血清和血漿對 HepG2、BGC823、HeLa細(xì)胞和SKOV3細(xì)胞增殖有抑制作用．鱷魚全血抑制荷瘤鼠腫瘤的生長，抑制率為57．55%，且能改善荷瘤小鼠的生存質(zhì)量．

1．2 鱷魚血清補(bǔ)體蛋白提高機(jī)體免疫和抗菌功能

鱷魚血清的抗菌［6］和抗 HIV-1 病毒［10］的活性對熱處理敏感，56℃高溫處理血清30 min，其抗菌活性喪失;溫度低于15℃時抗菌活性也顯著降低．表明鱷魚血清的抗菌活性物質(zhì)是蛋白成分，可能為活性的血清補(bǔ)體．但鱷魚血清抗WNV和抗HSV-1的活性則對熱處理不敏感，可能不是作為補(bǔ)體起作用的［10］．說明鱷魚血清中存在2種不同類型的抗菌活性成分．紅細(xì)胞的補(bǔ)體致敏可導(dǎo)致紅細(xì)胞破壞，改變紅細(xì)胞周圍的天然補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白水平可導(dǎo)致溶血［12］．Merchant等［13］用不同量的鱷魚血清與未經(jīng)抗體致敏的綿羊紅細(xì)胞共培養(yǎng)，可產(chǎn)生濃度依賴的溶血活性．用此方法測定鱷魚血清的補(bǔ)體活性．結(jié)果表明，鱷魚血清引起的綿羊紅細(xì)胞溶血活性不受經(jīng)典的補(bǔ)體級聯(lián)反應(yīng)滅活劑氫氧化胺和甲胺的影響，但被EDTA和水楊醛肟所抑制．表明鱷魚血清的溶血活性是通過替代途徑起作用的．電泳分析表明，鱷魚血清中含有抗原性類似于人類C3的蛋白;Western印跡分析在鱷魚血清中檢測到2種與人類C3α和C3β的分子量幾乎相同的蛋白．抗人C3抗體可使鱷魚血清的溶血活性和抗菌活性顯著降低．鱷魚血清引起的溶血活性在低于15℃和高于30℃時皆降低．該研究表明，鱷魚血清的抗菌活性部分地由于血清補(bǔ)體促進(jìn)的體液免疫應(yīng)答類似物．Aree等［14］表明，新鮮鱷魚血清、冷凍干燥的血清和冷凍干燥的全血都能增加小鼠巨噬細(xì)胞對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的吞噬作用，但冷凍干燥的全血較新鮮血清和冷凍干燥血清的作用?。{魚血清經(jīng)56℃熱處理30min后，這種活性喪失．該研究進(jìn)一步表明鱷魚血清中的補(bǔ)體蛋白在調(diào)節(jié)吞噬過程中起作用．鱷魚血清通過其蛋白補(bǔ)體的作用增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬活性，可作為替代藥物用于增強(qiáng)人體的免疫反應(yīng)．

Merchant等［15］發(fā)現(xiàn)，鱷魚血清的補(bǔ)體活性可被EDTA和其他二價金屬離子螯合劑(如磷酸鹽和檸檬酸鹽)所抑制．5 mM EDTA可完全抑制鱷魚血清的活性．EDTA對鱷魚血清活性的抑制作用可被外加5 mM Ca2+或 Mg2+完全恢復(fù)，但不能被 Cu2+、Ba2+或Fe2+所恢復(fù)．該結(jié)果表明，像人血清一樣，鱷魚血清補(bǔ)體的作用需要特殊的二價金屬離子Ca2+和/或Mg2+的存在．鱷魚血清的補(bǔ)體活性最適溫度為25～30℃，溫度低于25℃或高于35℃都使活性降低［16-17］．二價金屬離子對鱷魚血清補(bǔ)體活性的影響，在鱷血清與未致敏的綿羊紅細(xì)胞混合培養(yǎng)的溶血試驗(yàn)中也獲得了同樣的結(jié)果［17］．

1．3 鱷魚血中抗菌肽直接作用于細(xì)菌細(xì)胞膜

(1)血清/血漿．Preecharram 等［18］從泰國暹羅鱷血清中分離純化出6個抗多種微生物的抗菌肽(Hp14、Hp15、Hp17、Hp31、Hp36 和 Hp51)．MALDITOF-MS分析表明，Hp14、Hp15和 Hp51的分子量都小于1 kDa．掃描電鏡觀察表明，這些抗菌肽作用于細(xì)菌細(xì)胞膜．Preecharram等［19］從暹羅鱷血漿中分離和部分純化出1個抗菌化合物，命名為crocosin．質(zhì)譜分析表明，該抗菌活性物含m/z 94和136的重復(fù)單元，能穿透到細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中，干擾和破壞細(xì)胞膜．Kommanee等［7］報(bào)道，暹羅鱷血漿中的抗菌物質(zhì)可滲透到傷寒沙門菌的細(xì)胞質(zhì)中，干擾和破壞細(xì)菌膜，但對巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞RAW 264．7無毒性．

(2)白細(xì)胞．Merchant等［20］報(bào)道，野生美洲鱷白細(xì)胞酸性提取物中的1～10 kDa組分對8種Candida酵母菌中的6種有強(qiáng)抑制作用，對12種細(xì)菌中的10種有抑制作用，對人艾滋病毒HIV-1和單純皰疹病毒HSV-1有一定的抑制作用．抗真菌動力學(xué)分析表明，64%的真菌生長抑制作用發(fā)生在3 min內(nèi)．抗菌活性物質(zhì)對蛋白酶敏感、對溫度不敏感，表明活性物質(zhì)為陽離子多肽．Pata等［21］從泰國暹羅鱷的白血細(xì)胞提取物中分離出4個新的抗菌肽LeucrocinⅠ-Ⅳ．這些肽由7～10個不同氨基酸殘基組成，對葡萄球菌、傷寒桿菌和霍亂弧菌有很強(qiáng)的抗菌活性．Leucrocin I的氨基酸序列為 NGVQPKY，分子量806．99 Da;Leucrocin II的序列為 NAGSLLSGWG，分子量956．3 Da．熒光顯微鏡和電子顯微鏡觀察表明，這些抗菌肽都作用于細(xì)菌的細(xì)胞膜．溶血試驗(yàn)表明，Leucrocin I，III and IV對人紅血細(xì)胞的毒性比Leucrocin II?。甕araksa 等［22］根據(jù) Leucrocin I的序列，分別合成了由D-氨基酸和L-氨基酸組成的Leucrocin I，即D-NY15和L-NY15．分析了它們對球形芽孢桿菌TISTR 678、傷寒沙門氏菌ATCC 5784、大腸桿菌0157:H7和臨床分離的巨大芽孢桿菌、霍亂弧菌、傷寒沙門菌的抗菌活性．表明全部用D-氨基酸合成的Leucrocin I比相應(yīng)的L-氨基酸合成的對映體活性更高．L-NY15和D-NY15在溶菌濃度下對哺乳動物細(xì)胞無毒．Theansungnoen等［23］也從暹羅鱷白細(xì)胞提取物中分離出2個有強(qiáng)抗氧化活性的多肽，TDVLGLPAK(912．5 Da)和 DPNAALPAGPR(1 148．6 Da)，它們的 IC50 值分別為 153．4 μM 和95．7 μM．

(3)血紅蛋白．Srihongthong 等［24］報(bào)道，暹羅鱷血紅蛋白的α-和β亞基及其降解片段都有抗菌和抗氧化活性，活性由氨基酸殘基和結(jié)構(gòu)決定，與血紅素?zé)o關(guān)．研究者分離純化得到13個來源于α-球蛋白鏈和β-球蛋白鏈的活性肽片段．這些活性肽大部分是2條球蛋白鏈的N-末端和C-末端部分．活性肽通過對細(xì)胞膜的作用產(chǎn)生抗菌活性．Jandaruang等［25］表明，鱷魚血紅蛋白對熱不穩(wěn)定，65℃處理導(dǎo)致不可逆變性，但熱處理不影響其抗氧化活性;鱷魚血紅蛋白在pH 3．5～4．5時結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，過低或過高都導(dǎo)致抗氧化活性降低．Deepthi等［26］分離純化和結(jié)晶了鱷魚血紅蛋白，并測定了其晶體結(jié)構(gòu)．Anwised等［27］從暹羅鱷魚中克隆出編碼α-(141個氨基酸)和 β-(146個氨基酸)球蛋白的cDNA，并在大腸桿菌中表達(dá)出可與血紅素和氧結(jié)合的活性蛋白．

(4)鐵調(diào)素．鐵調(diào)素 (hepcidin)是在許多動物中發(fā)現(xiàn)的富含半胱氨酸的陽離子抗菌肽，在人類抗擊病原體感染中起著重要作用．Hao等［28］克隆出了暹羅鱷鐵調(diào)素(Cshepc)的cDNA．該基因編碼99個氨基酸的前鐵調(diào)素．與人類鐵調(diào)素相似，鱷魚鐵調(diào)素也含8個半胱氨酸組成的4對保守的二硫鍵．組織表達(dá)分析表明，Cshepc在鱷魚的肝、肌肉和心臟中有高的表達(dá)．重組表達(dá)的鱷魚鐵調(diào)素可顯著抑制革蘭氏陰性菌(大腸桿菌和單胞菌)和革蘭氏陽性菌(金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌)的生長．像人鐵調(diào)素一樣，鱷魚鐵調(diào)素作為先天免疫反應(yīng)在抗菌中發(fā)揮作用．

1．4 鱷魚血中的其他功能成分

鱷魚血液中還有豐富的超氧化物歧化酶(SOD)、磷脂酶A2(PLA2)和二肽基肽酶4(dipeptidyl peptidase IV，DPP4)．鱷血清分泌的磷脂酶A2(PLA2)在5 min內(nèi)就表現(xiàn)出顯著活性，20 min達(dá)到最高;低溫(5～10℃)和高溫30～40℃下酶活性都顯著降低;該酶活性可被特殊的PLA2分泌抑制劑所抑制［29］．Merchant等［30-31］表明，美洲鱷血清中高活性的二肽基肽酶4與細(xì)胞表面和可溶性CD26相連;酶活性對溫度敏感，在5～40℃范圍內(nèi)隨溫度升高而增加，可被DAPP4特異性抑制劑diprotin A所抑制．鱷魚血液中的這些酶可能與提高自身免疫反應(yīng)和釋放小分子抗菌肽有關(guān)．

2 鱷魚其他組織器官的功能研究

2．1 鱷魚肉

鱷魚肉是低脂肪、高蛋白、富含不飽和脂肪酸、礦物質(zhì)和維生素的高品質(zhì)肉類［32-35］．我國自夏商、周朝開始取鱷肉為食，其肉嫩味佳．研究表明，加工和食用鱷魚肉是安全的［36-37］．鱷魚肉能提高血液攜氧量，使咳嗽、哮喘患者肺氧交換量增加，改善機(jī)體缺氧癥狀等，具有補(bǔ)氣血和滋心潤肺等功效，對咳嗽、哮喘、風(fēng)濕和糖尿病有較好的治療效果．鱷魚肌肉含多不飽和脂肪酸，可防止心腦血管疾病等．鱷魚肉的蛋白酶解多肽有抗氧化、促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖、提高耐缺氧能力、減輕神經(jīng)細(xì)胞損傷和增強(qiáng)免疫力等功能［38-41］．

2．2 鱷魚油

鱷魚油含不飽和脂肪酸高達(dá)71．5%，其中主要為亞油酸和花生四稀酸．其脂肪酸組成有深海魚的特點(diǎn)，二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA，俗稱腦黃金)含量較高．本草綱目記載，鱷魚油脂主治皮膚病和惡瘡．現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)證明，鱷魚油有防凍傷、抗菌消炎、促進(jìn)血液循環(huán)、舒筋和消除疲勞的功能，已用于多種國際知名化妝品及防凍傷和消炎等保健產(chǎn)品．Buthelezi等［42］研究了尼羅鱷油的脂肪酸成分和抗菌與抗炎活性．從中鑒定了16種脂肪酸，其中以油酸、棕櫚酸和亞油酸為主要成分．鱷魚油抗細(xì)菌和抗真菌的最適濃度分別為15%和6%(重量/體積)．鱷魚油對細(xì)菌的抗性沒有顯著的菌種選擇性，但對白色念珠菌更敏感．抗炎實(shí)驗(yàn)表明，口服給藥(60．8±5．5%)時，3 h達(dá)到最佳活性;局部給藥(57．5±5．9%)時，12 h達(dá)到最佳活性．Li等［43］的研究表明，暹羅鱷油能增強(qiáng)皮膚燒傷面的愈合和減少大鼠瘢痕形成．鱷魚油促進(jìn)皮膚燒傷愈合可能與TGF-β1/Smad3信號途徑有關(guān)．

2．3 鱷魚膽汁

鱷魚膽含20多種膽汁酸和膽汁醇等．研究表明，鱷魚膽汁提取物［44］及其活性成分 ESC-3［45］能顯著抑制膽管癌細(xì)胞QBC939和人肝癌細(xì)胞SMMC-7721［46］的生長，處理的細(xì)胞停滯在G1期，并誘導(dǎo)癌細(xì)胞產(chǎn)生劑量依賴性的細(xì)胞凋亡．處理48 h的細(xì)胞表現(xiàn)出典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變．膽汁物處理下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)和上調(diào)Bax表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Bax對Bcl-2的比率增加;同時，與活性氧增加有關(guān)Survivin與c-Myc的表達(dá)降低、P53表達(dá)增加．研究者認(rèn)為，膽汁物可能通過線粒體途徑、破壞線粒體膜電位和提高活性氧含量來誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡．

2．4 鱷魚其他器官

鱷魚皮是優(yōu)質(zhì)高檔皮革原料，在國際上有很高的聲譽(yù)，可制作成皮衣、皮鞋、皮箱、皮帶和皮包等名貴用品和裝飾品．鱷魚皮含有大量膠原蛋白，有潤膚養(yǎng)顏和防治骨質(zhì)疏松等作用．鱷魚皮的酶解物有較強(qiáng)的抗氧化能力［47］．鱷魚骨有強(qiáng)筋健骨、填精益髓等功能，對風(fēng)濕骨痛有療效．鱷骨粉中含大量活性鈣和磷等，可防治老年骨質(zhì)疏松和嬰幼兒缺鈣等［48-49］．鱷魚掌和鱷魚甲富含膠原蛋白，有補(bǔ)腎固精和護(hù)膚養(yǎng)顏的功效，可增強(qiáng)皮膚彈性和消除皺紋．鱷魚肝有補(bǔ)腦、養(yǎng)肝、明目等功效，可治療老年性白內(nèi)障和視力減退等多種眼病、再生障礙性貧血和白血病等．鱷魚腎補(bǔ)腎益氣，可改善環(huán)境污染等造成的肺功能損害．鱷魚卵是卵磷脂含量最高的蛋類之一，有消除血管內(nèi)脂肪、保護(hù)肝和心臟、防止老年癡呆及動脈硬化等功效．Chui等［50］的研究表明，鱷魚卵提取物與野生人參和天然靈芝的混合物對大鼠急性髓性白血病的增殖有強(qiáng)抑制作用，高劑量處理時無急性毒性．鱷魚鞭有特效的壯陽作用，無任何副作用［51-52］．Shaharabany等［53］測定了多種生活在病源菌環(huán)境中的動物組織提取物的抗菌活性．發(fā)現(xiàn)鱷魚(C．niloticus)的肺和腎上腺組織提取物有一定的抗菌活性，但較烏鴉(Corvus corax)的胃、肺、肝和腸等提取物的活性低．如前所述，鱷魚鐵調(diào)素在肝、肌肉和心臟中有高的表達(dá)［28］．

3 鱷魚的馴養(yǎng)繁殖

在我國從事鱷魚的馴養(yǎng)繁殖必須申請“國家重點(diǎn)保護(hù)野生動物馴養(yǎng)繁殖許可證”．鱷魚繁殖能力強(qiáng)，飼養(yǎng)相對比較容易．近年來，隨著國際市場對鱷魚制品需求日益增長，人工鱷魚養(yǎng)殖迅速發(fā)展．我國在廣東、海南、福建、安徽、湖北、浙江和上海等地有100多家鱷類養(yǎng)殖單位，養(yǎng)殖數(shù)十萬尾鱷．鱷魚養(yǎng)殖的種類除尼羅鱷、灣鱷和暹羅鱷外，揚(yáng)子鱷、凱門鱷(Caiman crocodilus)、美洲鱷(C．a(chǎn)cutus)和密西西比鱷(Alligatormississipiensis)等也有養(yǎng)殖．泰國暹羅鱷為中型鱷，具有繁殖能力強(qiáng)、生長快、抗病力強(qiáng)和皮質(zhì)優(yōu)良等優(yōu)點(diǎn)，在泰國大量養(yǎng)殖，也是我國人工飼養(yǎng)量最多的鱷魚之一．灣鱷為大型鱷，長達(dá)5～6 m，質(zhì)量約1 t，最長的達(dá)7 m、質(zhì)量1．6 t，是現(xiàn)存最大的爬行動物．灣鱷分布于東南亞沿海到澳大利亞北部，可生活于海水中，適合于海灣或近海養(yǎng)殖．灣鱷生長快、皮質(zhì)好，適合于我國華南地區(qū)飼養(yǎng)．尼羅鱷是從南非引進(jìn)的大型鱷，生長快．我國特產(chǎn)的揚(yáng)子鱷是鱷類中分布緯度最北的一種，適合于長江流域、華南和西南地區(qū)飼養(yǎng)，但體型小，生長較慢［54］．

鱷魚以魚類和動物肉類為食物，也可用動物和魚類加工的內(nèi)臟等下腳料飼養(yǎng)．臺灣利用眼鏡鱷吞食死豬、胎衣及廢棄的家禽家畜內(nèi)臟等，為養(yǎng)豬戶處理動物廢棄物，消除畜牧業(yè)產(chǎn)生的環(huán)境污染［54］．鱷魚作為食用動物養(yǎng)殖，需在無污染的良好環(huán)境條件下養(yǎng)殖，食物以鮮活羅非魚、鱔等肉類為佳，禁用變質(zhì)或污染肉類食物［55］．鱷魚不耐寒，最適生長氣溫28～34℃、水溫不低于18℃．氣溫低于25℃、水溫低于15℃時停止進(jìn)食等活動［56］．鱷魚5～6月交配，7～8月產(chǎn)卵，經(jīng)過2～3個月孵化出幼鱷．10歲以上的母鱷每年產(chǎn)卵20～90個(一般40～60個)．母鱷產(chǎn)卵年限可達(dá)數(shù)十年至上百年．幼鱷的性別由卵孵化時的溫度決定，孵化的30～45天為熱敏期．28～31℃下孵化出的幼鱷全為雌性，32℃孵化出的幼鱷雄性率較高，可達(dá)66%，32～33℃下孵出的幼鱷全部為雄性．溫度低于26℃或高于34℃可導(dǎo)致卵死亡．母鱷將孵化巢建在向陽坡或低凹遮蔽處來控制孵化溫度和平衡后代性別比．

由于各地氣候和生態(tài)條件不同，鱷魚養(yǎng)殖品種差異較大，養(yǎng)殖技術(shù)還不很成熟，養(yǎng)殖周期較長，至少需要3～5年，有的需要養(yǎng)殖10年以上．而且，飼養(yǎng)鱷魚數(shù)量一般需要達(dá)到10萬條的規(guī)模，才能滿足現(xiàn)代化鱷皮和肉類加工廠的需求．因此，鱷類養(yǎng)殖被認(rèn)為是高投入、高風(fēng)險和高回報(bào)的產(chǎn)業(yè)，需要強(qiáng)大的資金支持．

4 問題與展望

鱷魚作為地球上最古老的生物之一，具有很高的研究價值．鱷魚皮的高工業(yè)利用價值、鱷魚肉的高營養(yǎng)與保健價值及鱷魚血等組織器官的醫(yī)藥開發(fā)價值，使鱷魚成為高經(jīng)濟(jì)價值的養(yǎng)殖動物．此外，鱷魚有強(qiáng)大的自身免疫系統(tǒng)［57］，很少得病和死亡．鱷魚還有非常強(qiáng)盛的消化和吸收系統(tǒng)，鱷魚能全部消化和吸收食物中的有機(jī)物，其排泄物為石灰樣的白色無機(jī)物粉末、無有機(jī)物殘留、無臭味．因此，鱷魚養(yǎng)殖場與其他動物養(yǎng)殖場不同，無氣味和排泄物污染．眾多的特點(diǎn)使鱷魚成為熱門養(yǎng)殖動物．

鱷魚養(yǎng)殖方面的研究較少，特別是鱷魚養(yǎng)殖飼料和營養(yǎng)等方面的研究．由于鱷魚的生長周期較長，目前可用于加工的鱷魚資源不多．鱷魚的規(guī)?；庸ず唾Y源綜合開發(fā)利用等還停留在初步研究階段．盡管已有許多關(guān)于鱷魚或其提取物的抗菌、抗病毒和抗腫瘤等研究，但迄今國際上還沒有成功開發(fā)出有效的以鱷魚為原料的治療藥物．鱷魚的抗菌活性成分及其活性大小等還需要進(jìn)一步研究，這些活性成分在哺乳動物或人體內(nèi)的作用效果等還未見報(bào)道．將鱷魚血等開發(fā)成有明確治療效果的藥物還需要大量的研究．

［1］國家林業(yè)局．林護(hù)法2003第121號文件:商業(yè)性經(jīng)營利用馴養(yǎng)繁殖技術(shù)成熟的陸生野生動物名單［Z］．2003．

［2］St John JA，Braun E L，Isberg SR，et al．Sequencing three crocodilian genomes to illuminate the evolution of archosaurs and amniotes［J］．Genome Biology，2012，13:415．

［3］Bauer C，Jelkmann W．Carbon dioxide governs the oxygen affinity of crocodile blood［J］．Nature，1977，269(5631):825-827．

［4］Perutz M F，Bauer C，Gros G，et al．Allosteric regulation of crocodilian haemoglobin［J］．Nature，1981，291(5817):682-684．

［5］Komiyama N H，Miyazaki G，Tame J，et al．Transplanting a unique allosteric effect from crocodile into human haemoglobin［J］．Nature，1995，373(6511):244-246．

［6］MerchantM E，Roche C，Elsey RM，et al．Antibacterial properties of serum from the American alligator(Alligator mississippiensis)［J］．Comparative Biochemistry and Physiology:Part B，2003，136(3):505-513．

［7］Kommanee J，Preecharram S，Daduang S，et al．Antibacterial activity of plasma from crocodile(Crocodylus siamensis)against pathogenic bacteria［J］．Annals of Clinical Microbiology and Antimicrobials，2012，11:22．

［8］許東暉，馬海萍，梅雪婷，等．鱷魚血漿體外抗菌實(shí)驗(yàn)研究［J］．中國海洋藥物，2008，27(1):33-39．Xu D H，Ma H P，Mei X T，etal．Study on antibacterial effects of crocodil ian plasma in vitro［J］．Chinese Journal of Marine Drugs，2008，27(1):33-39．

［9］MerchantM E，Thibodeaux D，Loubser K，et al．Amoebacidal effects of serum from the American alligator(Alligator mississippiensis)［J］．Journal of Parasitology，2004，90(6):1480-1483．

［10］Merchant M E，Pallansch M，Paulman R L，et al．Antiviral activity of serum from the American alligator(Alligator mississippiensis)［J］．Antiviral Research，2005，66(1):35-38．

［11］賡迪，段玉龍，徐曉琳，等．人工養(yǎng)殖暹羅鱷血體內(nèi)、外抗腫瘤活性研究［J］．中藥材，2012，35(12):1901-1904．Geng D，Duan Y L，Xu X L，etal．Anticancer activity of Crocodylus siamensis blood in vitro and in vivo［J］．Journal of Chinese MedicinalMaterials，2012，35(12):1901-1904．

［12］Yazdanbakhsh K．Controlling the complement system for prevention of red cell destruction［J］．Current Opinion in Hematology，2005，12(2):117-122．

［13］MerchantM E，Roche CM，Thibodeaux D，etal．Identification of alternative pathway serum complement activity in the blood of the American alligator(Alligator mississippiensis)［J］．Comparative Biochemistry and Physiology:Part B，2005，141(3):281-288．

［14］Aree K，Siruntawineti J，Chaeychomsri W．Crocodylus siamensis serum and macrophage phagocytic activity［J］．Journal of the Medical Association of Thailand，2011，94(Suppl 7):S131-138．

［15］Merchant M E，Verret B，Elsey R M．Role of divalent metal ions in serum complement activity of the American alligator(Alligator mississippiensis)［J］．Comparative Biochemistry and Physiology:Part B，2005，141(3):289-293．

［16］Merchant M，Britton A．Characterization of serum complement activity of saltwater(Crocodylus porosus)and freshwater(Crocodylus johnstoni)crocodiles［J］．Comparative Biochemistry and Physiology:Part A，2006，143(4):488-493．

［17］Merchant M，McFatter J，Mead S，et al．Identification and characterization of serum complement activity in the American crocodile(Crocodylus acutus)［J］．Veterinary Immunology and Immunopathology，2010，133(2/3/4):165-169．

［18］Preecharram S，Daduang S，Bunyatratchata W，et al．Antibacterial activity from Siamese crocodile(Crocodylus siamensis)serum［J］．African Journal of Biotechnology，2008，7(17):3121-3128．

［19］Preecharram S，Jearranaiprepame P，Daduang S，et al．Isolation and characterisation of crocosin，an antibacterial compound from crocodile(Crocodylus siamensis)plasma［J］．Journal of Animal Science，2010，81:393-401．

［20］MerchantM E，Leger N，Jerkins E，et al．Broad spectrum antimicrobial activity of leukocyte extracts from the American alligator(Alligatormississippiensis)［J］．Veterinary Immunology and Immunopathology，2006，110(3/4):221-228．

［21］Pata S，Yaraksa N，Daduang S，etal．Characterization of the novel antibacterial peptide Leucrocin from crocodile(Crocodylus siamensis)white blood cell extracts［J］．Developmental and Comparative Immunology，2011，35(5):545-553．

［22］Yaraksa N，Anunthawan T，The ansungnoen T，etal．Design and synthesis of cationic antibacterial peptide based on Leucrocin Isequence，antibacterial peptide from crocodile(Crocodylus siamensis)white blood cell extracts［J］．Journal of Antibiotics(Tokyo)，2013，doi:10．1038/ja．2013．114．

［23］Theansungnoen T，Yaraksa N，Daduang S，et al．Purification and characterization of antioxidant peptides from leukocyte extract of Crocodylus siamensis［J］．Protein Journal，2014，33(1):24-31．

［24］Srihongthong S，Pakdeesuwan A，Daduang S，et al．Complete amino acid sequence of globin chains and biological activity of fragmented crocodile hemoglobin(Crocodylus siamensis)［J］．Protein Journal，2012，31(6):466-476．

［25］Jandaruang J，Siritapetawee J，Thumanu K，et al．The effects of temperature and pH on secondary structure and antioxidant activity of Crocodylus siamensis hemoglobin［J］．Protein Journal，2012，31(1):43-50．

［26］Deepthi S，Johnson A，Sathish R，et al．Purification，crystallisation and preliminary X-ray study of haemoglobin from Crocodilis palustris and Crocodilis porosus［J］．Biochimica et Biophysica Acta，2000，1480(1/2):384-387．

［27］Anwised P，Kabbua T，Temsiripong T，et al．Molecular cloning and expression ofα-globin and β-globin genes from crocodile(Crocodylus siamensis)［J］．Protein Journal，2013，32(3):172-182．

［28］Hao J，Li YW，Xie M Q，et al．Molecular cloning，recombinant expression and antibacterial activity analysis of hepcidin from Simensis crocodile(Crocodylus siamensis)［J］．Comparative Biochemistry and Physiology:Part B，2012，163:309-315．

［29］Merchant M，Heard R，Monroe C．Characterization of phospholipase A(2)activity in serum of the American alligator(Alligator mississippiensis)［J］．Journal of experimental zoology:Part A，2009，311(9):662-666．

［30］Merchant M，Monroe C，F(xiàn)alconi R．Dipeptidyl peptidase IV activity in the blood of the American alligator(Alligator mississippiensis)［J］．Comparative Biochemistry and Physiology:Part B，2009，154(3):341-345．

［31］Merchant M，Mead S，McAdon C，et al．Identification and characterization of dipeptidyl peptidase IV enzyme activity in the American crocodile(Crocodylusacutus)［J］．Veterinary Immunology and Immunopathology，2010，136(1/2):28-33．

［32］Staton M A，Edwards JR H M，Brisbin JR IL，etal．Essential fatty acid nutrition of the American alligator(Alligatormississippiensis)［J］．Journal of Nutrition，1990，120(7):674-685．

［33］Vicente N J，Bressan M C，Rodrigues E C，et al．Physichist chymistry evaluation of swampland alligator meat(Caiman yacare Daudin 1802)of different ages［J］．Ciência e Agrotecnologia，2007，31(5):1430-1434．

［34］盧涵，陳孫福，羅永康．鱷魚肉主要營養(yǎng)成分及與其他畜禽肉的比較［J］．肉類研究，2012，26(7):25-28．Lu H，Chen S F，Luo Y K．Comparison ofmajor nutritional components of crocodile，livestock and poultry meats［J］．Meat Research，2012，26(7):25-28．

［35］闕婷婷，謝妍，鄭家聞，等．暹羅鱷肌肉營養(yǎng)及腥味成分分析［J］．浙江大學(xué)學(xué)報(bào):農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版，2013，39(2):122-132．Que T T，Xie Y，Zheng JW，etal．Analysis of nutritional and odor components inmuscle of Siam alligator(Crocodylus siamensis)［J］．Journal of Zhejiang University:Agriculture and Life Sciences，2013，39(2):122-132．

［36］Huchzermeyer F W．Public health risks of ostrich and crocodilemeat［J］．Revue Scientifique et Technique(International Office of Epizootics)，1997，16(2):599-604．

［37］Millan JM，Purdie JL，Melville L F．Public health risks of the flesh of farmed crocodiles［J］．Revue Scientifique et Technique(International Office of Epizootics)，1997，16(2):605-608．

［38］盧涵，李雪，陳孫福，等．鱷魚肉蛋白酶解產(chǎn)物抗氧化性的研究［J］．中國食物與營養(yǎng)，2012，18(9):63-65．Lu H，Li X，Chen S F，et al．Antioxidant activities of hydrolysates derived from crocodile meat［J］．Food and Nutrition in China，2012，18(9):63-65．

［39］賡迪，胡宇馳，李耀武，等．人工養(yǎng)殖鱷魚肉提取物增強(qiáng)免疫活性研究［J］．首都醫(yī)藥，2010(10):57-58．

［40］莊嚴(yán)，宗桂珍，王平，等．人工養(yǎng)殖鱷魚肉提取物耐缺氧及抗脂質(zhì)過氧化的實(shí)驗(yàn)研究［J］．中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2011，9(22):144-145．

［41］湯四榮，周靖宇，吳松青．鱷魚肉提取物增強(qiáng)免疫力的實(shí)驗(yàn)研究［J］．中國醫(yī)藥指南，2012，10(30):456-458．

［42］Buthelezi S，Southway C，Govinden U，et al．An investigation of the antimicrobial and anti-inflammatory activities of crocodile oil［J］．Journal of Ethnophar macology，2012，143(1):325-330．

［43］Li H L，Chen L P，Hu Y H，et al．Crocodile oil enhances cutaneous burn wound healing and reduces scar formation in rats［J］．Academic Emergency Medicine，2012，19(3):265-273．

［44］Kang JH，ZhangW Q，SongW，et al．Apoptosis mechanism of human cholangiocarcinoma cells induced by bile extract from crocodile［J］．Applied Biochemistry and Biotechnology，2012，166(4):942-951．

［45］Song W，Shen D Y，Kang JH，et al．Apoptosis of hu-man cholangiocarcinoma cells induced by ESC-3 from Crocodylus siamensis bile［J］．World Journal of Gastroenterology，2012，18(7):704-711．

［46］Song W，Li SS，Qiu PP，et al．Apoptosis induced by aqueous extracts of crocodile bile in human heptacarcinoma SMMC-7721［J］．Applied Biochemistry and Biotechnology，2013，170(1):15-24．

［47］周亞迪，陳孫福，包玉龍，等．鱷魚皮酶解產(chǎn)物功能特性及抗氧化活性［J］．肉類研究，2012，26(12):1-4．Zhou Y D，Chen SF，Bao Y L，etal．Functional properties and antioxidant activity of protein hydrolysates from crocodile skin［J］．Meat Research，2012，26(12):1-4．

［48］李輝，彭芳，張華明，等．鱷魚骨膠對小鼠應(yīng)激功能及造血機(jī)能的影響［J］．中國海洋藥物，2000(6):14-17．Li H，Peng F，Zhang H M，et al．Effects of crocodile bone gelation on stress reaction and blood-forming function inmice［J］．Chinese Journal of Marine Drugs，2000(6):14-17．

［49］范鴻冰，陳孫福，洪惠，等．鱷魚骨雙酶酶解產(chǎn)物的功能特性及其抗氧化活性［J］．食品與發(fā)酵工業(yè)，2012，38(12):78-82．Fan H B，Chen SF，Hong H．Functional properties and antioxidant activity of crocodile bone protein hydrolysates digested by two enzymes［J］．Food and Fermentation Industries，2012，38(12):78-82．

［50］Chui C H，Wong R S，Cheng G Y，et al．Antiproliferative ability of a combination regimen of crocodile egg extract，wild radix ginseng and natural Ganoderma lucidum on acute myelogenous leukemia［J］．Oncology Reports，2006，16(6):1313-1316．

［51］許東暉，馬海萍，梅雪婷，等．鱷魚的活性物質(zhì)及其藥理作用、保健功效研究進(jìn)展［J］．中國海洋藥物，2007，26(6):44-47．

［52］肖琨，王錫昌．養(yǎng)殖鱷魚的營養(yǎng)價值和藥用功能研究進(jìn)展［J/OL］．(2013-12-17)［2014-01-30］．食品工業(yè)科技，http://www．cnki．net/kcms/detail/11．1759．TS．20131217．0856．001．html．Xiao K，Wang X C．The edible，medicinal value and the research in development and utilization of the farmed crocodile［J/OL］．(2013-12-17)［2014-01-30］．Science and Technology of Food Industry，http://www．cnki．net/kcms/detail/11．1759．TS．20131217．0856．001．html．

［53］Shaharabany M，Gollop N，Ravin S，et al．Naturally occurring antibacterial activities of avian and crocodile tissues［J］．Journal of Antimicrobial Chemotherapy，1999，44:416-418．

［54］張廷軍．我國鱷魚的種類及開發(fā)現(xiàn)狀［N］．中國特產(chǎn)報(bào)，2001-11-15(3)．

［55］陳獻(xiàn)君，許金旺，陳海峰．鱷魚健康養(yǎng)殖技術(shù)研究［J］．中國水產(chǎn)，2005(9):87-89．

［56］陳獻(xiàn)君，許金旺，馮丹龍，等．不同溫度條件下鱷魚生長情況分析探討［J］．中國水產(chǎn)，2006(2):84-85．

［57］Cheng G，Gao Y，Wang T，et al．Extensive diversification of IgH subclass-encoding genes and IgM subclass switching in crocodilians［J］．Nature Communications，2013，4:Art1337．