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    近紅外光譜技術(shù)測(cè)定花生蛋白質(zhì)含量研究

    2014-03-27 08:13:04金華麗李琳琳
    關(guān)鍵詞:定標(biāo)乘法花生

    金華麗,李琳琳

    (河南工業(yè)大學(xué) 糧油食品學(xué)院,河南 鄭州 450001)

    0 引言

    花生是一種高蛋白的植物性食物,蛋白質(zhì)含量在20%左右.花生中的蛋白質(zhì)包含了人體必需的8 種氨基酸,極易被吸收,消化系數(shù)可達(dá)90%.作為我國(guó)具有明顯競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的出口創(chuàng)匯農(nóng)產(chǎn)品,花生的蛋白質(zhì)含量也成為出口質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的一項(xiàng)重要評(píng)定指標(biāo).蛋白質(zhì)含量的傳統(tǒng)測(cè)定方法是凱氏定氮法,該方法雖然測(cè)定準(zhǔn)確性高,但必須破壞籽粒,且操作復(fù)雜,耗時(shí)長(zhǎng),不適合用于花生品質(zhì)的準(zhǔn)確快速檢測(cè).

    近紅外光譜分析技術(shù)(Near Infrared Spectroscopy,NIRS)是近年來(lái)迅速發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)高效、快速的檢測(cè)技術(shù).它利用含氫基團(tuán)X—H 振動(dòng)的倍頻和合頻在近紅外譜區(qū)的吸收[1],可以測(cè)定樣品中水分、蛋白質(zhì)、脂肪等成分[2-4]的含量.與傳統(tǒng)的化學(xué)分析方法相比,近紅外光譜技術(shù)具有無(wú)損、快速、多組分同時(shí)測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)[5],廣泛應(yīng)用于小麥[6]、玉米[7]、大米[8]等農(nóng)產(chǎn)品的硬度、蛋白質(zhì)、粗脂肪等的測(cè)定.禹山林等[9]用傅立葉變換近紅外漫反射光譜儀對(duì)花生進(jìn)行光譜采集,采用偏最小二乘法的回歸技術(shù)建立花生蛋白質(zhì)含量的測(cè)定模型.本試驗(yàn)建立了基于Infratec 1241 型近紅外谷物分析儀的花生蛋白質(zhì)含量的測(cè)定模型,比較不同回歸技術(shù)、光譜和數(shù)學(xué)處理方法對(duì)模型的影響,建立最優(yōu)模型,實(shí)現(xiàn)對(duì)花生種子蛋白質(zhì)含量的快速無(wú)損檢測(cè),也為其他谷物蛋白質(zhì)含量的測(cè)定提供依據(jù).

    1 材料與方法

    1.1 材料

    從全國(guó)不同地區(qū)收集不同品種的花生樣品共65 份.

    1.2 儀器與設(shè)備

    Infratec 1241 型近紅外谷物分析儀:FOSS 公司;FW80 型高速萬(wàn)能粉碎機(jī):北京中興偉業(yè)儀器有限公司.

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定

    蛋白質(zhì)含量的測(cè)定按照GB 5009.5—2010,用凱氏定氮法測(cè)定花生中的蛋白質(zhì)含量,每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3 次,取平均值作為樣品蛋白質(zhì)含量的最終值.

    1.3.2 近紅外光譜數(shù)據(jù)的采集

    近紅外谷物分析儀開機(jī)預(yù)熱30 min,對(duì)采集到的65 個(gè)花生樣品分別進(jìn)行光譜掃描,光譜波長(zhǎng)范圍為570~1 098 nm,每隔2 nm 采集一次光譜.樣品光程設(shè)為30 nm,子樣品數(shù)設(shè)為10,為消除樣品粒度、均勻性不一致引起的差異,每個(gè)樣品連續(xù)掃描2 次.

    1.3.3 樣品集的劃分

    選取1—55 號(hào)樣品作為定標(biāo)集,用于定標(biāo)模型的建立,56—65 號(hào)樣品作為驗(yàn)證集,用于模型可行性的評(píng)價(jià).

    1.3.4 近紅外光譜定標(biāo)模型的建立

    利用軟件自帶的WINISI 定標(biāo)軟件,對(duì)選取的定標(biāo)集樣品進(jìn)行預(yù)處理,剔除異常樣品,剩余樣品進(jìn)行建模,選擇合適的建模參數(shù),建立最佳花生蛋白質(zhì)含量的檢測(cè)模型.

    1.3.5 近紅外光譜定標(biāo)模型的驗(yàn)證

    用外部驗(yàn)證法評(píng)價(jià)定標(biāo)模型的可行性,即比較驗(yàn)證集樣品的模型預(yù)測(cè)值與真實(shí)值的相關(guān)性,通過相關(guān)系數(shù)(RSQ)的大小評(píng)價(jià)定標(biāo)模型的好壞.

    2 結(jié)果與分析

    2.1 花生蛋白質(zhì)含量的化學(xué)測(cè)定值

    用國(guó)標(biāo)方法測(cè)定的花生蛋白質(zhì)含量見表1.

    由表1 可知,花生蛋白質(zhì)含量的最大值為23.37%,最小值為17.74%,平均值為19.82%,數(shù)據(jù)分布較均勻,基本覆蓋了花生蛋白質(zhì)的含量值,其中作為定標(biāo)集的55 個(gè)樣品的蛋白質(zhì)含量包含了最大值和最小值,因此,選取的花生樣品符合近紅外建模的要求.

    2.2 花生樣品的近紅外掃描光譜圖

    對(duì)65 個(gè)具有完整籽粒的花生樣品進(jìn)行光譜掃描,每個(gè)樣品得到20 條譜線,對(duì)其進(jìn)行平均處理,得到65 個(gè)樣品的掃描光譜,見圖1.各樣品的光譜曲線趨勢(shì)基本相同,但又不完全相同,顯示了不同樣品間的差異.

    表1 花生蛋白質(zhì)含量的化學(xué)測(cè)定值 %

    圖1 樣品近紅外掃描光譜

    2.3 花生蛋白質(zhì)含量近紅外測(cè)定模型的建立

    用WINISI 軟件對(duì)選取的定標(biāo)集樣品進(jìn)行超常樣品剔除后,對(duì)剩余樣品用不同的回歸技術(shù)做光譜處理和數(shù)學(xué)處理,比較不同回歸技術(shù)及光譜和數(shù)學(xué)處理方法對(duì)模型的影響,選擇最優(yōu)參數(shù)建立花生蛋白質(zhì)含量測(cè)定的最佳模型.衡量模型優(yōu)劣的主要參數(shù)為定標(biāo)相關(guān)系數(shù)(RSQ)、定標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)偏差(SEC)、交叉驗(yàn)證相關(guān)系數(shù)(1-VR)、交叉驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)偏差(SECV).

    2.3.1 光譜和數(shù)學(xué)處理參數(shù)的選擇

    在建模過程中,不同的光譜和數(shù)學(xué)處理方法對(duì)模型的優(yōu)劣有很大影響.本試驗(yàn)討論了無(wú)散射處理(None)、標(biāo)準(zhǔn)正常化結(jié)合散射處理(SNV and Detrend)標(biāo)準(zhǔn)正?;幚恚⊿NV)、去散射處理(Detrend Only)、多元離散校正(MSC)5 種光譜處理方法和“1,4,4,1”(一階導(dǎo)數(shù)處理,導(dǎo)數(shù)處理采用光譜間隔點(diǎn)為4 nm,一次平滑處理光譜間隔點(diǎn)4 nm,不做二次平滑處理)、“2,4,4,1”、“3,4,4,1”、“4,4,4,1”4 種數(shù)學(xué)處理方法對(duì)模型的影響.不同處理方法得到的定標(biāo)方程參數(shù)見表2.

    表2 不同處理方法得到的蛋白質(zhì)含量定標(biāo)參數(shù)

    由表2 可知,選用標(biāo)準(zhǔn)正?;Y(jié)合散射處理(SNV and Detrend)的光譜處理方法和“2,4,4,1”的數(shù)學(xué)處理方法得到的定標(biāo)方程的SEC 值和SECV 值最低,分別為0.228 1 和0.311 9,而RSQ值和1-VR 值最高,分別為0.926 9 和0.911 7.因此,選取這兩種處理方法建立的模型會(huì)取得較好的效果.

    2.3.2 回歸技術(shù)的選擇

    由以上討論得到的最優(yōu)參數(shù),在SNV and Detrend 和“2,4,4,1”的處理?xiàng)l件下,采用主成分分析法(PCR),改進(jìn)最小二乘法(Modified PLS)和最小二乘法(PLS)3 種回歸技術(shù)分別對(duì)光譜進(jìn)行處理,得到的定標(biāo)方程參數(shù)見表3.

    表3 采用不同回歸技術(shù)得到的定標(biāo)方程參數(shù)

    由表3 可知,采用改進(jìn)最小二乘法(Modified PLS)進(jìn)行回歸分析得到的RSQ 和1-VR 最大,同時(shí)SEC 和SECV 也最小.因此,建立花生蛋白質(zhì)含量近紅外測(cè)定模型的最佳回歸技術(shù)是改進(jìn)最小二乘法.

    綜上,選用SNV and Detrend 和“2,4,4,1”的處理方法,用改進(jìn)最小二乘法做回歸分析得到花生蛋白質(zhì)含量的近紅外測(cè)定模型.

    2.4 模型的驗(yàn)證

    評(píng)定一個(gè)模型的好壞除了看自身的RSQ 和SEC 外,還需用未參與建模的樣品進(jìn)行驗(yàn)證,通過比較驗(yàn)證集的模型預(yù)測(cè)值和化學(xué)方法測(cè)定的真實(shí)值之間的相關(guān)性來(lái)評(píng)價(jià)模型的可行性.本試驗(yàn)用驗(yàn)證集的10 個(gè)樣品對(duì)建立的模型進(jìn)行驗(yàn)證,驗(yàn)證集樣品的模型預(yù)測(cè)值和化學(xué)測(cè)定值見表4.

    驗(yàn)證集樣品的模型預(yù)測(cè)值和化學(xué)測(cè)定值間的回歸方程為y=0.923 9x+1.522 2,相關(guān)系數(shù)R2為0.919 7,說(shuō)明模型具有很好的預(yù)測(cè)能力,用近紅外光譜技術(shù)建立的花生蛋白質(zhì)含量的測(cè)定模型是可行的.

    表4 花生蛋白質(zhì)化學(xué)測(cè)定值和模型預(yù)測(cè)值 %

    3 結(jié)論

    本試驗(yàn)運(yùn)用近紅外光譜技術(shù)建立了花生蛋白質(zhì)含量的近紅外測(cè)定模型,并通過外部驗(yàn)證評(píng)價(jià)了模型的優(yōu)劣.采用的最佳建模參數(shù)為:標(biāo)準(zhǔn)正?;Y(jié)合散射處理(SNV and Detrend)的光譜處理方法和“2,4,4,1”的數(shù)學(xué)處理方法,用改進(jìn)最小二乘法做回歸分析.得到的定標(biāo)方程的定標(biāo)相關(guān)系數(shù)為0.926 9,定標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.228 1,交叉驗(yàn)證相關(guān)系數(shù)為0.911 7,交叉檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)偏差平均值為0.311 9,經(jīng)外部驗(yàn)證得到的相關(guān)系數(shù)為0.919 7.結(jié)果表明,花生蛋白質(zhì)含量的近紅外預(yù)測(cè)值與化學(xué)測(cè)定值之間有很好的相關(guān)性,近紅外光譜技術(shù)可以作為測(cè)定花生蛋白質(zhì)含量的一種方法,用于花生蛋白質(zhì)含量的快速檢測(cè)中.

    [1]孫穎.近紅外光譜分析技術(shù)及應(yīng)用進(jìn)展[J].山東化工,2010,39(2):24-26,30.

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