胡蘆巴對(duì)糖尿病大鼠腎皮質(zhì)氧化應(yīng)激損傷的影響

萬明 劉紅梅 吳燕倪

摘 要：目的 觀察胡蘆巴對(duì)糖尿病大鼠腎皮質(zhì)氧化應(yīng)激指標(biāo)丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）水平，研究胡蘆巴對(duì)糖尿病大鼠腎皮質(zhì)氧化應(yīng)激損傷的影響。方法 將42只SD雄性大鼠應(yīng)用1%鏈脲佐菌素（STZ）制造糖尿病大鼠模型。13周后將造模成功的24只大鼠隨機(jī)分為糖尿病組和胡蘆巴干預(yù)組，以12只健康大鼠作為對(duì)照組。給藥組大鼠給予胡蘆巴每日固定時(shí)間連續(xù)灌胃2周，糖尿病組和對(duì)照組用自來水連續(xù)灌胃2周，至第14周結(jié)束。第14周結(jié)束時(shí)，檢測(cè)3組大鼠的血糖、體重、血肌酐、血尿素氮。取腎組織，制石蠟切片做PAS染色觀察腎小球腎小管形態(tài)學(xué)變化。取10%腎皮質(zhì)組織勻漿后測(cè)定丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）水平。結(jié)果 與對(duì)照組相比，糖尿病足大鼠血糖、血肌酐、血尿素氮均顯著升高（t=-50.018、-19.376、-19.613，均P<0.0167），胡蘆巴干預(yù)后，給藥組大鼠血肌酐、血尿素氮比糖尿病足有好轉(zhuǎn)趨勢(shì)（t=7.625、8.453，均P<0.0167），而給藥組體重和血糖與糖尿病組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-1.652、1.764，均P>0.0167）。與對(duì)照組相比，糖尿病組MDA水平明顯增加（t=-10.542，P<0.0167），而SOD、CAT水平降低（t=8.018、8.167，P<0.0167）；而與糖尿病足相比，給藥組SOD水平升高（t=-12.203，P<0.0167），MDA水平降低（t=4.368，P<0.0167），兩組CAT水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-3.029，P>0.0167）。腎組織切片顯示對(duì)照組大鼠基底膜完整無增厚，糖尿病組大鼠腎小球系膜基質(zhì)增多，系膜細(xì)胞增生，給藥組較糖尿病組減輕。結(jié)論 胡蘆巴對(duì)糖尿病大鼠腎皮質(zhì)氧化應(yīng)激損傷有一定的保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞：復(fù)方胡蘆巴 糖尿病 影響 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

中圖分類號(hào)：R285.5；G64 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-3791（2014）11（a）-0194-02

糖尿病腎病是糖尿病最常見的慢性并發(fā)癥之一，也是糖尿病致死、致殘的主要原因之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，大約40%的糖尿病人發(fā)生糖尿病腎病。糖尿病腎病臨床缺乏有效的治療手段。因此，預(yù)防或延緩糖尿病腎病的發(fā)生和發(fā)展對(duì)提高糖尿病患者的生存、改善生活質(zhì)量和減輕糖尿病帶來的沉重負(fù)擔(dān)具有十分重要的社會(huì)意義和經(jīng)濟(jì)意義。胡蘆巴對(duì)糖尿病動(dòng)物有降血糖活性，兼具磺酰脲類和雙胍類口服降糖藥的特點(diǎn)。近年來，胡蘆巴的抗糖尿病作用越來越受到關(guān)注，其他作者在不同糖尿病動(dòng)物模型的研究結(jié)果也證實(shí)了胡蘆巴具有降低血糖的作用。

1 材料

1.1 動(dòng)物

SD大鼠、清潔級(jí)、體重180±20 g，雌雄各半，由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)SCXK（新）2003-0001。

1.2 藥品、試劑與儀器

胡蘆巴（新疆特豐制藥廠，批號(hào)20130511）；鏈脲佐菌素（STZ，美國(guó)Sigma公司）；三諾安穩(wěn)血糖測(cè)試儀；MDA、CAT、SOD試劑盒均購自南京建成生物公司。BECXMAN全自動(dòng)生化分析儀（美國(guó)貝克曼公司），721分光光度計(jì)（上海第三分析儀器廠），高速離心機(jī)，組織勻漿器，電子分析天平等。

2 方法

2.1 動(dòng)物給藥方法及模型的建立

將30只SD雄性大鼠應(yīng)用1%鏈脲佐菌素（STZ）制造糖尿病大鼠模型。13周后將造模成功的24只大鼠隨機(jī)分為糖尿病組和胡蘆巴干預(yù)組，以12只健康大鼠作為對(duì)照組。糖尿病組大鼠給予胡蘆巴每日固定時(shí)間連續(xù)灌胃2周，糖尿病組和給藥組用自來水連續(xù)灌胃2周，至第14周結(jié)束。

2.2 指標(biāo)的檢測(cè)

第14周結(jié)束時(shí)，檢測(cè)3組大鼠的血糖、體重、血肌酐、血尿素氮。取腎組織，制石蠟切片做PAS染色觀察腎小球腎小管形態(tài)學(xué)變化。

2.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用單因素方差分析和獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，三組間的兩兩比較采用Bonferroni法進(jìn)行調(diào)整，以P<0.0167為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 胡蘆巴對(duì)各組大鼠的生化指標(biāo)的影響

糖尿病組大鼠多尿、多飲、體重減輕較明顯。與對(duì)照組比較，糖尿病組和給藥組血糖顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-50.018、-60.506，均P<0.0167）；給藥組血糖較糖尿病組低，但兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.764，P=0.088）；與對(duì)照組比較，糖尿病組和給藥組體重明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=5.768、9.605，均P<0.0167）；糖尿病組與給藥組體重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-1.767，P=0.108）（表1）。與對(duì)照組比較，糖尿病組和給藥組血肌酐顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-19.376、-19.106，均 P<0.0167）；給藥組血肌酐較糖尿病組下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=7.625，P<0.0167）。與對(duì)照組比較，糖尿病組和給藥組血尿素氮顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-19.613、-10.454，均P<0.0167）；給藥組血尿素氮較糖尿病組下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t= 8.453，P<0.0167）（表1）。

3.2 胡蘆巴對(duì)各組大鼠MDA、SOD、CAT水平的比較

與對(duì)照組比較，糖尿病組和給藥組MDA明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-10.542、-9.045，均P<0.0167）；給藥組腎組織MDA較糖尿病組有所下降（t=4.368，P<0.0167）。與對(duì)照組比較，糖尿病組SOD明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=8.018，P<0.0167），給藥組下降不明顯。給藥組SOD水平較糖尿病組增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-12.203，P<0.0167）。糖尿病組和給藥組CAT水平較對(duì)照組明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=8.167、4.733，均P<0.0167）；而給藥組CAT水平較糖尿病組有所增加，但兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-3.076，P=0.041）（表2）。

3.3 腎組織學(xué)病理變化

光鏡下顯示，正常組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)完整、清晰，無明顯病理學(xué)改變。糖尿病組大鼠腎小球系膜基質(zhì)明顯增多，系膜細(xì)胞增生。給藥組腎小球膜細(xì)胞及基質(zhì)較糖尿病組增生明顯減輕，基地膜增厚有減輕。

4 討論

氧化應(yīng)激是糖尿病的重要病理生理改變，在糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制中起重要作用，糖尿病時(shí)，以腎組織中糖代謝紊亂為主的多種因素綜合造成腎組織中化學(xué)性質(zhì)活潑的反應(yīng)氧產(chǎn)物產(chǎn)生過多，破壞腎組織正常的氧化＼還原反應(yīng)的動(dòng)態(tài)平衡，造成腎組織的氧化應(yīng)激狀態(tài)，啟動(dòng)糖尿病的發(fā)病并參與病情發(fā)展。抑制腎臟的氧化應(yīng)激，可有效治療糖尿病腎病。

該實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，糖尿病大鼠造模成功后，血糖、血尿素氮和肌酐、腎小球體積、腎小球系膜面積都比對(duì)照組大鼠要高，意味著糖尿病大鼠已經(jīng)出現(xiàn)腎臟損害。經(jīng)過胡蘆巴治療后，糖尿病大鼠的腎功能等各項(xiàng)指標(biāo)得到了不同程度的改善。實(shí)驗(yàn)中糖尿病大鼠腎皮質(zhì)組織MDA活性顯著升高，SOD、CAT則顯著下降，胡蘆巴給藥組大鼠MDA含量較糖尿病大鼠低，而抗氧化酶SOD、CAT水平上升，說明胡蘆巴對(duì)糖尿病狀態(tài)下腎臟內(nèi)氧自由基代謝具有調(diào)節(jié)作用，能提高機(jī)體的抗氧化能力。該實(shí)驗(yàn)通過胡蘆巴降低血糖，改善其脂代謝紊亂過程，提高腎臟抗氧化酶的活性，抑制腎臟氧化損傷，對(duì)糖尿病腎病具有防治作用。

參考文獻(xiàn)

[1] Roberts KT.The potential of fenugreek（Trigonella foenum-grae-cum）as a functional food and nutraceutical and its effects on glyce-mia and lipidemia[J].J Med Food，2011（14）：1485-1489.

[2] Phadnis M，Malhosia A，Singh SM，et al.Therapeutic effect of fen-ugreek seed on the patients suffering from diabetes mellitus type II[J].J Biol，Agric Healthcare，2011（1）：50-55.

[3] 石艷，苗春生，李才.胡蘆巴對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠腎臟病變的改善作用[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2003，29（4）：395-397.

[4] Eidi A，Eidi M，Sokhteh M.Effect of fenugreek（Trigonella foe-num-graecum L）seeds on serum parameters in normal and strepto-zotocin-induced diabetic rats[J].Nutr Res，2007（27）：728-733.

[5] Neeraja A，Rajyalakshmi P.Hypoglycemic effect of processedfenugreek seed in humans[J].J Food Sci and Tech，1996，33（5）：427-431.

[6] Tayyaba Z，Nazrul HS，Hasan SK.Evaluation of the oral hypoglycaemic effect of Trigonella foenum-graecum L.（methi）in normal mice[J].Ethnopharmacology，2001（75）：191-195.

[7] Brasch E，Uibricht C，Kuo G，et al.Therapeutic applications of fenugreek[J].Altern Med Rev，2003，8（1）：20-27.