Th細(xì)胞變化與肺癌骨轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究

張 波，傅祖紅，胡振紅

(廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院呼吸內(nèi)科，武漢 430070)

骨骼是肺部腫瘤轉(zhuǎn)移的好發(fā)部位，由于原發(fā)肺癌的部位和病理類型各不相同，其肺癌骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生率也不同[1]。臨床上發(fā)生骨轉(zhuǎn)移患者的病灶以多發(fā)為主，病程通常已經(jīng)發(fā)展為中晚期，因此常規(guī)的腫瘤放化療療效差，隨著以細(xì)胞和細(xì)胞因子為核心的免疫治療技術(shù)的加速發(fā)展，免疫治療為這類患者的痊愈帶來了新的可能。而腫瘤免疫治療的核心就是Th淋巴細(xì)胞[2]。本研究主要分析經(jīng)病理證實(shí)的94例肺癌患者的Th細(xì)胞變化與肺癌骨轉(zhuǎn)移的關(guān)系。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2011年1月至2014年1月廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院經(jīng)病理證實(shí)的肺癌患者94例作為試驗(yàn)組，男72例、女22例，年齡23～65(45.7±7.8)歲。其中腫瘤未轉(zhuǎn)移患者53例，其中接受化療者25例，尚未化療者28 例；腫瘤轉(zhuǎn)移患者41例，其中接受化療者23例，尚未化療者18 例。在發(fā)生轉(zhuǎn)移并化療者中,先化療后轉(zhuǎn)移者5例,先轉(zhuǎn)移后化療者18例，所有骨轉(zhuǎn)移患者作全身骨放射性核素掃描、磁共振成像、X線平片以確診疾病。來自本院的80例健康志愿者作為正常對照組，男65例、女15例，年齡20～71(46.2±8.3歲)。

1.2儀器及相關(guān)細(xì)胞分析軟件 流式細(xì)胞儀為FACS- Calibur(美國BD公司產(chǎn)品)，氬離子激光器功率為15 mW，激發(fā)光波長為488 nm。用BD公司提供的Cellquest軟件程序獲取細(xì)胞和分析淋巴細(xì)胞中CD25+和CD3+/ CD4+細(xì)胞的百分率。每份樣品分別獲取2×104個(gè)細(xì)胞。

1.3方法 采集受檢者靜脈血1 mL，肝素抗凝，取抗凝全血100 μL，加入10 μL單克隆抗體帶熒光標(biāo)記試劑(CD25-FITC或CD4-FITC/CD8-PE/CY5PE)，在室溫下反應(yīng)30 min，然后加入2 mL溶血?jiǎng)? min后離心去上清液，再加0.15～1.0 mL磷酸緩沖鹽溶液液稀釋，混勻后上機(jī)檢測并分析CD25+細(xì)胞百分率或CD3+/ CD4+細(xì)胞百分率。同時(shí)設(shè)定陰性同型對照，樣品在染色后6 h內(nèi)檢測完畢。單克隆抗體熒光試劑及同型對照試劑均采用蘇州生物基因技術(shù)有限公司的試劑。

2 結(jié) 果

2.1肺癌轉(zhuǎn)移對CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率的影響 各組CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，組間兩兩比較結(jié)果顯示：轉(zhuǎn)移組CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率顯著低于正常對照組(均P<0.05)，未轉(zhuǎn)移組CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率顯著低于正常對照組(均P<0.05)，轉(zhuǎn)移組CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率顯著低于未轉(zhuǎn)移組(P<0.05)(表1)。

表1 各組CD25+和CD3+/ CD4+細(xì)胞檢出率比較

組別例數(shù)CD25+細(xì)胞CD3+ /CD4+細(xì)胞試驗(yàn)組 轉(zhuǎn)移者 417.69±4.95ab22.32±7.15ab 未轉(zhuǎn)移者5311.16±6.58a30.56±9.02a正常對照組8013.27±5.1536.42±8.93F13.57636.936P0.0000.000

a：與正常對照組比較，P<0.05；b：與未轉(zhuǎn)移者比較，P<0.05

2.2化療對肺癌患者CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞檢出率的影響 各組CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，組間兩兩比較結(jié)果顯示：轉(zhuǎn)移化療組CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞檢出率高于轉(zhuǎn)移未化療組(均P<0.05)，未轉(zhuǎn)移化療組CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞檢出率高于未轉(zhuǎn)移未化療組(均P<0.05)，轉(zhuǎn)移化療組CD25+細(xì)胞檢出率低于未轉(zhuǎn)移化療組(P<0.05)(表2)。

2.3肺癌骨轉(zhuǎn)移患者的化療順序與CD25+和CD3+/ CD4+細(xì)胞變化的關(guān)系 肺癌化療后骨轉(zhuǎn)移者在血細(xì)胞中CD25+和CD3+/ CD4+細(xì)胞百分率均低于轉(zhuǎn)移后化療患者(P<0.05)(表3)。

表2 化療對患者CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞檢出率的影響

治療情況例數(shù)CD25+細(xì)胞CD3+ /CD4+細(xì)胞轉(zhuǎn)移化療者 2310.45±4.97a32.85±6.92a轉(zhuǎn)移未化療者 185.38±3.02b26.24±6.33b未轉(zhuǎn)移化療者 2515.74±5.94c38.47±5.54c未轉(zhuǎn)移未化療者286.65±2.80d24.73±6.06dF25.97325.743P0.0000.000

a與b、c與d、a與c比較，均P<0.05

表3 化療后轉(zhuǎn)移和轉(zhuǎn)移后化療者CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞比較

治療情況例數(shù)CD25+細(xì)胞CD3+ /CD4+細(xì)胞化療后轉(zhuǎn)移者55.83±1.2625.72±8.39轉(zhuǎn)移后化療者1810.95±5.3734.18±7.81t2.0832.445P0.0250.012

3 討 論

肺癌是我國發(fā)病率和病死率增長最快的惡性腫瘤之一，對人們的健康和生命具有很大的威脅[3]。肺癌的轉(zhuǎn)移最常發(fā)生在骨骼，而肺癌骨轉(zhuǎn)移是患者預(yù)后不良的主要因素，大部分肺癌患者的骨轉(zhuǎn)移發(fā)生在確診后1.5～2.5年內(nèi)發(fā)生。據(jù)研究顯示，肺癌骨轉(zhuǎn)移發(fā)生率與原發(fā)癌病理類型有密切聯(lián)系，骨轉(zhuǎn)移發(fā)生率最高的病理類型為腺癌，其次為小細(xì)胞肺癌和鱗癌[4]。

機(jī)體免疫系統(tǒng)分為細(xì)胞免疫和體液免疫，它們共同監(jiān)視腫瘤細(xì)胞發(fā)生、轉(zhuǎn)移[5]。細(xì)胞免疫在腫瘤的免疫監(jiān)視中占主體地位，而細(xì)胞惡性腫瘤患者存在免疫逃逸機(jī)制，由于機(jī)體免疫監(jiān)視功能不能及時(shí)徹底清除突變細(xì)胞，或者突變細(xì)胞可以躲避宿主的監(jiān)視功能，那么經(jīng)過一定生長慢慢變成腫瘤。而腫瘤術(shù)后的轉(zhuǎn)移可能是機(jī)體的抗腫瘤免疫功能降低所致[6-8]。細(xì)胞免疫應(yīng)答的關(guān)鍵環(huán)節(jié)就是Th淋巴細(xì)胞亞群間接對腫瘤局部微環(huán)境的調(diào)節(jié)作用，其作用體現(xiàn)為Th淋巴細(xì)胞亞群通過分泌細(xì)胞因子調(diào)節(jié)殺傷性T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞等活性，起到對腫瘤細(xì)胞監(jiān)視及殺傷作用，少數(shù)可直接殺傷腫瘤細(xì)胞[9-10]。而肺癌患者中Th淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯減少，生理活性減弱，不能充分發(fā)揮其免疫作用。同時(shí),肺癌是否發(fā)生轉(zhuǎn)移以及化療與否都對Th淋巴細(xì)胞的數(shù)量及活性有著一定影響。

本研究結(jié)果提示，無論是否轉(zhuǎn)移，肺癌患者CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率均較對照組有顯著降低。骨轉(zhuǎn)移組CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率低于未轉(zhuǎn)移組?；煂τ诜伟┗颊叩腃D25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率也有一定影響，化療者CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率較未化療者均有明顯提高?；燀樞?qū)Ψ伟┕寝D(zhuǎn)移患者也有一定的影響，肺癌化療后骨轉(zhuǎn)移者血細(xì)胞CD25+和CD3+/CD4+細(xì)胞百分率均顯著低于轉(zhuǎn)移后化療患者，尤其是CD25+細(xì)胞降低更顯著。

綜上所述，肺癌骨轉(zhuǎn)移患者機(jī)體Th細(xì)胞百分率降低，機(jī)體的免疫功能受到抑制，而化療可以有效恢復(fù)Th細(xì)胞百分率，化療順序也對其有一定影響。

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