藏藥革葉兔耳草揮發(fā)油的化學(xué)成分研究

劉 娜，周樹婭，尹艷清，趙雪秋,楊麗娟

(云南民族大學(xué) 民族藥資源化學(xué)國家民委-教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500)

革葉兔耳草(Lagotisalutacea)系玄參科(Scrophulariaceae)兔耳草屬(Lagotis)多年生草本植物，藏藥名為“洪連”，為藏藥中上品藥物，主要分布于青海﹑西藏、甘肅、云南等地[1].其全草入藥，具退熱﹑降血壓、調(diào)經(jīng)解毒之功效.用于治療肝膽病、高熱、煩渴、腸痧、炭疽、瘡毒、傷筋等癥[2].目前，藏醫(yī)用云南兔耳草主治各種類型的肝炎，有較好的療效.近年來，已有文獻(xiàn)對(duì)兔耳草屬植物的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其中主要成分為黃酮﹑環(huán)烯醚萜苷、苯丙素苷及有機(jī)酸類化合物[3-6].研究顯示藏藥革葉兔耳草的粗提物具有抗氧化活性[7].革葉兔耳草的化學(xué)成分及揮發(fā)油成分研究至今未見報(bào)道.本研究用水蒸氣蒸餾法提取革葉兔耳草的揮發(fā)油，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法，對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了分析，從揮發(fā)油中分離出約70個(gè)峰，經(jīng)分析鑒定了其中59種成分，用面積歸一法測(cè)定各種成分的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)，所鑒定成分占總峰面積的82.38%.

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與材料

Trace 1 310 型氣相色譜與ISQ單四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀.氣相色譜條件：石英毛細(xì)管柱TG-5MS，30 m×0.25 mm，膜厚0.25 μm.載氣為氦氣，分流比60∶1，柱前壓40 kPa，柱流量0.8 mL/min，進(jìn)樣口溫度250 ℃，接口溫度250 ℃，進(jìn)樣量1 μL. 升溫程序：從40 ℃開始以3 ℃/min升到10 ℃，保持1 min，然后4 ℃/min升到180 ℃，保持1 min，再以5 ℃/min升到250 ℃，保持4 min；質(zhì)譜條件：離子源溫度250 ℃，電離方式EI，電子能量70 eV，掃描質(zhì)量范圍30～500m/z.

革葉兔耳草(Lagotisalutacea)全草于2009年11月采于云南香格里拉，樣品經(jīng)云南民族大學(xué)楊青松副教授鑒定.

1.2 提取方法

革葉兔耳草干燥全草粉碎5.0 kg，于室溫下用95%的工業(yè)乙醇浸泡，合并提取液，過濾，減壓濃縮得到乙醇浸膏，然后用石油醚萃取，回收石油醚，石油醚萃取物加入乙醚溶解，再加入蒸餾水進(jìn)行水蒸氣蒸餾，收集餾出液；用無水乙醚萃取3次，合并乙醚萃取液，回收乙醚；用無水硫酸鈉干燥24 h，得到淺黃色油狀物，具有特殊芳香氣味，密封保存.

2 結(jié)果與分析

2.1 革葉兔耳草中揮發(fā)油成分的總離子流圖

革葉兔耳草中揮發(fā)油成分的總離子流圖如圖1.

經(jīng)計(jì)算機(jī)質(zhì)譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索(NIST MS Search 2.0)，從云南產(chǎn)的革葉兔耳草揮發(fā)油中總共鑒定了59個(gè)成分，其相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)占總峰面積的82.38%，主要成分及其在揮發(fā)油中含量見表1.

2.2 對(duì)革葉兔耳草揮發(fā)油的化學(xué)組分進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜分析

表1 革葉兔耳草揮發(fā)油的化學(xué)成分分析結(jié)果

續(xù)表

序號(hào)t/min分子式相對(duì)分子質(zhì)量化合物相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%611.72C8H16O1283-羥基-1-庚烯0.13711.93C12H16O6256苯基-β-D-葡萄糖苷0.05812.07C9H121201,2,5-三甲基苯0.05912.27C8H16O128正辛醛0.041012.71C6H12O2116正庚酸0.701113.64C8H16O8240l-Gala-l-ido-octose0.131215.05C8H16O1282-辛烯-1醇0.171315.71C16H30O224011-環(huán)戊基十一酸0.061416.1C9H18O142壬醛0.351518.04C9H16O140鳶尾醛0.551618.78C9H10O1341-(3-甲基苯基)乙酮0.151719.22C9H16O21562-乙基丁酸烯丙酯0.071819.73C10H20O2172辛酸乙酯0.481919.93C9H14O138(E,E)-2,4-壬二烯醛0.362020.44C8H13NO1392 - 氧雜-6 - 氮雜三環(huán)[3.3.1.1(3,7)]癸烷0.142120.61C9H16O21564-氧代壬醛0.822221.28C14H25F3O22823-三氟乙酸基十二碳烷0.452321.73C10H18O154(E)-2-癸烯醛0.852422.61C9H16O31722-羥基環(huán)己甲酸乙酯 0.392522.83C21H38O23222′-己基-[1,1′-二環(huán)]-2-辛酸甲酯0.242623.06C10H16O31841,4-過氧化-2,3-環(huán)氧驅(qū)蛔萜0.172723.21C20H40O2312(Z)-2-(9-十八碳烯基氧基)-乙醇0.172823.51C10H16O1522,4-癸二烯醛1.462923.8C9H16O1404,4,6-三甲基-2-環(huán)己烯-1-醇3.643024.54C11H20O21845-庚基-2(3H)呋喃酮0.293126.04C11H22O2186壬酸乙酯1.773227.17C9H10O3166香草乙酮2.273327.83C12H22O11342β-D-乳糖苷0.533428.17C9H10O3166藜蘆醛3.173528.39C18H34O22824-辛烯酸乙酯0.703629.08C10H14O1502-(2-丁烯基)-環(huán)己酮0.433729.29C11H20O32009-氧代壬酸乙酯8.693829.77C11H16O2180(R)-5,6,7,7a-四氫-4,4,7a-三甲基-2(4H)-苯并呋喃酮0.633930.22C12H20O4228愈傷酸1.024031.92C11H20O32009-氧代癸酸甲酯0.624132.68C12H11N169二苯胺5.214232.94C17H36O2562-甲基-1-十六烷醇0.404333.24C19H40268十九碳烷0.594433.90C28H48O4002-甲烯基-3-羥基膽甾烷0.474534.80C12H22O2198乙酸香茅酯1.744636.03C19H40268十九碳烷1.704738.23C16H32O2256肉豆蔻酸乙酯2.64

續(xù)表

序號(hào)t/min分子式相對(duì)分子質(zhì)量化合物相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%4838.84C17H362402,6,10-三甲基-十四碳烷1.124939.64C18H36O268 植酮4.505040.40C18H34O2282油酸4.545140.90C17H34O2270十五酸乙酯1.625241.68C13H16O42363,4-二甲基肉桂酸乙酯1.005342.71C18H34O2282棕櫚油酸乙酯0.615443.31C18H36O2284棕櫚酸乙酯20.835543.77C18H36O268十八碳醛1.185645.41C19H38O2298珠光脂酸乙酯0.545746.65C20H36O2308亞油酸乙酯9.215846.81C20H38O2310油酸乙酯4.005947.39C20H40O2312硬脂酸乙酯1.49

3 討論

從分析結(jié)果可以看出藏藥革葉兔耳草揮發(fā)油中主要成分為棕櫚酸乙酯(20.83%) ﹑亞油酸乙酯(9.21%)﹑9-氧代壬酸乙酯(8.69%)﹑二苯胺(5.21%)﹑肉豆蔻酸乙酯(2.64%)﹑正己烷(3.73%)﹑藜蘆醛(3.17%)﹑4,4,6-三甲基-2-環(huán)己烯-1-醇(3.64%)﹑油酸(4.54%)﹑植酮(4.50%)﹑香草乙酮(2.27%)﹑油酸乙酯(4.00%)﹑硬脂酸乙酯(1.49%)﹑壬酸乙酯(1.77%)﹑十九碳烷(1.70%)﹑乙酸香茅酯(1.74%)等.其中最主要成分是棕櫚酸乙酯，該成分呈微弱蠟香、果爵和奶油香氣，用做食品添加劑﹑食用香料﹑香精以及有機(jī)合成等；另外，揮發(fā)油中的亞油酸乙酯是人體必需脂肪酸之一，它直接影響著動(dòng)物的生長和繁殖能力，亞油酸及亞油酸乙酯具有降低血清膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇的作用.在醫(yī)療方面，亞油酸及其衍生物主要用作預(yù)防和治療動(dòng)脈硬化等疾病的藥物[8]；9-氧代壬酸乙酯具有強(qiáng)烈的葡萄香氣、玫瑰香氣、果香和酒香，用做食用香料、香精.此外，植酮是合成維生素E醋酸酯的中間體；愈傷酸與凝膠多糖聯(lián)合具有愈合創(chuàng)傷活性，因此它是一種治療外傷不留傷痕的理想藥品.從化合物類型來看，革葉兔耳草的揮發(fā)油中，主要有單萜和倍半萜類化合物，其具有多方面的生物活性，并且是某些中藥的主要有效成分.

氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)集成了色譜和結(jié)構(gòu)鑒定的光譜手段之優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于中藥研究領(lǐng)域，特別是對(duì)揮發(fā)油成分的分析研究[9-10].本研究通過GC-MS聯(lián)用技術(shù)對(duì)革葉兔耳草揮發(fā)油含量和有效成分的分析評(píng)價(jià)，對(duì)開發(fā)利用革葉兔耳草資源在創(chuàng)制中成藥新品種，天然香料及綜合利用等方面提供了科學(xué)依據(jù).

參考文獻(xiàn):

[1] 全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編[M].3版. 北京: 人民衛(wèi)生出版社，2009.

[2] 云南省藥材公司. 云南中藥資源名錄[M].北京: 科學(xué)出版社, 1993.

[3] 郗峰, 鄧君, 王彥涵, 等. 藏藥短管兔耳草的化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志, 2010, 35(7) : 869-871.

[4] 羊曉東, 趙靜峰, 任海英, 等. 藏藥云南兔耳草的化學(xué)成分研究(I)[J].云南大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版, 2003, 25(2) : 141-143.

[5] 楊麗娟, 羊曉東, 李良. 藏藥云南兔耳草的化學(xué)成分研究[J].中藥材,2005, 28(9) : 767-768.

[6] 楊麗娟, 羊曉東, 趙靜峰, 等. 藏藥云南兔耳草的化學(xué)成分研究(II)[J].中藥材，2006, 29(2) : 128-130.

[7] 張娜, 周樹婭, 尹艷清, 等. 藏藥革葉兔耳草粗提物的抗氧化活性研究[J].云南民族大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版, 2012, 22(1) : 5-9.

[8] 吳建良, 郝聰俐, 宋曉華, 等. 藥用亞油酸乙酯的研制[J].浙江化工, 2004, 35(5) : 5.

[9] 楊秀嶺, 張?zhí)m桐, 袁志芳. 色譜聯(lián)用技術(shù)在中藥研究領(lǐng)域的應(yīng)用[J].中國藥房, 2006, 17(1): 63.

[10] 吳玫涵, 聶凌云. 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在我國中藥研究中的應(yīng)用[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào), 2002, 18 (2): 34.