何 敏,荀安營,賴廣順,吳慧華,鄒 兵,吳子剛
(北京大學(xué)深圳醫(yī)院消化內(nèi)科,廣東 深圳 518000)
克羅恩病是發(fā)生于消化道的慢性肉芽腫性炎癥,以末段回腸及其鄰近結(jié)腸發(fā)病多見,腸結(jié)核是由結(jié)核桿菌在腸道引起的慢性特異性感染,以回盲部多見??肆_恩病與腸結(jié)核的臨床、影像、內(nèi)鏡及病理表現(xiàn)均十分相似[1],但治療、預(yù)后和轉(zhuǎn)歸存在很大差異,兩種疾病的鑒別診斷一直是消化科醫(yī)師的難題,結(jié)核桿菌T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)(T-cell spot of tuberculosis test,T-spot.TB)在結(jié)核病的鑒別診斷中具有較高的價值[2-3],但其用于克羅恩病與腸結(jié)核鑒別診斷國內(nèi)研究不多,本研究通過分析兩種疾病患者T-spot.TB和其他實(shí)驗(yàn)室檢查情況,探討T-spot.TB在克羅恩病與腸結(jié)核的鑒別診斷價值。
1.1一般資料 選擇2010年1月至2012年8月在北京大學(xué)深圳醫(yī)院消化內(nèi)科診治的37例ITB和35例克羅恩病患者作為研究對象,腸結(jié)核患者中男21例、女16例,年齡11~68(34.5±6.7)歲;克羅恩病患者男17例、女18例,年齡13~71(36.7±7.2)歲,兩組患者性別及年齡構(gòu)成差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)??肆_恩病的診斷參照中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)分會炎癥性腸病協(xié)作組制訂的《中國炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識意見》[4],并且治療隨訪超過12個月,符合克羅恩病的自然發(fā)展規(guī)律,并且經(jīng)病理學(xué)診斷為克羅恩病,手術(shù)標(biāo)本病變組織無干酪樣壞死。腸結(jié)核診斷參照文獻(xiàn)[5],并且內(nèi)鏡或手術(shù)切除病變組織可見干酪樣肉芽腫,正規(guī)抗結(jié)核治療半年以上,臨床及內(nèi)鏡檢查痊愈,治療后9個月以上無復(fù)發(fā)。兩組患者均能夠排除惡性腫瘤、女性生殖系統(tǒng)病變、腎衰竭、肺炎及肝硬化等病變。
1.2檢測方法
1.2.1T-spot.TB 按照T-spot.TB試劑盒(購自英國Oxford Immunotec 公司,批號:J2918D6)操作說明書進(jìn)行,應(yīng)用肝素抗凝試管采集外周靜脈血8 mL,密度梯度離心法分離外周血單核淋巴細(xì)胞,將陽性對照植物血凝素、陰性對照細(xì)胞培養(yǎng)液及結(jié)核桿菌特異性A抗原和B抗原分別加入已包被抗干擾素γ抗體的微量板中,然后在每孔加入外周靜脈血單核細(xì)胞2.5×105個,置于37 ℃恒溫箱內(nèi)孵育16~20 h,取出進(jìn)行磷酸鹽緩沖液洗脫4次,加入抗干擾素γ抗體在4 ℃恒溫下孵育2 h,再次磷酸鹽緩沖液洗脫后顯色,磷酸鹽緩沖液 終止反應(yīng)。在放大鏡下進(jìn)行斑點(diǎn)數(shù)閱讀和人工計(jì)數(shù)。陽性評判標(biāo)準(zhǔn):測量孔點(diǎn)數(shù)是陰性對照孔的2倍以上或者較陰性對照多 6個斑點(diǎn)。
1.2.2糖類抗原125測定 采集清晨空腹靜脈血,采用快速發(fā)光免疫分析法檢測,儀器選用美國雅培公司生產(chǎn)AXSYM型全自動快速發(fā)光免疫分析儀及配套試劑。嚴(yán)格按試劑說明書進(jìn)行操作,以糖類抗原125(CA125)>35 kU/L為陽性。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 19.0版本統(tǒng)計(jì)軟件分析,計(jì)數(shù)資料以例(%)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
T-spot.TB、血CA125檢測陽性率腸結(jié)核組均顯著高于克羅恩病組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),而紅細(xì)胞沉降率增快率、C反應(yīng)蛋白升高率、便潛血陽性率、結(jié)明三項(xiàng)陽性率、結(jié)核菌素試驗(yàn)陽性率及抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體陽性率組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。T-spot.TB檢測陽性中腸結(jié)核為34例,克羅恩病為3例,T-spot.TB檢測陰性中腸結(jié)核為3例,克羅恩病為32例,CA125檢測陽性中腸結(jié)核為29例,克羅恩病為8例,CA125檢測陰性中腸結(jié)核為9例,克羅恩病為32例,以病理檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn),T-spot.TB鑒別克羅恩病和腸結(jié)核的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值均高于血CA125檢測(表2)。
表1 兩組患者實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)比較 [例(%)]
表2 T-spot.TB、血CA125檢測鑒別 克羅恩病和腸結(jié)核的價值 (%)
克羅恩病是西方經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)國家常見的消化系統(tǒng)疾病,近年來隨著工業(yè)化的發(fā)展和生活環(huán)境的變化,我國克羅恩病的發(fā)病率也有所上升,腸結(jié)核在我國發(fā)病率較高,與克羅恩病臨床表現(xiàn)酷似,且有部分重疊,兩者的鑒別診斷多年來是消化科臨床的難題,而鑒別診斷對于治療方案的選擇有重要意義,如果將克羅恩病誤診為腸結(jié)核,將使患者承受不必要的抗結(jié)核治療,并且可延遲克羅恩病的正確治療;而將腸結(jié)核誤診為克羅恩病,激素、免疫抑制劑甚至生物制劑的應(yīng)用會加重克羅恩病患者的病情[6]。結(jié)核菌的病原學(xué)診斷是鑒別克羅恩病和腸結(jié)核的金標(biāo)準(zhǔn),但標(biāo)本中的細(xì)菌數(shù)量對檢測結(jié)果的影響較大,并且結(jié)核桿菌培養(yǎng)周期較長,不利于早期診斷[7],本研究T-spot.TB和血CA125檢測陽性率在兩種疾病患者中的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000),兩種檢測方式均有助于克羅恩病和腸結(jié)核的鑒別。
結(jié)核桿菌的染色體上存在著一段名為RD1的基因序列,而在T-spot.TB中,感染結(jié)核桿菌患者外周靜脈血T細(xì)胞可被RD1編碼抗原活化而分泌干擾素γ,干擾素γ與微孔板上的相應(yīng)抗體結(jié)合而顯色為色素斑點(diǎn),據(jù)此可對結(jié)核感染做出診斷[7]。T-spot.TB作為一種新的結(jié)核檢測手段對結(jié)核桿菌感染具有較高的敏感性和特異性,近年來開始應(yīng)用于克羅恩病和腸結(jié)核的鑒別。雷少妮等[7]的研究對T-spot.TB 鑒別克羅恩病和腸結(jié)核的價值進(jìn)行了探討,靈敏度、特異度分別為93.3% 、85.7%,并認(rèn)為T-spot.TB檢測有助于克羅恩病和ITB的鑒別。Beom 等[8]的研究也證實(shí)了T-spot.TB在克羅恩病和腸結(jié)核中的鑒別價值,其診斷腸結(jié)核的靈敏度為67%,特異度達(dá)到90%,陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值也分別達(dá)到87%和73%。本研究結(jié)果顯示T-spot.TB鑒別克羅恩病和腸結(jié)核的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為91.9%、91.4%、91.7%、91.9%、91.4%,與雷少妮等[7]的結(jié)果一致,高于Beom等[8]的研究,可能與研究對象所處不同地區(qū)和不同生活環(huán)境有關(guān)。
CA125是一種高分子量糖蛋白,在結(jié)核病的診斷和鑒別診斷中有較高的價值,也有學(xué)者將其用于克羅恩病和腸結(jié)核的鑒別診斷,腸結(jié)核患者多合并肺部活動性結(jié)核,CA125主要是胸膜、腹膜間皮細(xì)胞或支氣管黏膜上皮細(xì)胞在結(jié)核炎性刺激下產(chǎn)生的[9]。本研究結(jié)果顯示腸結(jié)核患者血CA125的陽性率顯著高于克羅恩病患者,提示血CA125檢測對于克羅恩病和腸結(jié)核的鑒別有一定價值,但靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為78.4%、74.2%、76.3%、76.4%,均低于T-spot.TB檢測,提示其診斷價值低于T-spot.TB,可能的原因?yàn)椴糠諭TB患者未合并腸外結(jié)核,難以產(chǎn)生大量CA125,造成敏感性降低,而克羅恩病嚴(yán)重時也可存在透壁性炎癥,刺激腸道漿膜的間皮細(xì)胞分泌CA125,導(dǎo)致其血液中水平升高,降低了血CA125在檢測腸結(jié)核中的特異性。
綜上所述,T-spot.TB方便快捷,敏感性和特異性高,在克羅恩病和腸結(jié)核的鑒別診斷中具有重要價值,但T-spot.TB也存在著較小的假陽性率,如結(jié)合血CA125及其他檢測方式,更有利于兩者的鑒別。
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