T-spot.TB在克羅恩病和腸結(jié)核鑒別診斷中的價值

何 敏，荀安營，賴廣順，吳慧華，鄒 兵，吳子剛

(北京大學(xué)深圳醫(yī)院消化內(nèi)科,廣東 深圳 518000)

克羅恩病是發(fā)生于消化道的慢性肉芽腫性炎癥，以末段回腸及其鄰近結(jié)腸發(fā)病多見，腸結(jié)核是由結(jié)核桿菌在腸道引起的慢性特異性感染，以回盲部多見?？肆_恩病與腸結(jié)核的臨床、影像、內(nèi)鏡及病理表現(xiàn)均十分相似[1]，但治療、預(yù)后和轉(zhuǎn)歸存在很大差異，兩種疾病的鑒別診斷一直是消化科醫(yī)師的難題，結(jié)核桿菌T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)(T-cell spot of tuberculosis test，T-spot.TB)在結(jié)核病的鑒別診斷中具有較高的價值[2-3]，但其用于克羅恩病與腸結(jié)核鑒別診斷國內(nèi)研究不多，本研究通過分析兩種疾病患者T-spot.TB和其他實(shí)驗(yàn)室檢查情況，探討T-spot.TB在克羅恩病與腸結(jié)核的鑒別診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2010年1月至2012年8月在北京大學(xué)深圳醫(yī)院消化內(nèi)科診治的37例ITB和35例克羅恩病患者作為研究對象，腸結(jié)核患者中男21例、女16例，年齡11～68(34.5±6.7)歲；克羅恩病患者男17例、女18例，年齡13～71(36.7±7.2)歲，兩組患者性別及年齡構(gòu)成差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)?？肆_恩病的診斷參照中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)分會炎癥性腸病協(xié)作組制訂的《中國炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識意見》[4]，并且治療隨訪超過12個月，符合克羅恩病的自然發(fā)展規(guī)律，并且經(jīng)病理學(xué)診斷為克羅恩病，手術(shù)標(biāo)本病變組織無干酪樣壞死。腸結(jié)核診斷參照文獻(xiàn)[5]，并且內(nèi)鏡或手術(shù)切除病變組織可見干酪樣肉芽腫，正規(guī)抗結(jié)核治療半年以上，臨床及內(nèi)鏡檢查痊愈，治療后9個月以上無復(fù)發(fā)。兩組患者均能夠排除惡性腫瘤、女性生殖系統(tǒng)病變、腎衰竭、肺炎及肝硬化等病變。

1.2檢測方法

1.2.1T-spot.TB 按照T-spot.TB試劑盒(購自英國Oxford Immunotec 公司，批號：J2918D6)操作說明書進(jìn)行，應(yīng)用肝素抗凝試管采集外周靜脈血8 mL，密度梯度離心法分離外周血單核淋巴細(xì)胞，將陽性對照植物血凝素、陰性對照細(xì)胞培養(yǎng)液及結(jié)核桿菌特異性A抗原和B抗原分別加入已包被抗干擾素γ抗體的微量板中，然后在每孔加入外周靜脈血單核細(xì)胞2.5×105個，置于37 ℃恒溫箱內(nèi)孵育16～20 h，取出進(jìn)行磷酸鹽緩沖液洗脫4次，加入抗干擾素γ抗體在4 ℃恒溫下孵育2 h，再次磷酸鹽緩沖液洗脫后顯色，磷酸鹽緩沖液 終止反應(yīng)。在放大鏡下進(jìn)行斑點(diǎn)數(shù)閱讀和人工計(jì)數(shù)。陽性評判標(biāo)準(zhǔn)：測量孔點(diǎn)數(shù)是陰性對照孔的2倍以上或者較陰性對照多 6個斑點(diǎn)。

1.2.2糖類抗原125測定 采集清晨空腹靜脈血，采用快速發(fā)光免疫分析法檢測，儀器選用美國雅培公司生產(chǎn)AXSYM型全自動快速發(fā)光免疫分析儀及配套試劑。嚴(yán)格按試劑說明書進(jìn)行操作，以糖類抗原125(CA125)>35 kU/L為陽性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 19.0版本統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)數(shù)資料以例(%)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

T-spot.TB、血CA125檢測陽性率腸結(jié)核組均顯著高于克羅恩病組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而紅細(xì)胞沉降率增快率、C反應(yīng)蛋白升高率、便潛血陽性率、結(jié)明三項(xiàng)陽性率、結(jié)核菌素試驗(yàn)陽性率及抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體陽性率組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。T-spot.TB檢測陽性中腸結(jié)核為34例，克羅恩病為3例，T-spot.TB檢測陰性中腸結(jié)核為3例，克羅恩病為32例，CA125檢測陽性中腸結(jié)核為29例，克羅恩病為8例，CA125檢測陰性中腸結(jié)核為9例，克羅恩病為32例，以病理檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，T-spot.TB鑒別克羅恩病和腸結(jié)核的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值均高于血CA125檢測(表2)。

表1 兩組患者實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)比較 [例(%)]

表2 T-spot.TB、血CA125檢測鑒別 克羅恩病和腸結(jié)核的價值 (%)

3 討 論

克羅恩病是西方經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)國家常見的消化系統(tǒng)疾病，近年來隨著工業(yè)化的發(fā)展和生活環(huán)境的變化，我國克羅恩病的發(fā)病率也有所上升，腸結(jié)核在我國發(fā)病率較高，與克羅恩病臨床表現(xiàn)酷似，且有部分重疊，兩者的鑒別診斷多年來是消化科臨床的難題，而鑒別診斷對于治療方案的選擇有重要意義，如果將克羅恩病誤診為腸結(jié)核，將使患者承受不必要的抗結(jié)核治療，并且可延遲克羅恩病的正確治療；而將腸結(jié)核誤診為克羅恩病，激素、免疫抑制劑甚至生物制劑的應(yīng)用會加重克羅恩病患者的病情[6]。結(jié)核菌的病原學(xué)診斷是鑒別克羅恩病和腸結(jié)核的金標(biāo)準(zhǔn)，但標(biāo)本中的細(xì)菌數(shù)量對檢測結(jié)果的影響較大，并且結(jié)核桿菌培養(yǎng)周期較長，不利于早期診斷[7]，本研究T-spot.TB和血CA125檢測陽性率在兩種疾病患者中的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)，兩種檢測方式均有助于克羅恩病和腸結(jié)核的鑒別。

結(jié)核桿菌的染色體上存在著一段名為RD1的基因序列，而在T-spot.TB中，感染結(jié)核桿菌患者外周靜脈血T細(xì)胞可被RD1編碼抗原活化而分泌干擾素γ，干擾素γ與微孔板上的相應(yīng)抗體結(jié)合而顯色為色素斑點(diǎn)，據(jù)此可對結(jié)核感染做出診斷[7]。T-spot.TB作為一種新的結(jié)核檢測手段對結(jié)核桿菌感染具有較高的敏感性和特異性，近年來開始應(yīng)用于克羅恩病和腸結(jié)核的鑒別。雷少妮等[7]的研究對T-spot.TB 鑒別克羅恩病和腸結(jié)核的價值進(jìn)行了探討，靈敏度、特異度分別為93.3% 、85.7%，并認(rèn)為T-spot.TB檢測有助于克羅恩病和ITB的鑒別。Beom 等[8]的研究也證實(shí)了T-spot.TB在克羅恩病和腸結(jié)核中的鑒別價值，其診斷腸結(jié)核的靈敏度為67%，特異度達(dá)到90%，陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值也分別達(dá)到87%和73%。本研究結(jié)果顯示T-spot.TB鑒別克羅恩病和腸結(jié)核的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為91.9%、91.4%、91.7%、91.9%、91.4%，與雷少妮等[7]的結(jié)果一致，高于Beom等[8]的研究，可能與研究對象所處不同地區(qū)和不同生活環(huán)境有關(guān)。

CA125是一種高分子量糖蛋白，在結(jié)核病的診斷和鑒別診斷中有較高的價值，也有學(xué)者將其用于克羅恩病和腸結(jié)核的鑒別診斷，腸結(jié)核患者多合并肺部活動性結(jié)核，CA125主要是胸膜、腹膜間皮細(xì)胞或支氣管黏膜上皮細(xì)胞在結(jié)核炎性刺激下產(chǎn)生的[9]。本研究結(jié)果顯示腸結(jié)核患者血CA125的陽性率顯著高于克羅恩病患者，提示血CA125檢測對于克羅恩病和腸結(jié)核的鑒別有一定價值，但靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為78.4%、74.2%、76.3%、76.4%，均低于T-spot.TB檢測，提示其診斷價值低于T-spot.TB，可能的原因?yàn)椴糠諭TB患者未合并腸外結(jié)核，難以產(chǎn)生大量CA125，造成敏感性降低，而克羅恩病嚴(yán)重時也可存在透壁性炎癥，刺激腸道漿膜的間皮細(xì)胞分泌CA125，導(dǎo)致其血液中水平升高，降低了血CA125在檢測腸結(jié)核中的特異性。

綜上所述，T-spot.TB方便快捷，敏感性和特異性高，在克羅恩病和腸結(jié)核的鑒別診斷中具有重要價值，但T-spot.TB也存在著較小的假陽性率，如結(jié)合血CA125及其他檢測方式，更有利于兩者的鑒別。

[1] 黃鑫，廖旺娣，朱萱. 回結(jié)腸克羅恩病與腸結(jié)核鑒別診斷研究進(jìn)展[J].中國實(shí)用內(nèi)科雜志,2013,33(4):318-321.

[2] 努爾阿米娜·鐵力瓦爾迪，黎靜. 結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價值[J].新疆醫(yī)學(xué),2013,43(8):36-38.

[3] 徐凌,邊巍,顧杰,等.CA125 在肺結(jié)核與社區(qū)獲得性肺炎中的鑒別診斷價值[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2013,29(8):1276-1277.

[4] 中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)分會炎癥性腸病協(xié)作組.中國炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識意見[J].中華內(nèi)科學(xué)雜志,2008,47 (1):73-79.

[5] 何瑤,陳瑜君,楊紅,等.回結(jié)腸克羅恩病與腸結(jié)核臨床及內(nèi)鏡特征比較[J].中華消化內(nèi)鏡雜志,2012,29(6):325-328.

[6] 陳瑜君,何瑤,陳白莉,等.PCR法檢測結(jié)核分枝桿菌DNA在鑒別克羅恩病與腸結(jié)核中的價值[J].中國病理生理雜志,2013,29(1):188-192.

[7] 雷少妮,劉家云,梁潔,等.結(jié)核桿菌T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在克羅恩病與腸結(jié)核鑒別診斷中的應(yīng)用價值[J].中華消化雜志,2011,31(10):677-680.

[8] Beom J K,Yong SC,Byung IJ,et al.Prospective evaluation of the clinical utility of interferon-γ assay in the differential diagnosis of intestinal tuberculosis and Crohn′s disease[J]. Inflamm Bowel Dis,2011,17(6) : 1308-1313.

[9] 喻研,但自力.血CA125 在腸結(jié)核和克羅恩病中的鑒別診斷價值[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2011,27(24):4489-4491.